Ida Hermansen Tarmbakterier i sjukdomar Tarmslemhinnan är täckt av bakterier och de är viktiga för vår hälsa. De flesta är ”snälla” bakterier som hjälper till med matsmältningen och hindrar att andra farligare bakterier kan få fäste och orsaka sjukdomar. Hos vissa människor kan kroppens eget försvar vända sig mot dessa normala bakterier och uppfatta dem som farliga. Det uppstår då en inflammation i tarmen och man blir sjuk. Exempel på en sådan sjukdom som drabbar tjocktarmen är ulcerös colit som ger sår på tarmen vilket visar sig i blodiga diarréer och magont. Orsaken är fortfarande okänd trots att mycket forskning bedrivits på området. Hos vissa personer kan tillståndet bli så allvarligt att hela tjocktarmen måste opereras bort. Förr i tiden fick patienten en ”påse på magen” (stomi) där avföringen samlades upp. Idag utförs en operation där man gör en ”ny” tjocktarm, s.k. pouch, av en del av tunntarmen och den normala tarmfunktionen kan behållas. Ibland uppstår inflammation även i pouchen, ett tillstånd som kallas pouchit. Även orsaken till pouchit är okänd men genom bättre förståelse för bakteriefloran i pouchen kan vi förhoppningsvis ta reda på varför pouchit uppstår. I tarmen råder en syrefri miljö och endast bakterier som klarar sig utan syre kan leva där. En del bakterier överlever endast i helt syrefri miljö och dessa finns det gott om i en normal flora. Vissa bakterier däremot kan klara sig både med och utan syre och även dessa återfinns i tarmen men i betydligt mindre antal. En del av dessa arter kan orsaka sjukdomar om antalet ökar tillräckligt mycket. Jag har undersökt vilka bakterier som återfinns i pouchfloran hos patienter som haft inflammation och andra som inte haft det. Det verkar som om bakteriefloran i en pouch skiljer sig något från normal tarmflora. I pouchfloran hittades betydligt flera bakterier som kan leva både med och utan syre och färre bakterier som endast klarar sig i syrefri miljö jämfört med normal tarmflora. Detta fanns både hos friska poucher och sådana som varit inflammerade men risken är att andelen potentiella sjukdomsframkallande bakterier är större i pouchfloran jämfört med en vanlig frisk tarm. Det gick däremot inte att se att de som haft pouchit hade något gemensamt som skulle kunna vara en bidragande faktor till inflammationstillståndet. Frågan om hönan eller ägget kom först kvarstår. Uppstår inflammationen p.g.a. en sjukdomsalstrande bakterie eller är det något annat som gör att bakterien kan få fäste och ge upphov till inflammation? Detta återstår att bli besvarat. Handledare: Sten Ståhl och Siv Ahrné Examensarbete 20 p i Mikrobiologi, Vt 2005 Institutionen för Cell- och Organismbiologi, Lunds Universitet. Institutionen för Livsmedelsteknologi, Lunds Tekniska Högskola. Abstract The composition of the pouch bacterial flora and the cause of pouchitis are poorly understood. The intestinal microbiota is complex and a majority of the bacterial species cannot be cultivated with classical methods. Molecular approaches using DNA-based methods, such as temporal temperature gradient gel electrophoresis (TTGE), contribute a more true reflection of the bacterial composition. Using the TTGE method an attempt to investigate the flora in pouches, with and without pouchitis incidences, was made. Different methods to amplify DNA for TTGE analysis were tested and the result showed that the ENV-PCR- and MDA approach provided similar results but direct TTGE-PCR on the DNA extract did not yield adequate amounts of DNA. Differences in TTGE runs influenced the analysis and it is difficult to draw conclusions from the results obtained. It was not possible to find a common denominator for the pouchitis cases and the bacterial species found in the samples indicated a somewhat different flora. Significantly more γ– Proteobacteria were found compared to a normal colon flora and only a few Firmicutes and no Bacteroidetes.