Blodtest för att påvisa glutenintolerans
Bakgrund
Glutenintolerans (celiaki) är en livslång sjukdom som ger
diarré, förstoppning, viktminskning, undernäring och
hudirritation. Tarmvilli bryts ner. Orsaken är överkänslighet
mot glutenproteiner som finns i vete, råg och korn.
Vid glutenintolerans fungerar vävnadstransglutaminas(tTG)
i de röda blodkropparna som autoantigen varvid antikroppar
bildas.
Blodtestet visar på vävnadstransglutaminas antikroppar i
blod och indikerar därmed med stor sannolikhet
glutenintolerans.
SELF TRANSGLUTAMINASE-BASED
ONE-MINUTE ONSITE BLOOD TEST
FOR CELIAC DISEASE
Ilma Korponay-Szabó, Tiina Raivio, Katri Kaukinen,
Judit B.Kovács, Pekka Collin, Kaija Laurila,
Jukka Partanen, Markku Mäki
Pediatric Research Centre and Dept. of Internal Medicine,
University of Tampere, Finland,
University of Debrecen, Debrecen, Hungary
Heim Pál Children’s Hospital, Budapest, Hungary
Principen för testet
Transglutaminas(TG)-antigen
finns i normala röda blodkroppar.
TG
Testet prövar om det finns
antikroppar mot transglutaminas
i plasman i samma blodprov.
Hemolys
TG
TG
Bildning av
self-TG/anti-TG
komplex
Inbindning av det
märkta komplexet
av TG-binding
protein line
Märkt
(anti-IgA)
TG
TG
TG
TG
Testets uppbyggnad
Biocard™ Celiac Disease Test
AniBiotech, Vantaa, Finland
TEST RESULT
(at 5 minutes)
Positive
Negative
Celiac antibody
detection
Control line
Biocard™ Celiac Disease Test
AniBiotech, Vantaa, Finland
Testresultat före och efter ett års glutenfri diet
Ten of the 12 rapid
test+ coeliac patients
reevaluated after one
year on diet had
negative lateral flow
test result.
The two patients still
positive had TGantibody ELISA
levels near the cutoff (4.6 and 4.2
U/ml).
10,0
TG-Ab ELISA
U/ml
100,0
Cut-off
1,0
Before diet
After diet
positive lateral flow
negative lateral flow
Finns det gluten i glutenfri mat?
Hur kan vi detektera gluten?
Vilka olika slag av livsmedel kan innehålla gluten?
Är glutenfria livsmedel verkligen glutenfria?
Hur kan vi koppla undersökningarna av gluteninnehåll
till medicinska problem med glutenintolerans?
Vad är gluten?
Gluten finns i vete, råg och korn.
Gluten = 50% prolaminer (alkohollösliga, gliadin i vete,
sekalin i råg och hordein i korn) + 50 % gluteniner (lösliga i
alkali)
50% av gluteninnehållet i vete utgörs av gliadin.
Princip för testet
Metodens detektionsgräns: 1,5 ppm gliadin (3 ppm gluten).
En primär antikropp är fäst i botten av brunnarna på mikrotiterplattan
Den primära antikroppen fångar in gliadiner o motsvarande proteiner från
råg och korn. Antigen-antikroppskomplex bildas.
Plattan inkuberas och gliadiner som inte bundits tvättas bort.
En sekundär antikropp (samma som den primära) tillsätts, märkt med
peroxidas. Denna binder till gliadin-antikroppskomplexet.
Ett substrat till peroxidaset tillsätts samt ett ämne som ger färgreaktion
(gul färg).
Stopplösning tillsätts som gör att den blå färgen ändras till gul.
Det gula färgen är proportionell mot mängden gliadin i provet.
(Absorbansen mäts vid 450 nm.)
Genomförande av glutentestet
Varje grupp får 2 strips med vardera 8 brunnar.
1-6 brunnar i en strip används till gliadin-
standardkoncentrationer. 1 brunn används till en
referenslösning med känd gliadinhalt. 1 brunn kan lämnas
tom.
8 brunnar i den andra stripen fylls med olika provlösningar
(valfria, men välj 2-4 lösningar som man säkert kan förvänta
sig innehålla gluten).
Virusinfektion hos pelargoner
Pelargonium Flower Break Virus (PFBV)
•
Testet innehåller 16 brunnar med 8 brunnar per strip.
•
Varje strip har en kontroll, antingen en positiv eller en
negativ kontroll.
•
Varje strip har alltså 7 brunnar där extrakt från
pelargonblad kan testas.
•
Varje grupp (2 personer) preparerar och filtrerar
lösningarna från två eller tre pelargonblad, samt droppar i
extrakten på rätt ställen i brunnarna.
•
Från och med punkt 6 i beskrivnigen fördelar storgruppen
(6 personer) sedan arbetet internt. Två storgrupperna om
4-5 personer tar hand om var sin strip.
