Hadija Trojer Bacillus subtilis—endosporbildande bakterier Bacillus subtilis är en stavformad, icke patogen endospor-bildande bakterie som finns i jord. Namnet endospor kommer från att en spor bildas i bakteriecellen i en process som kallas för sporulering. Denna process aktiveras i slutet av bakteriens tillväxtfas när den utsätts för svält. Bara bakterier av få släkten kan bilda endosporer. En endospor kan överleva i flera decennier och är resistent mot värme, toxiska kemikalier, strålning, och andra faktorer som kan skada vanliga celler. En endospor har tre skyddande skikt: core, cortex och coat. Core motsvarar cytoplasma och innehåller särskilda proteiner som bland annat skyddar DNA. Cortex består av en tjock och stel cellvägg som skyddar endosporen mot värme. Coat består av två lager av proteiner vilka fungerar som barriär och skydd mot den yttre miljön. I den här studien analyserade jag om två gener, yyaD och yjcA är viktiga för bildandet av endosporcortex. Inaktivering av respektive gen skulle kunna påverka syntes av cortex och detta undersöktes genom att endosporer som bildas av mutanten utsätts för värme (80ºC). I kontrast till normala endosporer förväntas de som är defekta i cortex att dö vid värmebehandling. En yyaD—defekt mutant konstruerades och undersöktes för tillväxt och sporulering. Resultatet visade att yyaD—genen inte är viktig för syntes av endospor cortex. Det återstår att ta reda på om yjcA—genen är viktig för sporulering. Handledare: Lars Hederstedt och Mirja Möller Examensarbete 20 p i Mikrobiologi. HT 2005 Institutionen för cell- och organismbiologi, Lund Universitet 1 Hadija Trojer Are the Bacillus subtilis yjcA and yyaD genes important for endospore cortex formation? ABSTRACT Bacillus subtilis is a gram positive endospore-forming bacterium. The endospore is formed through a series of morphological stages in a process called sporulation. A mature spore is composed of core, cortex and coat. The stoA gene in B. subtilis is expressed from both a σE- and σG- dependent promoter. StoA is localized in the space between the two membranes that surround the prespore. The aim of this project was to analyze if YjcA and YyaD are substrate proteins for StoA and important for sporulation. The study showed that yyaD is not important for the production of heat-resistance spores. Therefore YyaD is excluded as a candidate StoA substrate protein. The question about yjcA is still open and many additional experiments are needed to be done. 2