Immucor Transplant Diagnostics, Inc.
550 West Avenue, Stamford, CT 06902 USA
Tel: +1-203-328-9500 eller +1-888-329-0255 (i USA och Kanada), Fax: +1-203-328-9599
WWW.IMMUCOR.COM
Produktdokumentation och översättningar finns på: www.Immucor.com
PRODUKTINLAGA
®
LIFECODES klass I ID: Ett Luminex
-screeningtest för kvalitativ detektering av panelreaktiva IgG-antikroppar mot HLA klass I-molekyler.
®
LIFECODES klass II IDv2: Ett Luminex
-screeningtest för kvalitativ detektering av panelreaktiva IgG-antikroppar mot HLA klass II-molekyler.
För invitrodiagnostik.
INNEHÅLLSFÖRTECKNING
Symboler ................................................................
Användningsområde ..............................................
Översikt och förklaring ..........................................
Procedurens principer ...........................................
Reagenser...............................................................
A. Identifiering .....................................................
B. Varningstexter .................................................
C. Förvaringsanvisningar .....................................
D. Förbehandling .................................................
E. Instabilitetsindikationer ....................................
Instrumentkrav .......................................................
Provtagning och beredning ...................................
1
2
2
2
2
2
2
3
3
3
3
3
Procedur.................................................................
A. Tillhandahållet material ...................................
B. Material som behövs, men som
inte tillhandahålls.............................................
Bruksanvisning ......................................................
Resultat ..................................................................
Kvalitetskontroll.....................................................
Procedurens begränsningar .................................
Felsökning .............................................................
Specifika funktionsegenskaper.............................
Referenser ..............................................................
3
3
3
3
4
5
5
6
6
6
SYMBOLER
(Produktetiketter och dokumentbilagor)
Lot nummer
Katalognummer
Använd före
Temperaturomfång
(förvaring)
Ljuskänslig
Lämpligt för
N-tester
Se
handhavandebes
krivningen
Späd ut före
användning
DIL
Patientnamn
NAME
ID-nummer
ID#
Datum
DATE
Tekniker
TECH
Kula
BEAD
Etnicitet
ETHN
Donator
DONOR
Blödningsdatum
BDT
Bakgrundsjuster
ingsfaktor
BAF
Medianvärdet
av intensiteten i
fluorescens
MFI
Panelreaktiva
antikroppar
PRA
Tolkning
INTRP
Negativ
kontrollkula
CON
Positiv
kontrollkula
IgG
Antigen
AG
Prov
SAMPLE
Klass I
CLI
Klass II
CLII
Rad
ROW
Kolumn
COL
Förväntade
intervall
EXPECTED RANGES
Tillverkare
Antal kulor med
antigen
(Förvara mörkt)
(Immunoglobulin G)
Auktoriserad
representant i
Europeiska
Gemenskapen
Varning
Sida 1 av 6
LC807IVDSV.15 (07/16)
ANVÄNDNINGSOMRÅDE
LIFECODES klass I och klass II IDv2 är kulbaserad immunoanalys som används för att kvalitativt detektera panelreaktiva HLA
IgG-antikroppar (PRA).
ÖVERSIKT OCH FÖRKLARING
Humana leukocytantigener (HLA) är ett system av glykoproteiner som hjälper till att framställa peptider för immunförsvaret.1,2 Men HLAmolekylerna är ett i hög grad polymorfiskt system och som sådant kan det bli föremål för antikroppsreaktioner hos människor i samband
med graviditet, blodtransfusioner eller avstötning efter organtransplantation. Alloimmunisering leder i vanliga fall – hos cirka 33 % av
utsatta individer3 - till generering av HLA-antikroppar. Närvaro eller frånvaro av sådana HLA-specifika antikroppar är avgörande för om
4
transplanterade allografter ska överleva.
LIFECODES klass I ID-kulor är utformade för detektering av IgG-antikroppar mot HLA klass I-glykoproteiner. LIFECODES klass I ID består
av olika Luminex-kulor konjugerade med affinitetsrenade klass I HLA-glykoproteiner från olika individer.
LIFECODES klass II ID-kulor är utformade för detektering av IgG-antikroppar mot HLA klass II-glykoproteiner. LIFECODES klass II IDv2
består av olika Luminex-kulor konjugerade med affinitetsrenade klass II HLA-glykoproteiner från olika individer.
PROCEDURENS PRINCIPER
En alikvot av kulor tillåts att inkubera med en mindre mängd testserum. Därefter tvättas de sensibiliserade kulorna så att ev. obundna
antikroppar försvinner. Därefter tillförs en antihuman IgG-antikropp som konjugerats med fykoerytrin. Efter ytterligare en inkubation späds
testprovet och analyseras i Luminex-instrumentet. Kulornas respektive signalintensitet jämförs med signalintensiteten hos en negativ
kontrollkula, som ingick i kulberedningen för att fastställa om kulan är positiv eller negativ till den bundna alloantikroppen.
REAGENSER
A. Identifiering
628200: LM1 LIFECODES klass I ID består av fem (5) komponenter med kvantiteter som räcker till 24 test.
1. LM1B HLA I-kulor (120 µL): En blandning av kulor som konjugerats med klass I HLA-glykoproteiner från en annan individ plus fyra (4)
2.
3.
4.
5.
kontrollkulor. Förvaringsbufferten är en fosfatbaserad buffert bestående av NaCl, Tween-20, ProClin 300 och serum med äggviteämne från
nötkreatur. LJUSKÄNSLIGT. Håll rutinmässigt nere ljusexponeringen till högst tre timmar. Förvara mörkt, vid 2 till 8 °C.
LMCJ Konjugatkoncentrat (170 µL): Antihumant IgG från get som konjugerats till fykoerytrin i en fosfatbaserad förvaringsbuffert, med
NaCl, Tween-20, natriumazid och serum med äggviteämne från nötkreatur. DIL MÅSTE SPÄDAS 1:10 med tvättbuffert före användning.
LJUSKÄNSLIGT. Utsätt för ljus endast kortare tidsperioder. Förvara mörkt vid 2 till 8 °C.
LMWB Tvättbuffert (30 mL): En fosfatbaserad buffert med NaCl, Tween-20, natriumazid och serum med äggviteämne från nötkreatur.
Förvara vid 2 till 8 °C och låt anta rumstemperatur (20-24 °C) före användning.
LMPC Positivt kontrollserum (80 µL): Desnna serum- eller serablandning erhålls från individer som är alloimmuniserade mot HLAantigener (>85% PRA). Förvara vid 2 till 8°C.
LMPC Negativt kontrollserum (80 µL): Denna serum- eller serablandning erhålls från individer som inte har antikroppar mot HLAantigener (<10% PRA). Förvara vid 2 till 8°C.
628223: LM2Q LIFECODES klass II IDv2 består av fem (5) komponenter med kvantiteter som räcker till 24 test.
1. LM2B HLA II-kulor (120 µL): En blandning av kulor som konjugerats med klass II HLA-glykoproteiner från en annan individ, plus fyra (4)
2.
3.
4.
5.
kontrollkulor. Förvaringsbufferten är en fosfatbaserad buffert bestående av NaCl, Tween-20, natriumazid och serum med äggviteämne från
nötkreatur. LJUSKÄNSLIGT. Håll rutinmässigt nere ljusexponeringen till högst tre timmar. Förvara mörkt vid 2 till 8 °C.
LMCJ Konjugatkoncentrat (170 µL): Antihumant IgG från get som konjugerats till fykoerytrin i en fosfatbaserad förvaringsbuffert, med
NaCl, Tween-20, natriumazid och serum med äggviteämne från nötkreatur. DIL MÅSTE SPÄDAS 1:10 med tvättbuffert före användning.
LJUSKÄNSLIGT. Utsätt för ljus endast kortare tidsperioder. Förvara mörkt vid 2 till 8 °C.
LMWB Tvättbuffert (30 mL): En fosfatbaserad buffert med NaCl, Tween-20, natriumazid och serum med äggviteämne från nötkreatur.
Förvara vid 2 till 8 °C och låt anta rumstemperatur (20-24 °C) före användning.
LMPC Positivt kontrollserum (80 µL): Denna serum- eller serablandning erhålls från individer som är alloimmuniserade mot HLAantigener (>85% PRA). Förvara vid 2 till 8°C.
LMNC Negativt kontrollserum (80 µL): Denna serum- eller serablandning erhålls från individer som inte har några antikroppar mot HLAantigener (<10% PRA). Förvara vid 2 till 8°C..
B. Varningstexter
1.
2.
3.
4.
5.
6.
7.
För invitrodiagnostik.
Det humana råmaterial som användes vid framställning av det här paketet har testats negativt för antikroppar mot HIV, HCV
och HBsAg med FDA-godkända metoder. Det finns dock ingen testmetod som helt kan garantera frånvaron av smittbärande
agenser. Följ därför allmänna säkerhetsåtgärder när du arbetar med de här materialen.
Att byta ut komponenterna mot andra än de som medföljer kan leda till felaktiga resultat.
Reagenser innehåller i konserverande syfte 0,1 % natriumazid, som kan reagera med bly- och kopparrör och bilda explosiva
metallazider. Använd stora mängder vatten om materialet avyttras i diskho.
Bakteriell förorening av proverna eller förekomst av immuna föreningar eller andra immunoglobulinföreningar, kan leda till
ökade ospecifika bindningar och felaktiga resultat.
Den här produkten detekterar IgG-antikroppar som eventuellt inte är lymfocytotoxiska.
Produkten är inte avsedd att detektera antikroppar av immunoglobulinets klass IgA eller IgM.
Sida 2 av 6
LC807IVDSV.15 (07/16)
8.
9.
10.
11.
12.
13.
Resultat som har många positiva DQ-kulor som inte delar DQ-betatyper kan indikera närvaro av en alfaspecifik antikropp.
Undersök dessa data ytterligare.
DQ-specifika antikroppar som producerar positiva resultat för homozygota DQ-donatorkonjugerade kulor som inte har stöd av
positiva resultat från överensstämmande heterozygot DQ-donator, kan indikera en svagt reaktiv antikropp. Undersök dessa
data ytterligare.
Bestämning av % PRA är inte det enda underlaget till ett kliniskt beslut avseende en patients behandling. En slutlig
korstestning utförs rutinmässigt före transplantation.
Dessa produkter är avsedda att användas ihop med Luminex enligt tillverkarens rekommendationer.
Avyttra materialen efter användning i enlighet med lokala föreskrifter.
Se säkerhetsinformationen för ytterligare information.
C. Förvaringsanvisningar
1.
2.
Information om förvaring finns på produktetiketterna.
Kulor och konjugat är LJUSKÄNSLIGA. Håll rutinmässigt nere ljusexponeringen till högst tre timmar.
D. Rening eller förbehandling
1.
2.
Se ”Provtagning och beredning”.
Konjugatkoncentratet ska spädas 1:10 med tvättbuffert före användning.
E. Instabilitetsindikatorer
1.
2.
Använd inte komponenter eller kontroller som är grumliga eller efter utgångsdatum.
Avyttra alla oanvända utspädda positiva och negativa kontroller och konjugat efter användning.
INSTRUMENTKRAV
Luminex-instrument och XY-plattform (Lifecodes produktnummer 888300, 888302)
PROVTAGNING OCH BEREDNING
Blod samlas in utan antikoagulanter med aseptisk teknik, och ska testas färskt för att minimera risken för falska positiva eller negativa
reaktioner på grund av felaktig förvaring eller förorening av provet. Serum ska förvaras mellan 2 °C och 8 °C i högst 48 timmar. Om sera skall
förvaras längre än 48 timmar, bör det frysas vid eller under –20 °C eller-80 °C i upp till 2 år. Enskilda laboratorier bör upprätta och validera
metoder för förvaring av serum i mer än 2 år. Vid förvaring eller transport separeras serumet från röda celler. Undvik upprepad infrysning och
upptining av serumproverna.
Använd inte mikrobiologiskt förorenade, hemolyserade, lipemiska eller värmeinaktiverade sera eftersom sådana prover kan ge
inkonsekventa resultat.
Före analys ska alla prover virvlas och centrifugeras kortvarigt (30 sekunder vid 10 000xg) så att alla eventuellt befintliga partiklar separeras.
Följande reagenser har utvärderats i laboratorietester och påverkar inte LIFECODES LifeScreen Deluxe: Remicade (Centocor), Rituxin
(Genentech), Zenapax (Roche), Campath (Genzyme) och Gammaguard (Baxter). Däremot har det visats sig att Thymoglobulin (Genzyme)
kan ge flaska positiva resultat. Prover innehållande Thymoglobulin kan ge felaktiga resultat.
PROCEDUR
A. Tillhandahållet material (Mer information i avsnittet REAGENSER)
•
•
•
•
•
•
•
HLA-kulor
Konjugatkoncentrat
Tvättbuffert
Positivt kontrollserum
Negativt kontrollserum
Registreringsark
Blad för plattformat
B. Material, reagenser och utrustning som behövs men inte tillhandahålls (listat eller motsvarande)
•
•
•
•
•
•
•
•
Justerbara 5 µL – 50 µL pipetter med pipettspetsar
250 µL flerkanaliga pipetter med matchande spetsar och bufferttråg
1,5 mL mikrocentrifugrör för konjugatförtunning
Provrör för patient- och kontrollprover
Tidur
Märkpenna
Självhäftande plasthöljen
Luminex Sheath Fluid (1x eller 20x Lifecodes kategorinr. 628005
eller 628025)
•
•
•
•
•
Luminex kalibreringskulor (CAL 1, CAL 2, CON 1 och CON 2,
Lifecodes kat.nr. 628006, 628007, 628008, 628009)
Destillerat vatten
Plattblandare eller vortex med brickadapter
Millipore multiscreen filterplatto (Millipore kat. nr. MSBVN1210,
Lifecodes kat. nr. 888633)
Multiscreen förgreningsrör för vakuum (Millipore kat.nr. MAVM
0960R, Qiagen kat. nr. .19504, Lifecodes kat.nr 888315)
BRUKSANVISNING
SÄKERHETSÅTGÄRDER:
Sida 3 av 6
LC807IVDSV.15 (07/16)
•
Se NOGA till att tvättbufferten och den antihumana IgG-reagensen inte förorenas. Om reagenserna oavsiktlig förorenas med
humant serum neutraliseras antihumant IgG, vilket leder till ett misslyckat test.
Var noga med att kontrollera vakuumkraften. Ett starkt vakuumtryck kan få kulorna att fastna i membranet, vilket ger en
felaktig kulräkning.
Var försiktig vid pipettering av filterplattan, så att inga kulor fastnar på sidan av mikroplattans brunnar.
Kulorna ska pipetteras i den lösning som redan finns i brunnen, men se till att inte vidröra membranet med spetsen. Om
pipettspetsen vidrör membranet kan detta punkteras och analysen kommer då att misslyckas.
Under inkubationsfasen, se till att kulorna inte stänker upp och fastnar på brunnarnas sidor. Då analysen körs för första gången,
bestäm optimal hastighet för plattblandaren eller vortexmixern genom att köra ett par positiva och/eller negativa kontroller. För vissa
instrument har konstaterats att en effektiv hastighet är cirka 200 varv per minut.
Förekomsten av höga nivåer obundna antikroppar efter avslutad tvätt, på grund av antingen för mycket serum eller dålig tvättning,
kan minska analysens möjlighet att detektera IgG-bindning till sensibiliserade kulor, och resultaten kan därmed bli felaktiga.
Ett prov med positiva och negativa kontrollsera ska ingå vid varje test för att fastställa om ev. tekniskt fel eller reagensfel har
uppstått.
•
•
•
•
•
•
1.
Före användning ska komponenterna förvaras mörkt vid 2 till 8 °C, utom tvättbufferten som ska anta rumstemperatur (20-24 °C).
Använd under tiden Plate Format Sheet för att tilldela respektive sera och analyskontrollerna rätt position på plattan. De
kontrollsera som levereras i paketet är avsedda att illustrera ett bredreaktivt positivt alloserum och ett negativt serum.
2.
Täck över filterplattans oanvända brunnar med självhäftande plasthölje. Fukta de brunnar som ska användas med 100-300 µL
destillerat vatten. Avlägsna vattnet efter 2 till 5 minuter genom försiktig utsugning med hjälp av förgreningsröret för vakuum. (Följ
tillverkarens rekommendationer vid användning.)
3.
Preparera HLA-kulorna med en kort (30 sekunder) centrifugering av flaskan vid 600 – 800 x g, för att avlägsna ev. kulor eller
vätska från hatten eller flaskans väggar. Vortexa noggrant (~1 minut) för att återuppslamma kulorna.
4.
Tillsätt 40 µL vattenbuffert i varje testbrunn på filterplattan, och därefter 12,5 µL patientserum eller kontrollserum och blanda.
5.
Tillsätt 5 µL HLA-kulor i respektive anvisad brunn. Vortexa HLA-kulorna i flaskan varannan minut så att kulorna förblir
uppslammade under distribueringen.
VARNING: Det är viktigt att kulorna återuppslammas, så att ett tillräckligt antal kulor alikvoteras i brunnarna och räknetiderna hålls
nere. Om kulorna inte vortexas då och då kan de sätta sig i botten på röret. På så sätt fördelas olika mängder kulor i brunnarna, vilket
påverkar körtider och resultatanalyser negativt.
6.
Täck över plattan med självhäftande plasthölje och skydda mot ljus genom att täcka över med folie eller lägga i låda. Inkubera i
30 minuter i rumstemperatur (20 till 24 °C) och mörker på en roterande plattform (200 varv per minut). Återför oanvända delar av
kontrollsera och kulor till förvaring i mörker vid 2 till 8 °C för framtida bruk.
7.
Späd konjugatet med tvättbuffert och förvara i mörker (5 µL konjugat till 45 µL tvättbuffert per prov). Korrigera för ev.
pipetteringsförslut genom att göra en (1) extra volym utspätt konjugat. Täck med folie och/eller förvara mörkt vid rumstemperatur
tills det är dags för användning. Återför oanvända delar av konjugatkoncentratet till förvaring i mörker vid 2 till 8 °C för framtida
bruk.
8.
Efter 30 minuters inkubation, ta av den självhäftande plasten och tillsätt 100 µL tvättbuffert i respektive brunn. Blanda genom
att knacka på plattans sida och aspirera plattan försiktigt.
VARNING: Om vakuumkraften är för hög kan kulorna fastna på membranet och provet misslyckas. Använd det lägsta vakuumtryck
som krävs för att proverna ska aspirera.
9.
Tillsätt 250 µL tvättbuffert i respektive brunn, aspirera och upprepa ytterligare två gånger, d v s sammanlagt tre tvättningar.
VARNING: En dåligt genomförd tvättning kan minska konjugatets möjlighet att detektera IgG-bindning till sensibiliserade kulor och
orsaka felaktiga negativa resultat.
10. Tillsätt 50 µL utspätt konjugat i respektive brunn. Skydda mot ljus genom att täcka över plattan med folie eller placera i låda.
Placera på roterande plattform (200 varv per minut) eller vortexa försiktigt var 5-10 minut. Inkubera i 30 minuter vid
rumstemperatur (20-24 °C).
11. Använd en ren pipettspets, tillsätt 130 - 150 µL tvättbuffert i respektive brunn och blanda tills kulorna återuppslammas.
12. Samla in data med Luminex enligt tillverkarens rekommendationer. Fördröjningar på över 3 timmar kan öka risken för falska
positiva eller negativa reaktioner. Återför oanvända delar av tvättbufferten till förvaring i mörker vid 2 till 8 °C för framtida bruk.
RESULTAT
För att fastställa om en kula är positiv, dela först den individuella MFI-kulmedianen med MFI för respektive negativa kontrollkula (CON1,
CON2, CON3). Ta dessa kvoter och dra ifrån faktorn för bakgrundsjustering (BAF) så får du rätt kul-/CON-kombination. BAF är en i förväg
fastställd MFI-proportion för respektive kul-/CON-kombination som ska kompensera för bakgrundsbrus orsakat av kulvariation och återfinns
på det partispecifika registreringsarket som medföljde paketet.
Exempel:
Individuell kula-MFI
- (BAF) = Justerad proportion 1
Negativ kontrollkula 1 (CON1) MFI
Individuell kula-MFI
- (BAF) = Justerad proportion 2
Negativ kontrollkula 2 (CON2) MFI
Sida 4 av 6
LC807IVDSV.15 (07/16)
Individuell kula-MFI
- (BAF) = Justerad proportion 3
Negativ kontrollkula 3 (CON3) MFI
Klass I- & IIv2 ID-paketen använder även en fjärde negativ kontrollberäkning, ”CalcCON”, baserad på beteendet hos ickereagerande kulor
med antigener. CalcCON fastställs så här: CalcCON = antigenkula med rankat lägsta MFI + 20. Därför blir den fjärde beräkningen så här:
Individuell dropp-MFI - (BAF) = Justerad proportion 4
CalcCON
Ett positivt värde för två eller flera av de fyra beräkningarna indikerar en positiv kulreaktion.
Ett negativt värde för tre eller flera av de fyra beräkningarna indikerar en negativ kulreaktion.
PRA-procenten (panelreaktiva antikroppar) för ID-paketen beräknas så här:
Klass I ID
% PRA =
Antal positiva kulreaktioner
X 100
Antal kulor i analysen (kontrollkulor ej inräknade)
Klass II IDv2
%PRA = (Antal positiva reagerande DR-anrikade kulor) + (Antal negativa reagerande DR-anrikade kulor som också innehåller en DQ-antigen som är positiv) X100
Totalt antal DR-anrikade kulor
KVALITETSKONTROLL
Kvalitetskontroll av klass I ID-, klass II IDv2- paketen finns inbyggt i testsystemet i och med de positiva och negativa kontrollsera. Dessa
kontroller ska ingå i varje testkörning för att fastställa ev. tekniskt fel eller reagensfel. Vad gäller ID-paketen kommer positiva kontrollsera att
reagera med de flesta eller alla HLA-konjugerade kulor (>85 %), där den mest HLA-konjugerade kulan ger en minsta MFI på 10 000.
Negativa kontrollsera är negativt (<10 %).
Kuluppsättningen innehåller fyra kontrollkulor med vilka provens prestanda kontrolleras. Den positiva kontrollkulan är belagd med humant
IgG och ska ge MFI-värden > 10 000 med kontrollsera. Om du erhåller värden lägre än 10 000 MFI med kontrollsera, är analysen ev.
otillräckligt tvättad eller också är konjugatet ej intakt. Patientprover uppvisar ett brett reaktivitetsintervall med den positiva kontrollkulan, men
ska generera en signal > 3500 MFI. De negativa kontrollkulorna ska på samma sätt uppvisa låga MFI-värden. Se det partispecifika
registreringsbladet för förväntade intervall för de negativa kontrollkulorna. Data utanför intervallet ska undersökas noggrant. Vid frånvaro av
sera ger den positiva kontrollen en stark signal medan resterande kulor får i genomsnitt 50 MFI eller mindre. Om ett prov uppvisar så här
låga värden, kan provet ev. oavsiktligt ha hoppats över. Upprepa provtagningarna.
Analysen bör köras enligt rekommendationen i förpackningen, samt enligt övriga kvalitetskontrollmetoder i enlighet med gällande lokala,
delstatliga, federala och/eller andra kontrollorgan.
PROCEDURENS BEGRÄNSNINGAR
Felaktiga resultat kan uppstå p.g.a. bakteriell förorening av testmaterialet, otillräckliga inkuberingsperioder, otillräcklig tvättning eller
dekantering av kulorna, att konjugatet utsätts för ljus eller att vissa testreagenser eller steg utelämnas.
Förekomsten av immuna föreningar eller andra immunoglobulinföreningar i patientprovet kan leda till ökade ickespecifika bindningar och
felaktiga resultat för den här analysen.
De antikroppar som detekteras i ID-paketen är de som är reaktiva inom populationen av tillgängliga antigener, enligt registreringsarkets lista.
Viss låg aviditet, viss låg titer, IgA, IgM och antikroppar mot sällsynta alleler detekteras inte med LIFECODES ID-analyserna.
Klass II fenotypkulor som indikerar närvaro av DR- och/eller DQ-antigener anrikas för DR. Därför kan dessa kulor visa ökad känslighet för
DR-antikroppar. I motsats är specifika klass II DQ-kulor anrikade för DQ och visar ökad känslighet för DR-antikroppar. Experiment som
utförts har inte kunnat detektera närvaro av DR på DQ-anrikade kulor, vilket förbättrar specificiteten för DQ-antikroppar. Antigendensiteten
för DR och DQ på utformningarna med två kulor (DR-anrikad och DQ-anrikad) kan förklara kulreaktivitetsmönster vid analysering av serum.
Tillägget av klass II DQ-kulor till klass II IDv2-provet kan hjälpa till vid fastställning av närvaro av DQ-antikroppar i högt PRA-sera.
På grund av HLA-testets komplexa natur bör endast kvalificerad personal hantera datatolkningen. Vid fastställandet av specificitet för
antikroppar med hjälp av LIFECODES ID måste hänsyn tas till resultatet av alla kulor, inklusive de som ev. ligger i närheten av
brytpunktsvärdet. Kunskap om patientens historia såväl som förståelse för korsreaktiva grupper kan vara användbart då specificitet ska
tilldelas ett visst serum.
Sida 5 av 6
LC807IVDSV.15 (07/16)
FELSÖKNING
PROBLEM
MÖJLIG ORSAK
LÖSNING
Kullösningen är dåligt uppslammad
Låg kulräkning
Kontrolltröskel överskriden
Fel positiv kontrolltröskel
Instrumentfel – kalibrering saknas
Instrumentfel – provets flödesväg blockerad
Fotoblekning av kulor
Vakuumtrycket för högt/kulorna fastnar i membranet
Dålig tvätt
Låg kvalitet på provet
Fotoblekning av konjugat
Dålig tvätt
Vortexpulsera tills helt
återuppslammat.
Se instrumentets manual
Se instrumentets manual
Använd nytt paket
Minska vakuumkraften
Upprepa och kontrollera tvättningarna
Förnya provet
Använd nytt paket
Upprepa och kontrollera tvättningarna
SPECIFIKA FUNKTIONSEGENSKAPER
Om LIFECODES ID-paket används enligt beskrivningen ska resultaten påvisa närvaro eller frånvaro av HLA IgG-antikroppar. Med 10 %
PRA-brytpunkt uppvisade klass I ID-paketet 97,1 % ömsesidig positivitet (90,2-99,2 %), 86,4 % ömsesidig negativitet (75,5-93,0 %) och
92,2 % överensstämmelse (86,3-95,7 %) för 129 prover som utvärderats vid en jämförelse med resultat erhållna med flödescytometriska
metoder (95 % förtroendegränser). Klass II iDv2-satsen uppvisade en ömsesidig positivitet på 99,7 % (98,3 – 99,9 %), en ömsesidig
negativitet på 72,2 % (66,6 – 77,1 %) och en överensstämmelse på 87,2 % (84,3 - 89,6 %) för de 600 samplar som bedömts vid en
jämförelse med resultaten man uppnått med LIFECODES Class II D. Värdena för ömsesidig negativitet och överensstämmelse speglar den
förhöjda detektionen av DQ-reaktiva antikroppar med Klass II iDv2. Satsen Klass II Idv2 uppvisade en 100 % överensstämmelse i
rapporterbara resultat för sju samplar so testats av sex operatörer over tre testanläggningar och en 100 % överensstämmelse I rapporterbara
resultat för sju samplar som testats med tre olika partier av en enda operatör.
REFERENSER
1.
2.
Klein, J, Sato, A. The HLA System. New England Journal of
Medicine 2000; 343:702 och 343:782.
Parham, P. The Immune System. Garland Publishing, N.Y. och
London. 2000; 55.
3.
4.
a
Rodey, GE. HLA Beyond Tears (2 utgåvan). DeNovo, Inc. Durango,
Colorado USA. 2000; 163.
McKenna, RM; Takemoto, SK; Terasaki, PI. Anti-HLA Antibodies
after Solid Organ Transplantation. Transplantation 2000; 69:319.
TILLVERKARE OCH AUKTORISERAD REPRESENTANT
Tillverkare: För Immucor Transplant Diagnostics, Inc., 550 West Avenue, Stamford, Connecticut 06902 USA.
Telefon: +1-203-328-9500 eller +1-888-329-0255, Fax: +1-203-328-9599
Auktoriserad representant: Immucor Medizinische Diagnostik GmbH , Adam-Opel-Strasse 26A Rodermark 63322, Germany
Phone: (+49) 6074-84 20 -0, Fax: (+49) 6074-84 20-99
Europeisk teknisk service: +32/3 385 47 91
Utgiven: Rev 15, 2016-07-22
Sida 6 av 6
LC807IVDSV.15 (07/16)
