8{10)
rriTEL: Förbättrad utvärdering av vacciner mot infektionssjukdomer och cancer
~ÖKORD : vaccin, HIV, HCV, cancer, mus
[sYFTET MED FÖRSÖKET: Syftet med försöken ar att utvärdera nya vaccinstrategier mot viktiga
·nfektionssjukdomar i världen såsom HIV och hepatit C och cancer för att senare utarbeta behandlingsprotokoll för
kliniska prövningar samt att utveckla teknik som gör det möjligt att märkbart minska ett antal djur och djurförsök som
!behövs för vaccinprövningar.
FÖRSÖKETS MAL: För att utveckla ett vaccin mot infektionssjukdom eller cancer behöver man pröva
immuniseringseffekten på djur. För att kunna välja vilket vaccin som har bast effekt behöver immunsvarets celler
samlas från djuret och undersökas i provrör. Dessa upprepade provtagningar skulle kunna minimeras om man kunde
ölja vaccineffekten direkt i djurets kropp. Vi utvecklar en teknik som tillåter detta. För att göra vacciner synliga ska de
blandas med ljusproducerande reporterer (äggviteämnet eller producent av aggviteämnet). Sedan registrerar vi ljus
som alstras inne i kroppen med en ultrakänslig detektor/kamera (IVIS). Ljusets styrka kan följas över tid. Om det
utsläcks i förtid, ar detta relaterat till att immunförsvaret agerat och eliminerat de celler som uttrycker äggviteämnet
ifråga. Således kan reportern beteende visa hur stark är vaccinets effekt.
Här ges ett typexempel på vaccinförsök hos mus.
(1) 1O möss sprutas med ett genetiskt vaccin X. Sprutning följs med elektroporering.
2) 10 andra möss sprutas med ett genetiskt vaccin X utan elektroporering .
(3) 10 möss till sprutas med genetiskt material som inte kan producera vaccinet som en kontroll.
Immunsvaret ska testas 2 och 4 veckor efter vaccinering. Vid varje tillft:\lle 5 möss i varje grupp skall avlivas,
Iniältarna tas och immunceller skall isoleras och används för immunologiska tester för att påvisa utvecklingen av
immunförsvar mot vaccinet. Genom sådana tester kan man påvisa aktivitet av det genetiska vaccinet X i grupperna
1#1 och #2 jamfört med kontrollen #3. Man kan också uppskatta om elektroporering förstärker Immunsvaret i grupp #1
'ämfört med grupp #2 (Detta var fallet l föregående undersökning). Genetiska vaccinet möt HIV har på detta st:\tt
identifierats och en klinisk prövning med elektroporering pågår nu i Tanzania och Mocambique. Genom IVIS mätning
fav musen kan mellanligande experiment undvikas och antal djur i försöket kan minskas till15 (5 i varje grupp).
POTENTIELLA NYTTOR: Nya vaccinstrategier mot viktiga infektionssjukdomar i variden såsom HIV och hepatit C
och cancer kommer att utvärderas för att senare utarbeta behandlingsprotokoll för kliniska prövningar. Dessutom
hoppas vi att etablera ny teknologin för in viva mattning av vaccinreaktion sk IVIS som ett substitut för en del av
immuntester av vaccinaktivitet Detta kommer att betydligt minska antalet djur som används i preklinisk testning av
vacclnkandidater. Ersättning av immuntester med in vivo manitorering skulle spara arbete, tid och reagens resurser
och tillåta val av aktiva vaccinkandidater på så kort som 15-20 dagar efter första vaccinering. Metoden kommer att
utvecklas vidare för att kunna mäta funktionalitet av immunsvaret som ett alternativ till funktionalitet prövning med
umör eller levande virus (så kallade "challenge"). De ska göra möjligt immunsvar funktionalitettester i fall där ingen
virus "challenge" kan utföras såsom för HIV i möss.
VILKA ARTER SOM ANVÄNDAS: Vi anvander Mus musculus, max 600 möss/år jämfört med tidigare 900 möss/år i
!....tack vare IVIS tekniken.
FÖRVÄNTADE NEGATIVA EFFEKTER PA DJUREN: Svårighets graden förväntas vara ringa till måttlig. Tidigare
försök visade ingen påverkan av vacciner eller vaccineringsmetoder avseende viktutveckling, foder- eller vattenintag
!samt musbeteende. Vi har ett tiotal publikationer angående preklinisk och klinisk forskning och lång erfarenhet av
~jurförsök. Darför ar vi övertygade om att vi kan utföra alla moment i djurförsöken på ett satt som ger minsta möjliga
obehag för djuren.
I3R- ERSÄTIA: Någon djurart måste användas före vaccinförsök kan göras på manniska. Immunsystemet låter sig
inte enkelt aktiveras i vävnadskultur. Men vi planerar att introducera ett antal in vitro-tester för negativt kandidat
selektering vilket skulle minska antalet vacciner som anförts till prekliniska studier i djur.
3R- BEGRANSA: Vi använder möss i ett antal som medger signifikans mellan resultat i grupper som jämförs. Men vi
har redan markbart reducerad antal möss som används eftersom vi har tagit bort mellanliggande immuntester som
kräver att djur avlivas. Antalet använda djur kommer att ytterligare minskas med in vivo matmetoden genom
·nsamling av mer information från varje enskilt djur.
3R - FÖRFINA: Vi kommer att minska antalet av blödningar som gjorts för att samla blodceller för immuntester,
genom att ersätta dessa tester med analoga in vivo matningar. In vivo mätmetoden ska också användas som ett
!alternativ till att pröva immunsvars funktionalltet med tumör eller levande virus "challenge". Det ska ytterligare
reducera antalet använda djur och också minska djurförsöks svårighetsgrad.
~ALET AV DJUR OCH VÄLLFÄRDSUTVECKLING: Mus är lämplig eftersom mycket reagenser finns för
·mmunmätning. Man skulle kunna ersatta möss med tex marsvin eller apförsök. Men för mus finns de mest varierade
p ch specificera reagenserna för att mäta immunceller, antikroppar och naturlig immunitetsutveckling, därför kan man
!samla mer information om ett kandidatvaccin beteende i ett enskilt djurförsök i möss än i flera experiment i någon
annan djurart. Till vällfärdsutvecklingen kan vi hanföra redu ktion av antalet djur samt antalet blodtappningar per djur.
.
Anslag från Velenskåpsrådet erhölls 2011 för denna frågestä llning.
