Vätgas, framtidens energibärare, från cyanobakterier Thomas Larsson Användning av fossila bränslen bidrar till växthuseffekten. Tillgången på dessa bränslen kommer dessutom att minska i framtiden. Därmed har behovet av en förnybar energikälla fri från växthusgaser vuxit allt starkare. En energikälla som verkar kunna uppfylla dessa krav är vätgas (H2). Använd i en bränslecell bildas el och vatten. En av utmaningarna ligger i att hitta ett sätt att framställa vätgas på som inte bara är förnybart, utan också ekonomiskt hållbart. Helst ska solenergi kunna utnyttjas för att producera vätgas. Cyanobakterier är mikroorganismer med fotosyntes: de kan alltså ta vara på solens energi och omvandla den till en form som är användbar för de egna cellerna. Vissa cyanobakterier kan använda energin och enzymet nitrogenas till att göra om kvävgas i luften (N2) till kväveföreningar som cellen har nytta av. I den här processen produceras en liten mängd vätgas som biprodukt, men gasen återvinns av cellen med hjälp av ett så kallat upptagshydrogenas, vilket alltså inte är önskvärt om man vill använda cyanobakterier för att producera vätgas. Både nitrogenaset och hydrogenaset är syrekänsliga, så för att cyanobakterierna ska kunna leva i aeroba miljöer (alltså där luft finns) har de utvecklat särskilda celler, så kallade heterocyster, som blir som små syrefria fabriker för N2-fixering och H2-produktion. Cyanobakterier kan också bilda ett annat hydrogenas, det så kallade bidirektionella, som både kan producera och ta upp H2. Mitt projekt syftade till att introducera ett bidirektionellt hydrogenas i en cyanobakterie, gärna i en heterocyst. Nostoc punctiforme är en heterocystbildande cyanobakterie som normalt inte har det bidirektionella hydrogenaset, och det finns en mutant av bakterien där upptagshydrogenaset inte kan bildas. Därför användes denna cyanobakterie, som då skulle kunna producera vätgas i aeroba miljöer. Då skulle man slippa konstruera ett dyrt anaerobt (syrefritt) system för bakterierna att leva i. Genom att använda kända genetiska metoder klonades generna för ett bidirektionellt hydrogenas från en nära släkting till N. punctiforme. Vektorn var gjord för att generna skulle kunna translateras till ett enzym (protein) när den hade introducerats i N. punctiforme. Sekvensering visade att en av generna var längre än den publicerade, det vill säga en av generna jag hade klonat var för kort. Jag fortsatte med att klona den längre genen och projektet har kommit så långt att man nu bör verifiera att rätt gener har introducerats i Nostoccellerna innan direkta mätningar utförs på om de skrivs av, transkriberas, och bildar ett aktivt enzym med H2-utveckling. Än så länge finns det inga publikationer på en lyckad introduktion av ett ”icke cyanobakteriellt” hydrogenas i någon cyanobakterie. Jag har i mitt examensarbete tagit de första stegen till att introducera det bidirektionella hydrogenaset från svavel-bakterien Thiocapsa roseopersicina i cyanobakterien Nostoc punctiforme. Examensarbete i biologi, 20 p, HT 2006 Institutionen för biologisk grundutbildning och Institutionen för fotokemi och molekylär vetenskap, Uppsala Universitet Handledare: Thorsten Heidorn & Peter Lindblad