Titta på ditt eget DNA från munepitelceller

Titta på ditt eget DNA från munepitelceller
Modifierad från Kemilärarnas Resurscentrumets instruktioner (http://www.krc.su.se/)
Teori:
DNA är en förkortning av engelskans deoxyribo-nucleic-acid. DNA finns inuti cellkärnan och
den utgör arvsmassan hos nästan alla levande organismer. I denna laboration ska du extrahera
fram ditt eget DNA från munepitelceller.
Material:
ca 2 %-ig NaCl-lösning i rent dricksglas el. liknande
Diskmedel med mörkgrön färg exv. Fairy
70% etanol (ej färgad, men teknisk sprit går bra), helst 98%
Provrör och kork, provrörshållare
Riskbedömning:
Etanol är giftigt och skall ej förtäras. Etanol är brandfarligt.
Utförande:
1. Tag en munfull av saltlösningen och gurgla med detta i ca 1,5 minuter
2. Spotta/skölj ner allt i ett glas
3. Pipetera ca 2 ml av lösningen i ett provrör
4. Tillsätt ca 0,5 ml diskmedel (A)
5. Sätt på parafilm som ”kork” och skaka ordentligt en liten stund (ca 30 sek)
6. Tillsätt ca 1 ml etanol (B) och låt stå i några minuter tills det slutar bubbla
7. I skiktet mellan ”spottlösningen” och spriten ser du nu vita trådar. Detta är ditt DNA!
Frågor att besvara:
1. Vad tror du saltlösningen har för funktion?
2. Varför tillsätter man diskmedel?
3. Varför tillsätter man etanol?
Svar på frågorna:
1. När man gurglar munnen med saltlösningen lossnar
munepitelceller (hudceller från munnens ytskikt)
från kinden.
2. Cellen har en cellmembran, som är uppbyggd av bla
fett. Då vi häller på diskmedel, söndras
cellmembranen, och cellkärnan med DNA Ofärgad DNA sträng (och protein)
blottläggs. Även proteiner denatureras av från munepitel i ca 100 x förstoring.
diskmedlet, vilket gör att vi kan se en viss
”gegga” runt DNA trådarna.
3. När vi häller på alkohol dras DNA mot detta. Vatten och alkohol blandar sig inte så gärna
(i stark saltlösning) och DNA är inte lösligt i alkohol. Därför fälls DNA ut som vita
gelé/trådar i gränsskiktet mellan prov-/diskmedelsblandningen och etanolen. Eftersom
vatten är tyngre än etanol kan vi se DNA längst upp i etanol-skiktet.