Gäller from Medicinsk service Revision Sida 08 1(3) 2016‐05‐31 Godkänd av: Anders Blomgren 166289 Metodbeskrivning P-Gentamicin på Cobas (NPU19779) Gäller för SKÅNE Klinisk kemi P-Gentamicin på Cobas (NPU19779) Bakgrund, indikation och tolkning Gentamicin (Garamycin, Gensomycin) är en aminoglykosid, som används som antibiotikum. Vid intravenös administration av aminoglykosider bestäms plasmakoncentrationen dels av proteinbindande egenskaper hos substansen och dels av underliggande sjukdom och plasmaproteinnivå hos patienten. Utsöndringshastigheten av en aminoglykosid påverkas av specifika egenskaper hos substansen och patientens njurfunktion. För varje aminoglykosid finns ett terapeutiskt intervall, där den lägre gränsen är korrelerad till minsta hämmande koncentration (MIC) för de mikroorganismer, som substansen används mot. Den övre gränsen är i praktiken viktig endast för potentiellt toxiska antibiotika och anger plasmakoncentrationer, som kan ge toxiska biverkningar. Aminoglykosider kan ge bestående njurskador och skador på balans- och/eller hörselorganen. Aminoglykosider används främst vid infektioner orsakade av gramnegativa bakterier. Vanligen tas blodprovet 8 tim efter given dos eller omedelbart före nästa dos (dalvärde) [1]. Erfarenheten har visat, att det är viktigt att plasmakoncentrationerna av aminoglykosider når under en viss nivå vid dessa provtagningstillfällen för att minska risken för biverkningar. Toppvärdet uppnås vanligen c:a en timme efter injektion. För rådgivning i samband med antibiotikabehandlingen och tolkning av koncentrations-bestämningen hänvisas till Infektionskliniken. Analysprincip Gentamicin bestäms med CEDIA (Cloned Enzyme Donor Immuno Assay) teknik. CEDIA är ett homogent immunotest, som bygger på konkurrens om inbindingsställena på antikropparna mellan gentamicin i provet och gentamicin bundet till ett inaktivt fragment av -galaktosidas som tillsätts i testet. När det enzymfragmentmärkta gentamicinet är bundet till antikroppen blockeras reassociationen av de inaktiva -galaktosidasfragmenten och därmed bildas inget aktivt enzym, som kan förbruka testets substrat. Omvänt när det enzymfragmentmärkta gentamicinet icke är bundet till antikroppen kan de inaktiva -galaktosidasfragmenten reassocieras och därmed bildas aktivt enzym, som kan förbruka testets substrat. Förbrukningen av substrat ger upphov till en färgförändring som mäts bikromatiskt vid 570 och 660 nm. Detta innebär att absorbansförändringen är direkt proportionell mot gentamicinkoncentrationen i provet 2. Instrumentet beräknar automatiskt gentamicin-koncentration ur absorbansförändringen 3. Utarbetad av Ann-Sofi Skäremo Dokumentförvaltare Ann-Sofi Skäremo 128728 Dokument id C-4642 Original lagras elektroniskt! Användaren ansvarar för att gällande revision används. Gäller from Medicinsk service Revision Sida 08 2(3) 2016‐05‐31 Godkänd av: Anders Blomgren 166289 Metodbeskrivning P-Gentamicin på Cobas (NPU19779) Gäller för SKÅNE Klinisk kemi Referensintervall Vid dosering en gång per dygn rekommenderas provtagning 8 tim efter given dos och koncentrationen i plasma/serum bör då inte överstiga 4,0 mg/L för att minska risken för biverkningar. Vid dosering två gånger per dygn rekommenderas provtagning omedelbart före ny dos (dalvärde) och koncentrationen i plasma/serum bör då inte överstiga 2,0 mg/L för att minska risken för biverkningar [4]. Metodkarakteristika Interferenser och felkällor Hemolys (Hb < 10 g/L, H-index < 1000), lipemi (L-index < 1000) eller bilirubinemi (bilirubin < 855 µmol/L, I-index < 50) påverkar ej analysen 2. Korsreaktivitet med kemiskt besläktade ämnen, se tabell i referens [2]. Mätområde Mätområde: 0,4 - 12 mg/L [2]. Detektionsgräns Detektionsgräns: 0,3 mg/L [2]. Mätosäkerhet Utvärdering från inkörning av metoden december 2009. Nivå (mg/L) 1,3 3,9 Imprecision (CV%) n 3,1 2,0 15 15 Spårbarhet Primärt referensmaterial saknas. Kalibratorkoncentration: Spårbarhetsintyg från Microgenics. Övrig information Metoden är ackrediterad. Referenser 1. Nilsson-Ehle P, red. Laurells Klinisk kemi i praktisk medicin. Lund: Studentlitteratur 2003, 8:e upplagan sid 659-660. 2. Produktblad Gentamicin, Microgenics, aktuell lot. 3. Operator´s Manual: cobas 6000. Utarbetad av Ann-Sofi Skäremo Dokumentförvaltare Ann-Sofi Skäremo 128728 Dokument id C-4642 Original lagras elektroniskt! Användaren ansvarar för att gällande revision används. Gäller from Medicinsk service Revision Sida 08 3(3) 2016‐05‐31 Godkänd av: Anders Blomgren 166289 Metodbeskrivning P-Gentamicin på Cobas (NPU19779) Gäller för Klinisk kemi SKÅNE 4. Hanberger H, Edlund C, Furebring M, Giske CG, Melhus A, Nilsson LE, Petersson J, Sjölin J, Ternhag A, Werner M, Eliasson E. Swedish Reference Group for Antibiotics (SRGA). Rational use of aminoglycosides-Review and recommendations by the Swedish Reference Group for Antibiotics (SRGA). Scand J Infect Dis 45 (3):161-75, 2013. 5. Gentamicin-applikation för cobas c501, Microgenics 6. Instrumenthandledning cobas 6000/8000. 7. Produktblad CEDIA Antibiotic TDM Multi-cal, Microgenics, aktuell lot. Utarbetad av Ann-Sofi Skäremo Dokumentförvaltare Ann-Sofi Skäremo 128728 Dokument id C-4642 Original lagras elektroniskt! Användaren ansvarar för att gällande revision används.