NEISSERIA-KLASSIFIKATION Bakgrund Kliniskt mikrobiologiska kliniken är referenslaboratorium i Sverige avseende patogena Neisseria och omfattar bl.a. diagnostik, gruppering, typning/subtypning och resistensbestämning av Neisseria meningitidis (MC) och för Neisseria gonorrhoeae (GC) gruppering, serovarbestämning och resistensbestämning. I den epidemiologiska övervakningen avseende meningokocksjukdom är det av stor betydelse att ta reda på grupp, typ/subtyp av MC. Utveckling av eventuell resistens är också betydelsefull att kunna följa. I det enskilda fallet är kunskap om grupptillhörighet och resistens också viktigt i resonemang om eventuell omgivningsprofylax och/eller vaccination. Vid invasiv infektion med ovanliga serogrupper (t.ex. X, Y, W-135 och 29E) bör undersökning avseende eventuell komplement/immunglobulin-brist initieras. Vidare analyser med molekylärbiologiska metoder som t.ex. restriktionsenzym-mönster (vid utredning av anhopning av fall) kan utföras efter kontakt med laboratoriet. Analys/metod Species bekräftas med spjälkningstest av sockerarter med respektive utan tillväxt. Växtsätt, kolonimorfologi och oxidaspositivitet ingår i bedömningen liksom mikroskopi efter Gramfärgning. MC - Serogrupp bestäms med co-agglutinationsteknik (in-house antisera). Serotypning sker med s.k. helcells ELISA-teknik (internationella monoklonala antikroppar). Genosubtypning sker genom sekvensering av tre variabla regioner (VR1, VR2 och VR3) hos genen för porAproteinet. Proteinet påvisas också med en generell monoklonal antikropp. Antibiogram med MIC-bestämning (Etest) mot vanligen använda antibiotika för behandling av invasiv sjukdom och bärarskap utförs rutinmässigt liksom test för ß-laktamasproduktion. GC - karaktäriseras med serogrupp/serovarbestämning genom reaktivitetsprofil mot en panel av monoklonala antikroppar (Phadebact). Provmaterial Renodlad stam skickas lättast i normalt transportmedium. Remiss Remissen bör innehålla patientidentifikaton, lokal varifrån stam isolerats, datum för denna odling och insändande laboratoriets referensnummer. Finns speciella frågeställningar på analyser utöver vad som görs rutinmässigt så skrivs det givetvis. Eventuell epidemiologi kan vara vägledande för detta. Antibiotikafrågor kan också vara angelägna. Svarsrutiner MC - Ett första svar med serogrupp och antibiogram kan oftast ges två arbetsdagar efter att insänt isolat ankommit till laboratoriet. Övrig karaktärisering är oftast klar inom en månad. Vid behov av snabbare karaktärisering, kontakta laboratoriet. 1 (1) GC - Svar på antibiogram och serovar är normalt klart inom två arbetsdagar från att insänt isolat anlänt till laboratoriet. Ange på remissen om ni önskar direktsvar på telefon och i så fall telefonnummer och namn. Samtliga insända isolat bevaras på laboratoriet (fryst –70). Pris Kostnader för undersökning av invasiva MC stammar (blod-, likvorisolat) betalas av smittskyddsinstitutet (riksintresse) medan övriga isolat faktureras insändaren. Se prislistan. Kontaktperson Professor/Överläkare Per Olcén Tfn 019-602 15 20 Laboratoriemedicinska länskliniken Mikrobiologi Universitetssjukhuset Örebro 701 85 ÖREBRO Referenser Olcén P. Infections with Neisseria meningitidis. Laboratory aspects, epidemiological and clinical implications. Avhandling, Göteborg 1978. Kronvall G. A rapid slide agglutination method for typing pneumococci by means of specific antibody absorbed to protein A-containing staphylococci. Journal of Medical Microbiology 6, 187-90, 1973. Sandström E, Danielsson D. Serology of Neisseria gonorrhoeae by co-agglutination. Acta Pathol Microbiol Scand Sect B 88:27-38, 1980. Knapp JS, Tam MR, Nowinski RC, Holmes KK, Sandström EG. Serological classification of Neisseria gonorrhoeae with use of monoclonal antibodies to gonococcal outer membrane protein I J Infect Dis 150:44-8, 1984. Bygdeman SM, Gillenius E-C, Sandström EG. Comparison of two different sets of monoclonal antibodies for the serological classification of Neisseria gonorrhoeae. In: The Pathogenic Neisseriae page 31-36, American Society for Microbiology, Washington, D.C. 1985. Abdillahi H, Poolman JT. Whole-cell ELISA for typing Neisseria meningitidis with monoclonal antibodies. FEMS Microbiol Lett 48:367-371, 1987. Danielsson, D. The demonstration of N. gonorrhoeae with the aid of fluorescent antibodies. 1. Immunological studies of antigonococcal sera and their fluorescein-labelled globulins, with particular regard to specificity. Acta Dermatovener (Stockholm) 43 : 451-64, 1963. Danielsson D, Kronvall,G: Slide agglutination method for the serological identification of Neisseria gonorhoeae with anti-gonococcal antibodies adsorbed to protein A-containing staphylococci. Appl Microbiol 27: 368-374, 1974. Paula Mölling, Susanne Jacobsson, Sara Thulin and Per Olcén. How to detect PorA-protein deficiency with a combined phenotypic and genotypic approach. EMGM September 7th – 10th 2005 Dublin, Ireland. 2 (2) Knapp JS, Bygdeman S, Sandström E, Holmes KK. Nomenclature for the serological classification of Neisseria gonorrhoeae. Schoolnik G K (Ed.): The pathogenic Neisseriae, American Society for Microbiology, Washington, DC, U.S, pp 4-5, 1985. Rudén A-K, Bäckman M, Bygdeman S, Jonsson A, Ringertz O, Sandström E. Analysis of serovar distribution as a tool in epidemiological studies in gonorrhoeae. Acta Derm Venereol (Stockh) 66: 325-33, 1986. 3 (3)