Labmedicin Klinisk mikrobiologi CRYPTOSPORIDIUM SPP INDIKATION/ MEDICINSK BAKGRUND Hos immunkompetenta individer orsakar Cryptosporidium en självläkande sjukdom med vattentunn diarré, vanligtvis utan blod. Inkubationstiden är 2 till 20 dagar och i sjukdomsbilden kan även kräkning, viktminskning, magkramp, muskelvärk och feber ingå. I genomsnitt varar symtomen i ett par veckor. Cryptosporidium är också en vanlig orsak till diarré hos små barn i utvecklingsländer, ofta associerad med malnutrition. Hos aidspatienter kan Cryptosporidium orsaka en allvarlig koleralik sjukdom som kräver intravenös rehydrering. Patienter med låga CD4 tal riskerar att utveckla kronisk kryptosporidios. Även respiratorisk kryptosporidios samt kolecystit och pankreatit associerad med Cryptosporidium har beskrivits hos aidspatienter. Asymtomatiska och lindriga fall av kryptosporidios finns beskrivna i alla patientgrupper. Cryptosporidium är en intracellulär protozo som sedan den under 80-talet blev känd som humanpatogen hos immunsuprimerade AIDS-patienter beskrivits i samband med turistdiarré, vattenburna utbrott och utbrott på daghem etc. Den orsakar diarré hos kalvar, och finns hos flera olika djurarter. Ett flertal olika arter av Cryptosporidium finns beskrivna varav främst två, Cryptosporidium hominis och Cryptosporidium parvum, är förknippade med infektion hos människa. C. hominis infekterar så gott som uteslutande människor medan C. parvum kan infektera de flesta däggdjur. En tredje art, Cryptosporidium meleagridis, har på senare år diagnostiserats framför allt hos resenärer som varit i Asien. Även andra arter kan infektera människa. Människor och djur blir smittade via intag av infektiösa oocystor, som i tunntarmen frigör sporozoitformen, som invaderar enterocyterna längs tarmväggen. Parasiten etablerar snabbt en intracellulär nisch som är unik för Cryptosporidium, och utsöndrar både tunnväggiga oocystor, som kan leda till autoinfektion, och tjockväggiga oocystor. Dessa är mycket motståndskraftiga mot olika desinfektionsmedel och kan överleva i klorerat dricksvatten. De vanligaste smittvägarna är via kontakt med infekterade djur, vanligen kalvar eller lamm, person till person smitta eller via infekterat vatten eller föda. Cryptosporidium förekommer globalt, men är vanligast i områden med dålig omgivningshygien. METOD/ANALYSPRINCIP Mikroskopi Mikroskopisk påvisning av oocystor i faeces efter metanolfixering. Modifierad Ziehl-Neelsenfärgning för påvisande av Cryptosporidium och Cyclospora, som är syrafasta. Eftersom intermittent utsöndring förekommer, och symptomdebuten kan föregå cystutsöndring, rekommenderas upprepade (3-4) prover tagna med intervaller på 1-2 dygn. Vid kraftig diarré och negativa fynd bör ny provtagning göras efter att diarrén har upphört. Diagnostiken baseras på morfologi och positivt fynd är diagnostiskt. Dokumentförvaltare: Sara Karlsson Söbirk 2015-03-17 Labmedicin Klinisk mikrobiologi Tarmprotozoer, DNA-påvisning En kvalitativ realtids-PCR. Vid detektion av C. parvum/C. hominis amplifieras ett fragment av genen som kodar för ett DNA-J-like protein. För visualisering av produkter används MGBoch Taqman-prober där C. parvum/ C. hominis analyseras i duplex. Inhibitionskontrollen, Escherichia coli, körs i eget rör och förväntas förekomma i varje prov. SVAR/TOLKNING Mikroskopi i faeces Prov besvaras 1-4 vardagar efter det att provet anlänt till laboratoriet. Positivt svar Förekomst av Cryptosporidium species Cyclospora cayetanensis Isospora species Oocystor Negativt svar Ingen förekomst av Cryptosporidium Ingen förekomst av Cyclospora Ingen förekomst av Isospora Ingen förekomst av Oocystor Tarmprotozoer, DNA-påvisning ++ Påvisat ++ EJ påvisat Ej bedömbart REFERENSER Referensmetodikportalen, Parasitologisk diagnostik (webbsida 2015-02-16) http://referensmetodik.folkhalsomyndigheten.se Smittskyddsblad (webbsida 2014-02-16) http://www.skane.se/sv/Webbplatser/Smittskydd-Skane-samlingsnod/Valkommen-till-SmittskyddSkane/VardgivareSamarbetspartners/Sjukdomar1/ Dokumentförvaltare: Sara Karlsson Söbirk 2015-03-17