TBE – på laboratoriet
Sirkka Vene
Equalis användarmöte 2013-03-12
TBE-infektion (viral tick borne encephalitis)
Misstänkt fall
Bekräftat fall
Epidemiologiskt samband
+ klinisk bild förenlig med diagnosen
+ pleocytos i likvor eller neurologiska symtom förenliga med
encefalit, även i frånvaro av pleocytos
+ påvisande av TBE-specifika IgM-antikroppar i serum
Ett laboratorieverifierat fall
Laboratoriekriterier för diagnos
Minst ett av följande fynd:
•påvisande av TBE-virus-nukleinsyra i likvor (eller post mortem i hjärnmaterial)
•isolering av TBE-virus i likvor (eller post mortem i hjärnmaterial)
•påvisande av TBE-virus nukleinsyra i serum
•isolering av TBE- virus i serum
•påvisande av TBEV-specifika IgM-antikroppar i likvor
•påvisande av TBEV-specifika IgM- och IgG-antikroppar i serum
•påvisande av serokonversion eller signifikant titerstegring av TBEV-specifika antikroppar i parade sera.
Hur svårt kan det vara att diagnosticera TBE?
Viktigt med rätt test till rätt frågeställning – svårt om
kliniska data saknas….
Är det vaccination eller sjukdom som utlöst
antikroppssvaret och hur utreder man det?
Vilket test ska man välja? Hur många prover? Vad
får det kosta? Vill vi automatisera?
Kvalitetssäkring
-Akut infektion – IgM och IgG i serum (+ liquor) (ELISA)
-Vaccinationsgenombrott - Intratekal antikropps-produktion (IgM
och IgG ELISA)
-Immunitetsprövning - Neutralisationstest (RFFIT)
OBS att virus nukleinsyra normalt inte kan påvisas i liquor vid
TBE annat än i sådana fall där patienten avlidit.
Rutindiagnostik (ELISA) utförs vid flera laboratorier i Sverige
SMI gör utredningar av komplicerade fall och är
referenslaboratorium
TBEV- IgG-tester skiljer sig vad gäller dynamisk range:
- Sämre dynamik ger svårbedömda resultat pga
misstänkt ospecifikt reaktivitet vid låga IgG-värden
- Test med bättre dynamiskt range har samvariation med
NT och något lägre korsreaktivitet med andra flavivirus
- Falskt positivt IgM? Upplevs understundom som
problem av en del laboratorier
-Ska man välja IgM- och IgG- test från olika tillverkare?
TBE trots vaccination – ett diagnostiskt problem?
Vad ser vi?
1) Tidigt IgG (ELISA)
2) Tidiga neutraliserande antikroppar
3) Långsam utveckling av IgM
Diagnostiskt vanskligt – ser ej ut som ”normalt”
antikroppssvar vid TBE (tidigt IgM, sena N-ak)
Kan lätt tolkas som ”gammal immunitet”
TBE-vaccination och IgM – hur fungerar det?
I litteraturen hänvisas ofta till äldre studier med
antikroppsanalys med HI eller ”antik” ELISA (Hofmann et
al 1983)
Sannolikt endast enstaka låga IgM-nivåer (1/200 efter 2
mån, 0/30 efter 1 mån i vacc-studier – ej publicerat/SV)
Liknande resultat i ny österrikisk studie (Stiasny et al
2012)
Slutsats: Enbart vaccination ger i allmänhet inte upphov
till diagnostiska nivåer av TBEV-IgM.
Antikroppar mot flavivirus efter infektion/vaccination
Prov
nr
1
2
3
4
Dag
0
10
50
75
ELISA
HI
TBE TBE DEN
Vacc 1
+ prov 454
Vacc 2
+ prov 490
Vacc 3
+prov >1000
prov
>1000
YF
NT
TBE
10
80
320
neg
10
80
320
neg
40
320 >1280 neg
80
320 >1280
40
Antikroppsutveckling hos norsk patient med TBE
Patienten fästingbiten i Norge mitten augusti 1998, insjukn 31.8
Rest i Kina mars 1998, flera resor före det. Prov inkom med frågeställning JE
980911
981103
990318
TBE IgM
Titer
Positiv
≥20.000
Positiv
2000
(Positiv)
200
TBE NT
10
20
40
- stigande
Dengue IF
10240
5120
640
- avtagande
Jap.enc. IF
5120
2560
e.t.
- avtagande
DENV och JEV IgM analyserat med IF med NEGATIVT resultat.
Patient: man född –24, TBE-vacc senast 2000,
insjuknad med oklar encefalit 070730
Serologi TBE:
Serum 070802
IgM neg
IgG pos
NT: 20
Liquor 070803
IgM neg
n.d.
n.d.
Serum 070810
IgM pos
IgG pos
NT: 80
Patienten avliden 070812. Obduktionsmaterial (liquor och
hjärna) analyserat med PCR.
PCR-analys av liquor och hjärnmaterial
liquor
liquor
hjärna
12345
12345
Sekvensering av E-gen (fragment) visar på W-TBEV
TBE 1956-2012
350
300
250
200
150
100
50
0
2012
Tack!
