Påvisande av proteiner - Biurétprovet Demonstration: Visa på den klassiska rektion för proteiner. Om demon: Gymnasiet Tid: 5 min Teori: Den mat vi äter måste innehålla proteiner. Protein är nödvändigt för t.ex. cellernas uppbyggnad, för bildandet av hormoner, enzymer och delar av immunförsvaret. Vilka av våra födoämnen innehåller proteiner? Material: Proteinrika livsmedel (t.ex. kött, fisk, ägg, ärtor eller bönor), bägare 250 ml, provrör, kopparsulfatlösning (1 mol/dm3), natriumhydroxidlösning (1 mol/dm3), albustix och pipetter. Riskbedömning: Natriumhydroxid är frätande.Använd skyddsglasögon och personlig skyddsutrustning. En riskbedömning ges av undervisande lärare. Utförande: 1. Börja med att finfördela det livsmedel som ska testas. Lägg det finfördelade i en bägare, häll på vatten och rör eller vispa kraftigt. Låt det stå och dra i fem minuter. 2. Fyll ett provrör till hälften med vätska från bägaren. Tillsätt 10 droppar kopparsulfatlösning och natriumhydroxidlösning till färgomslag. Innehåller provet proteiner kommer det att anta en djupblå nyans 3. Man kan även påvisa proteiner med albustix-stickor. Jämför färgomslaget på stickorna med referensvärden som finns på förpackningen. Biurétreagens utan varken protein eller aminosyra Biurétreagens med protein Till Läraren: Proteiner är polymerer av aminosyror. Bindningen mellan aminosyrorna är en amidbindning (peptidbindning). I bindningen finns kväveatomer som bildar ett blåviolett komplex med kopparjonen (Cu2+). Intensiteten på färgen är proportionell mot antalet amidbindningar som komplexbinder. Gör man testet med aminosyror deltar även syret i bildandet av komplexet och färgen blir i stället åt det turkosa hållet. H O H N N O R1 N R2 O O R H2N Cu2+ H Amidbindning (peptidbindning) R O H NH2 R N R N H O N O H Ureidoformamid (bi urea) Blåviolett komplex mellan kopparjon och kväveatomerna i proteinkedjornas amidbindning Vid upphettning av urinämne bildas ett kristallint ämne, ureidoformamid, en sammanslagning av två ureamolekyler (bi urea). Vid behandling av biuret, aminosyror eller proteiner med alkalisk kopparsulfat får man olika färgomslag beroende på vilket komplex som bildas.