Labmedicin Klinisk mikrobiologi BLODPARASITER MIKROSKOPI Malariaplasmodier, mikrofilarier och trypanosomer INDIKATION/ MEDICINSK BAKGRUND Malaria Det finns mer än 100 arter av Plasmodium som infekterar olika djur (däggdjur, reptiler och fåglar). Fem arter, P. falciparum, P. vivax, P. ovale, P. malariae och P. knowlesi sprids mellan människor genom bett av Anopheles-myggor. Flera av de arter som infekterar apor (P. brasilianum, P. cynomolgi, P. inui, P. knowlesi, P. schwetzi och P. simium) kan även smitta människor. Den humana P. malariae kan infektera både människor och apor. Malariaparasiter är dock i övrigt starkt artspecifika, varför apmalaria har ansetts mycket ovanlig hos människor. Fynden i malaysiska Borneo av ett stort antal malariafall orsakade av P. knowlesi (som normalt infekterar makakapor) under senare år har ändrat denna syn, och arten räknas nu som den femte humana malariaparasiten. P. knowlesi har en 24-timmars livscykel vilket snabbt leder till höggradig parasitemi, som kan orsaka allvarlig sjukdom och dödlig utgång. Cerebral malaria har dock ej påvisats hos P. knowlesi-infekterade patienter. Vid mikroskopisk undersökning liknar parasiten mest P. malariae, men de tidiga stadierna kan även likna P. falciparum. Blandinfektioner med P. knowlesi och P. falciparum, P. vivax respektive P. ovale kan förekomma, vilket försvårar diagnostiken. Om malariaparasiter påvisas hos en patient som vistats i Sydostasien måste P. knowlesi hållas i åtanke. Filariasis Orsakas av rundmaskar, nematoder, vars larver sprids av myggor. Lymfatisk filiariasis – förekommer på tropiska breddgrader och orsakas av Wuchereria bancrofti, Brugia malayi eller B. timori. W. bancrofti förekommer globalt och har endast människan som reservoar. B. malayi och B. timori har mer begränsad utbredning i Asien och Stillahavsöarna. Maskarna infekterar lymfsystemet. De flesta infekterade människor får inga eller få symptom, men hos andra orsakar infektionen lymfödem, permanent uppsvällda kroppsdelar (elefantiasis) och akuta sekundära bakterieinfektioner. Subkutan filiariasis – orsakas av Loa loa (ögonmasken) och Mansonella streptocerca (utbredning Afrika), Mansonella perstans och Onchocerca volvulus (utbredning Afrika och Centralamerika), och Mansonella ozzardi (Amerikanska kontinenten). Trypanosomiasis Tre arter av blodflagellater, Trypanosoma, orsakar sjukdom hos människan - T. brucei gambiense (utbredning västra och centrala Afrika) och T. brucei rhodesiense (östra Afrika) orsakar afrikansk trypanosomiasis eller sömnsjuka och T. cruzi (Central- och Sydamerika) orsakar Amerikansk trypanosomiasis eller Chagas sjukdom. Dessa sjukdomar skiljer sig åt avseende vektor (tse-tsefluga respektive en blodsugande, icke-flygande skalbagge) och sjukdomsform. Sjukdomarna förekommer inte i Sverige men har hos oss någon enstaka gång diagnostiserats hos personer som vistats i tropiska Afrika, respektive Central- och Sydamerika. Faktaägare: Elisabet Holst 2014-12-10 Labmedicin Klinisk mikrobiologi METOD/ ANALYSPRINCIP Mikroskopisk påvisning av malariaparasiter i insända blodutstryk. Vid infektion med Plasmodium falciparum beräknas parasitemi-graden (dvs. procent infekterade röda blodkroppar). Mikroskopisk påvisning av mikrofilarier i EDTA- eller heparinblod. Mikroskopisk påvisning av Trypanosoma arter i blodutstrykspreparat. Det är inte möjligt att särskilja T.brucei spp. gambiense från T.brucei spp. rhodesiense. PROVTAGNING Malaria Malariadiagnostik utförs vardagar efter telefonöverenskommelse. Övrig tid kontaktas Infektionsklinikens jour. Blodutstryk. Av kapillärblod görs tunna utstryk (diff-utstryk) och tjocka droppar på objektglas. Minst två utstryk av varje. Prov tas snarast möjligt vid malariamisstanke. Det är inte av avgörande betydelse att avvakta till nästa feberattack. Alla antikoagulanter påverkar morfologin hos malariaparasiter och infekterade blodkroppar vilket försvårar, eller omöjliggör, en adekvat diagnostik. Tunt utstryk görs som för differentialräkning med hjälp av ett objektglas och lufttorkas. Tjockt utstryk görs genom att en från fingret hängande bloddroppe sätts till ett objektglas. Med hörnan av ett objektglas fördelas droppen snabbt och försiktigt till en cirkel med 10-15 mm diameter. Efter lufttorkning i lutande ställning ska preparatet vara homogent och inte krackelerat och en tryckt text ska kunna läsas genom utstryket. Filariasis 10 ml venblod tas i vaccutainer-rör med EDTA (lila kork) eller heparin (grön kork). Även hydrocelevätska kan undersökas. Prov tas i ett sterilt rör. För påvisning av mikrofilarier med daglig eller ingen periodicitet, som Loa loa respektive Mansonella, tas prov mitt på dagen (mellan kl 12 och 14). För mikrofilarier med nattlig periodicitet, som Wuchereria bancrofti och Brugia malayi, tas prov vid midnatt. Vid misstanke om filariainfektionen onchocerciasis, ”flodblindhet”, tas hudbiopsi som transporteras i ett sterilt rör med några droppar steril NaCl. Prov förvaras kylt i avvaktan på transport. Provet transporteras snarast till laboratoriet, tid från provtagning till omhändertagning i laboratoriet skall ej överstiga 24 tim. Trypanosomiasis För diagnostik av afrikanska trypanosomer (”sömnsjuka”) samt Sydamerikanska trypanosomer (Trypanosoma cruzi) som kan påvisas i ett tidigt skede av Chagas sjukdom, görs 2 – 4 utstryk av tjock droppe av blod. Aspirat från förstorade lymfkörtlar appliceras på objektglas eller transporteras i ett sterilt rör. Utstryk sänds lufttorkade i särskild behållare till laboratoriet. I ett sent skede av afrikansk trypanosomiasis kan trypomastigoter påvisas i likvor (i tidigt skede får lumbalpunktion ej utföras pga risk för överföring av trypanosomer till centrala nervsystemet). Prov transporteras i sterilt rör för likvorprov. SVAR/ TOLKNING Förekomst av - respektive parasit. Ingen förekomst av malaria-plasmodier, mikrofilarier eller trypanosomer. Svar tidigast efter ett dygn efter provets ankomst till lab. Faktaägare: Elisabet Holst 2014-12-10 Labmedicin Klinisk mikrobiologi ÖVRIG INFORMATION Malaria är en anmälningspliktig sjukdom enligt smittskyddslagen. REFERENSER 1. Cook G.C. & Zumla A.I. (ed). 2009. Manson’s Tropical Diseases. 22nd edition. Saunders, London. 2. Garcia L.S. 2007. Diagnostic Medical Parasitology. 5th edition. American Society for Microbiology, Washington D.C. Faktaägare: Elisabet Holst 2014-12-10