neisseria-klassifikation - Välkommen till Universitetssjukhuset Örebro

NEISSERIA-KLASSIFIKATION
Bakgrund
Kliniskt mikrobiologiska kliniken är referenslaboratorium i Sverige avseende patogena
Neisseria och omfattar bl.a. diagnostik, gruppering, typning/subtypning och
resistensbestämning av Neisseria meningitidis (MC) och för Neisseria gonorrhoeae (GC)
gruppering, serovarbestämning och resistensbestämning.
I den epidemiologiska övervakningen avseende meningokocksjukdom är det av stor betydelse
att ta reda på grupp, typ/subtyp av MC. Utveckling av eventuell resistens är också
betydelsefull att kunna följa. I det enskilda fallet är kunskap om grupptillhörighet och
resistens också viktigt i resonemang om eventuell omgivningsprofylax och/eller vaccination.
Vid invasiv infektion med ovanliga serogrupper (t.ex. X, Y, W-135 och 29E) bör
undersökning avseende eventuell komplement/immunglobulin-brist initieras.
Vidare analyser med molekylärbiologiska metoder som t.ex. restriktionsenzym-mönster (vid
utredning av anhopning av fall) kan utföras efter kontakt med laboratoriet.
Analys/metod
Species bekräftas med spjälkningstest av sockerarter med respektive utan tillväxt. Växtsätt,
kolonimorfologi och oxidaspositivitet ingår i bedömningen liksom mikroskopi efter Gramfärgning.
MC - Serogrupp bestäms med co-agglutinationsteknik (in-house antisera). Serotypning sker
med s.k. helcells ELISA-teknik (internationella monoklonala antikroppar). Genosubtypning
sker genom sekvensering av tre variabla regioner (VR1, VR2 och VR3) hos genen för porAproteinet. Proteinet påvisas också med en generell monoklonal antikropp. Antibiogram med
MIC-bestämning (Etest) mot vanligen använda antibiotika för behandling av invasiv sjukdom
och bärarskap utförs rutinmässigt liksom test för ß-laktamasproduktion.
GC - karaktäriseras med serogrupp/serovarbestämning genom reaktivitetsprofil mot en panel
av monoklonala antikroppar (Phadebact).
Provmaterial
Renodlad stam skickas lättast i normalt transportmedium.
Remiss
Remissen bör innehålla patientidentifikaton, lokal varifrån stam isolerats, datum för denna
odling och insändande laboratoriets referensnummer.
Finns speciella frågeställningar på analyser utöver vad som görs rutinmässigt så skrivs det
givetvis. Eventuell epidemiologi kan vara vägledande för detta. Antibiotikafrågor kan också
vara angelägna.
Svarsrutiner
MC - Ett första svar med serogrupp och antibiogram kan oftast ges två arbetsdagar efter att
insänt isolat ankommit till laboratoriet. Övrig karaktärisering är oftast klar inom en månad.
Vid behov av snabbare karaktärisering, kontakta laboratoriet.
1 (1)
GC - Svar på antibiogram och serovar är normalt klart inom två arbetsdagar från att insänt
isolat anlänt till laboratoriet. Ange på remissen om ni önskar direktsvar på telefon och i så fall
telefonnummer och namn.
Samtliga insända isolat bevaras på laboratoriet (fryst –70).
Pris
Kostnader för undersökning av invasiva MC stammar (blod-, likvorisolat) betalas av
smittskyddsinstitutet (riksintresse) medan övriga isolat faktureras insändaren. Se prislistan.
Kontaktperson
Professor/Överläkare
Per Olcén
Tfn 019-602 15 20
Laboratoriemedicinska länskliniken
Mikrobiologi
Universitetssjukhuset Örebro
701 85 ÖREBRO
Referenser
Olcén P. Infections with Neisseria meningitidis. Laboratory aspects, epidemiological and
clinical implications. Avhandling, Göteborg 1978.
Kronvall G. A rapid slide agglutination method for typing pneumococci by means of specific
antibody absorbed to protein A-containing staphylococci. Journal of Medical Microbiology 6,
187-90, 1973.
Sandström E, Danielsson D. Serology of Neisseria gonorrhoeae by co-agglutination. Acta
Pathol Microbiol Scand Sect B 88:27-38, 1980.
Knapp JS, Tam MR, Nowinski RC, Holmes KK, Sandström EG. Serological classification of
Neisseria gonorrhoeae with use of monoclonal antibodies to gonococcal outer membrane
protein I J Infect Dis 150:44-8, 1984.
Bygdeman SM, Gillenius E-C, Sandström EG. Comparison of two different sets of
monoclonal antibodies for the serological classification of Neisseria gonorrhoeae. In: The
Pathogenic Neisseriae page 31-36, American Society for Microbiology, Washington, D.C.
1985.
Abdillahi H, Poolman JT. Whole-cell ELISA for typing Neisseria meningitidis with
monoclonal antibodies. FEMS Microbiol Lett 48:367-371, 1987.
Danielsson, D. The demonstration of N. gonorrhoeae with the aid of fluorescent antibodies. 1.
Immunological studies of antigonococcal sera and their fluorescein-labelled globulins, with
particular regard to specificity. Acta Dermatovener (Stockholm) 43 : 451-64, 1963.
Danielsson D, Kronvall,G: Slide agglutination method for the serological identification of
Neisseria gonorhoeae with anti-gonococcal antibodies adsorbed to protein A-containing
staphylococci. Appl Microbiol 27: 368-374, 1974.
Paula Mölling, Susanne Jacobsson, Sara Thulin and Per Olcén. How to detect PorA-protein
deficiency with a combined phenotypic and genotypic approach. EMGM September 7th – 10th
2005 Dublin, Ireland.
2 (2)
Knapp JS, Bygdeman S, Sandström E, Holmes KK. Nomenclature for the serological
classification of Neisseria gonorrhoeae. Schoolnik G K (Ed.): The pathogenic Neisseriae,
American Society for Microbiology, Washington, DC, U.S, pp 4-5, 1985.
Rudén A-K, Bäckman M, Bygdeman S, Jonsson A, Ringertz O, Sandström E. Analysis of
serovar distribution as a tool in epidemiological studies in gonorrhoeae. Acta Derm Venereol
(Stockh) 66: 325-33, 1986.
3 (3)