CSI - Katte
DNA-fingerprinting
• Välkänt från polisarbete.
• Metoden föddes 1985 i England.
• Från början krävdes stora mängder DNA,
men nu funkar även mycket små mängder.
DNA-sekvens
Användning
Metoden används främst då man har en
misstänkt. Många har blivit såväl fällda
som frikända tack vare den här tekniken.
Man tittar på DNA från t.ex. blod på golvet,
saliv på en cigarettfimp eller sperma på ett
lakan.
Vad är en genetiskt fingeravtryck?
Man tittar på några ställen på DNAmolekylen där människors DNA skiljer sig
mycket åt hypervariabla ställen.
I dessa finns inga gener. Istället upprepas
små snuttar av nonsens-DNA mängder av
gånger.
Vad är en genetiskt fingeravtryck?
Det som skiljer olika människor från
varandra är antalet upprepningar
av dessa snuttar.
Ett genetiskt fingeravtryck räknar
antalet upprepningar av snuttarna
på några platser.
Säkert???
• Om det finns en skillnad mellan någon av de
undersökta platserna så är slutsatsen enkel
icke skyldig.
• Om sannolikheten är ...
– Mindre än en på hundra: "Det kan inte uteslutas att
den misstänte lämnat spåret."
– Mindre än en på tiotusen: "Starka skäl talar för att den
misstänkte lämnat spåret."
– Mindre än en på miljonen: "Det kan hållas för visst att
den misstänkte lämnat spåret."
Sannolikhet...
Sannolikhetsmonologen från 1979
Så... –hur gör man då?
Man använder sig av PCR – Poly Chain
Reaction.
Skapar många kopior av en DNA-molekyl,
även om den finns i mycket få exemplar.
Man måste veta hur sekvensen börjar och
slutar.
Steg 1
Dessa primers blandas med det prov som ska anlyseras.Man häller också i lösa DNAbyggstenar och en värmetålig variant av det protein som kan kopiera DNA.
Steg 2
Temperaturen höjs, så att basparen släpper mellan de två strängarna i det DNA som ska
kopieras. DNAt blir enkelsträngat.
Steg 3
Därefter sänks temperaturen till den nivå där DNA-molekylernas baser åter börjar fästa vid
varandra. Då kommer de småbitar (primrar) man tillverkat att fastna i början och slutet av
de delar av de långa DNA-molekylerna som ska kopieras.
Steg 4
Temperaturen sänks ytterligare och kopieringsproteinerna börjar arbeta. De tar tag i ena
änden av de små bitarna och börjar förlänga dem.
Steg 5
Den del av DNA-molekylen som skulle mångfaldigas finns nu i två exemplar.
Steg 6
Processen upprepas och för vart varv fördubblas antalet exemplar av det DNA som skulle
kopieras.
Vem är skyldig?
Användningsområden:
•
•
•
•
•
•
Brottsutredning
Faderskap
GMO
Släktskap (systematiker bl.a.)
Diagnostisera mutationer i DNA.
Utreda historiska ”fakta”.
Rättsgenetik
Kort historia. Startade
1985, och då krävdes
stora mängder blod
eller sperma.
Metoden hette RFLP.
Vanliga fingeravtryck
användes sedan
1901.
I USA har man 13 CODIS (Combined
DNA Index System) och dessa
används över hela världen för
rutinanalys.
Markörerna är 4-500 bp långa (dvs.
korta).
Databaser
Man kan bygga upp stora databaser snabbt.
I Sverige finns bara personer dömda till mer
än 2 års fängelse i databasen inte så
många. Lagändring säger att ALLA som
döms ska lämna DNA-prov.
CSI - Sverige
I PKU-registret finns alla
födda 1975 och
senare.
Många väljer att gå ur
efter mordet på Anna
Lindh.
Användes för identifikation efter tsunamin.
CSI - Storbritannien
Tar även test på misstänkta vilket
gör att databasen växer snabbare
(44 000 till 3 miljoner på 8 år).
Antalet matcher har på samma tid
växt från 400 till 200 000 –
betydligt effektivare än Sveriges!
Varar DNA för evigt?
Nix! DNA bryts sakta
ner och topparna blir
lägre. De längre
markörerna fungerar
sämre efter lång tid.
”Lyckade exempel”
1. Saddam Hussein (jämförde med
sönerna)
2. World Trade Center
3. Tsunamin
4. Anna Lindh (hittade keps och kniv men
ingen match i databasen. Skicka kniven
till England för LCN-analys (low copy
number)).
5. The innocence projekt
För prover med lite DNA:
-används mitokondrieDNA (mtDNA) istället.
Har 1000 kopior per cell.
Lägre bevisvärde och
måste kombineras med
andra bevis.
Statistik
Vad är sannolikheten att matchande prover
kommer från olika personer?
1. Rutin-DNA-analys: 10-15 markörer 1/1*106
– 1/1*109.
2. LCN-analys: 10-15 markörer 1/100 –
1/1*109.
3. mtDNA-analys: en markör 1/100 – 1/4000.
Man tittar på ca 1/1*106 av DNA’et. Därför behövs
statistiken.
Metodutveckling 1
• Minskar mängden DNA som behövs per
test.
• Känsligare analyser. Kan använda mtDNA
och kärnDNA i kortare fragment.
• Snabbare metoder
• Mer informativ analys, dvs. andra regioner,
nya markörer, Y-kromosommarkörer.
Metodutveckling 2
Testar på gamla kungar
osv. innan det
används ”skarpt”.
Biskopsvalet 1952
Dick Helander åtalas för att ha skrivit
smädelsebrev om sina konkurrenter till
ämbetet. Fälls i tingsrätt och hovrätt och
avsätts.
Domen baserades på indicier som språkliga
jämförelser och inte fakta omtalad
Upprättelse 1961 i HD, men var då
pensionär.
