Jästhantering Jästhantering Maarten Vanwildemeersch SBR, 101012 http://saccharolicious.blogspot.com • • • • • • • • Saccharomyces cerevisiae Jästcellens metabolism Förkultur Återanvändning av jäst Yeast farming Skörda jäst från öl Renstryckning Odla vild jäst och bakterier Infektioner Tillväxt och metabolism i jäshinken • Lagfasen (anpassning) – När jäst kommer i kontakt med vört tar den up O2 och näring från vörten • • Förökar sig asexuell: varje dottercell är en exakt kopia av modercellen och har därför samma egenskaper • Olika stammar har uppstått främst genom mutationer Logfasen (tillväxt) – Jästen är full med näring och syre och delar sig aktivt – I närvara av O2 kan jästen dela sig eftersom respiration genererar 19 ggr mer energi än fermentation (38 mol ATP vs 2 mol ATP per mol glukos) – O2 behövs även till produktionen av steroler och fettsyror – Ingen alcoholproduktion • Anaerob metabolism: – När O 2 tar slut börjar jästen fermentera. – Fermentation genererar mindre energi, men mer alkohol. Sjohej! Herskowitch, Microbiological Reviews, 1988 Vad behöver jäst? • Vört, vört, vört! • Vört innhehåller allt jäst behöver. Man kan dock med fördel tillsätta lite jästnäring (Zn, vitaminer, …) • Jäst behöver näring, inte bara energi. Sockervatten är inget alternativ! • Äppeljuice är billig, och jästen kommer att växa i det med. Men juice innhåller sockerarter som är lätt fermenterbara, och jästen kan bli lat eller tappa förmågan att fermentera maltos inom några generationer. • Vill man odla upp t.ex. lambik kultur kan man använda tomatjuice. Då växer bakterier och jäster ungefär lika fort Förkultur Viktiga parametrar: • OG: bäst 1030-1040, tillräkligt med näring utan att stressa jäst. Mår jästen dålig kan man ha 1020 i början för att få den i form igen • O2 : behövs för tillväxten • CO2 : hämmar tillväxten • Skaka & omröra: tillsätter O 2 och driver bort CO2 • Temperatur: helst rumstemperatur • Om man börjar med lite jäst kan man öka volymen 5-10 ggr/24h (e.g. 10 ml -> 100 ml -> 1l) • Hur mycket förkultur: www.mrmalty.com 1 Syresätta vörten • Jäst behöver syre för att föröka och bilda fettsyror och steroler • Utan syre ingen tillväxt • Alvernativ metod: mata jäst med lite olivolja (6 mg/20 l) i stället av syresätta vört – Olivolja innhehåller osaturerade fettsyror (oljesyra), så jästen behöver inte O2 för att göra dem själv. – Långsammare fermentation, men mindre oxidation Återanvända jäst • Top cropping – Bra kvalitet, aktiv jäst – Kan vara svårt att arbeta sterilt, mindre mängd • Återanvända hela jästkakan – För mycket jäst, risk för autolys, döda jästceller • Skölja jäst – – – – Samla sediment, tvätta med sterilt vatten Mer jäst Risk att selektera för mer/mindre flokulerande jäst Infektionsrisk ökar per generation • Tvätta jäst – Skölja med syra (mjölksyra pH 2) – Syra dödar bakterier och tvättar bort trub http://home.comcast.net/~wnevits/wizards/yeast_washing_rev_5.pdf Risker med återanvändning • • • • • Infektion Autolys För mycket jäst Mutationer, “genetisk drift” Jäst kan förbruka sina reserver under förvaring om det finns näring och syre • Stress: alcohol, humle, näringsbrist, osmotiskt tryck Mutationer • Omgivningen kan ge fördel till vissa mutationer: – Tillväxthastighet – Alkoholtolerans – Flockulering • Ju fler generationer, desto större mutationsrisk • Det är lättare att få en sämre än en bättre jäststamm genom mutation • Jäststammar är selekterade för smak/aroma och utjäsning. Mutationer kan gå på smakens bekostnad om sämre smak ger bättre tillväxt 2 Yeast farming • Varför? – Det är roligt – Spara jäst som man odlar från flaska – Garanterad tillgång till din favoritjäst – Året runt tillgång till tillfälliga stammar – Byta jäst med andra – Slippa köpa smackpacks, men ändå tillgång till bra jäst Yeast farming • Vad behöver man? – Flyttande medium: vört – Fast medium: vört + agar (15 g/l) eller gelatinpulver (fast gelé) – Glasrör/flaskor/burkar – Alcohol (ytdesinfektion) – Brännare – Inokulationsögla – Glycerol Semi-sterilt arbete • Sterilt = fritt fån bakterier, virus, jäst, mögel, sporer • För avdödning av sporer behövs autoklavering (20 min, 121 °C) • Oftast räcker semi-sterilt arbete (koka i 10 min, etc), eftersom det dödar det mesta, och de flesta mikroorganismer inte växer bra i öl (lågt pH, anaerob). Jobba alltid så rent som möjligt! • Riskfaktorer: luftflöde, händer, damm, malt (mjölsyrebakterier och mögel) Skörda jäst från öl • Fast kultur: – Fördel: selektera frisk jäst, ren stamm från blandat kultur – Nackdel: mer jobb – Desinfektera flaskhalsen med sprit – Häll ölen i ett glas, men spara bottensats – Drick ölen – Häll bottensats på fast vörtagar eller liknande och sprid ut – ställ varm – När kolonier blir synliga, selektera en och gör en renstryckning Skörda jäst från öl • Flytande kultur: – – – – – Fördel: enkelt, nackdel: ingen ren kultur Desinfektera flaskhalsen med sprit Häll ölen i ett glas, men spara bottensats Drick ölen Häll ca. 10 ml sterilt vört i flaskan och täck med aluminiumfolie – Skaka om flera ggr varje dag – När jästen visar aktivitet, öka volymen med mer vört som i förkultur Renstryckning • Används för att få en ren kultur • Test för jästens renheten, infektion 3 Förvara jäst i kylen • Fast medium: – – – – Stryck ut en koloni på fast medium Låt växa 2-3 dagar i rumstemperatur Förvara i kylen (3-6 månader) OBS! Är locket för tätt kan CO2 tryck byggas upp. Är det för löst kan mediet torka upp • Flyttande medium: – Jäst mår rätt bra under låg alcohol och låg humle öl (stannar i ide), alternativt sterilt vatten – Undvik syresättning, då kan jästen använda upp sina reserver Odla bakterier och vild jäst • Blandade kulturer kan man renstrycka och isolera olika stammar från enstaka kolonier • Brett & Pedio växer långsamt! • Brettanomyces: normal fast medium + 0,5-2% CaCO3 för att neutralisera syra • Pediococcus växer bäst i vört med 10% äpple/tomatjuice utan O2 • http://bergsman.org/jeremy/lambic/bugs.html Förvara jäst i frysen • Gör en förkultur och låt den fermentera ut • Låt jästen stå 24 h i kylen • Häll av vört och blanda 2 volymer jäst med 1 volym sterilt vatten och 1 volym steril glycerol i ett sterilt rör • Frys ner och förhindra uptinning • För att använda, gör en förkultur (2 ml ->10-> 100->…), hellst efter renstryckning Infektion? • Släng din jäst! • Vill du rädda en värdeful jäst kan du tvätta med syra eller göra en renstryckning. • Tillsätt bredspektrum antibiotika (cycloheximide) till fast medium: svårt att få tag på. Finns i sabouraud agar. 4