EXTRAKTION AV DNA FRÅN EGNA KINDCELLER
Bakgrund
DNA finns i cellkärnan i alla celler hos växter och djur (i bakterier finns det löst i
cellplasman, eftersom de saknar cellkärna). Att ur en blandning isolera en speciell typ av
ämne kallas för att extrahera ämnet. All typ av vävnad innehåller DNA, men också andra
slags ämnen, såsom proteiner och fett.
I den här laborationen används saliv med munceller och ni ska extrahera DNA från samma
sort celler som ni tidigare tittat på i mikroskop. Principen för metoden är följande:
Koksalt fäller ut proteiner.
Diskmedel löser ut fett från cellernas membran, vilket innebär att cellerna öppnas.
Proteinas bryter peptidbindningar i fortfarande lösta proteiner.
Iskall etanol (eller T-sprit) fäller ut DNA.
Kylan förhindrar DNas att bryta ner DNA.
Utförande
Ni laborerar två och två. Varje labbpar ska extrahera DNA från sina egna kindceller, en per
par räcker.
Redovisning
Anteckna under laborationens gång! Ni ska skriva en labbrapport per par. Denna ska vara klar
till nästa tisdag, alltså den 17/9. Då kommer jag ha en genomgång av labbrapportskrivande
och därefter ska ni hjälpas åt att granska varandras rapporter. Kom ihåg! Mallen för hur en
labbrapport ska skrivas finns i filarkivet (eller på Bibliotekets hemsida). En välskriven rapport
innehåller förklaringar av olika moment, t ex varför man tillsätter diskmedel. Ett tips för att
hitta fakta till just denna labb är att besöka nedanstående hemsida:
http://school.chem.umu.se/Experiment/141
Laborationsinstruktioner
Materiel
En liten bägare, en större bägare fylld med vatten och lite is, ett 10 cm3 provrör, pipett,
diskmedel, koksalt (NaCl 10 %), proteas, iskall etanol, glasstav, pincett.
Utförande
1. Skölj munnen en minut med ca 5 cm3 vatten. Se till att få med så mycket celler som
möjligt genom att skrapa med tänderna mot kindens insida. Spotta ut vätskan i en liten
bägare.
2. Häll vätskan från bägaren i ett 10 cm3 provrör. Fyll nästan halva provröret.
3. Placera provröret i bägaren med kylt vatten och håll den där under hela laborationens
gång.
4. Tillsätt 15 droppar (1cm3) natriumklorid (10%).
5. Tillsätt 2 droppar diskmedel (YES).
6. Tillsätt 3 droppar proteas.
7. Låt stå några minuter.
8. Häll mycket försiktigt (luta provröret och häll längs kanten) iskall etanol över vätskan i
provröret. Tillsätt ungefär lika stor volym etanol som provrörets volym. DNA fälls ut i
gränsskiktet mellan vattenlösningen och etanolen som ett vitaktigt skikt. Håll provröret
mot en mörk bakgrund för att se utfällningen bättre.
9. Försök få upp det DNA som fällts ut m h a en pincett el glasstav och låt det torka på ett
filterpapper. (kan placeras i värmeskåp så att det torkar fortare)
10. Ta med ditt prov till B302, släck ner i rummet och belys ditt provrör med UV-lampa.
Vad händer?
ATT BYGGA EN GEN
Inledning
Aspartam är ett sötningsmedel som är 100-200 gånger sötare än vanligt socker och används i
sockerfria typer av saft, sylt, läskedrycker, glass, tuggummi m.m. Aspartam är en dipeptid,
vilket innebär att det är ett protein som är uppbyggt av två aminosyror.
För att genen ska bygga ihop proteinerna måste kvävebaserna på DNA-molekylen ha en viss
ordning. Tre kvävebaser kodar för en aminosyra. Många proteiner består av tusentals
aminosyror men i detta fall räcker det med två. Vilka tre kvävebaser som kodar för de 20
olika aminosyrorna som finns i proteinerna ser du nedan. Glöm inte att din gen också måste
ha en start- och en stoppkod.
De två aminosyrorna som bygger upp aspartam är asparaginsyra (Asp) och fenylalanin
(Phe).
Kom ihåg att det är mRNA som är koden i snurran!
