Gäller from Medicinsk service Revision Sida 15 1(3) 2017‐06‐16 Godkänd av: Karin Strandberg 118107 Metodbeskrivning P-Lupus Antikoagulans, Malmö Gäller för MA Klinisk kemi P-Lupus Antikoagulans, Malmö (NPU-kod 1679) Bakgrund, indikation och tolkning Antifosfolipid syndromet (APS) karakteriseras av närvaro av antifosfolipid antikroppar (APA) och trombossjukdom, trombocytopeni och/eller graviditetskomplikationer (1,2). Antikropparna är en heterogen samling immunoglobuliner som riktar sig mot fosfolipid och/eller komplex av fosfolipid och plasmaproteiner. Vanliga proteinantigen är ß2-glykoprotein I och protrombin men även andra koagulationsproteiner kan fungera som antigen. På laboratoriet delar man in antikropparna i olika typer beroende på deras egenskaper i olika laboratorietester. Dessa typer innefattar lupus antikoagulans, antikardiolipin antikroppar och antikroppar riktade mot andra negativt laddade eller neutrala fosfolipider. Man brukar skilja på primär APS och sekundär APS, där antikropparna kan ses sekundärt till olika autoimmuna sjukdomar, t.ex. SLE. Även vanliga infektionssjukdomar samt vissa läkemedel kan ge upphov till APA. Definitionsmässigt är lupus antikoagulans antikroppar som förlänger koagulationstiden i fosfolipidberoende tester. Bestämning av lupus antikoagulans innefattar en rad olika tester men p.g.a. antikropparnas heterogenicitet är det i princip omöjligt att påvisa alla typer av lupus antikoagulans. Enligt internationella rekommendationer bör följande tester ingå vid lupus diagnostik (3): Två eller flera screeningstester som bygger på olika principer (t ex APTT och dRVVT). Fosfolipidberoendet konfirmeras med ett test med överskott av fosfolipid. Antikroppsaktivitet kontrolleras ev. också genom mixning med poolad normal plasma. Denna analys består därför av ett integrerat testsystem enligt dRVVT och innefattar ett screeningtest (LA1) och ett konfirmationstest (LA2) med överskott av fosfolipider som neutraliserar antikropparna (4). NOAK (direktverkande antikoagulantia) interfererar mer eller mindre med de flesta analyserna och lupus diagnostik kan bli falskt positiv under pågående behandling. Sammanställning över analyser och läkemedelsnamn Analys Verksam substans Läkemedelsnamn Ofraktionerat Heparin UF Heparin Heparin LEO P-Heparin/LMH antiXa Lågmolekylärt Heparin LMH Klexane® Enoxaparin Fragmin® Dalteparin Innohep® Tinzaparin P- Apixaban Apixaban Eliquis® P-Rivaroxaban Rivaroxaban Xarelto® P-Dabigatran Dabigatran Pradaxa® Utarbetad av Dokumentförvaltare Beata Felisiak Övrigt Anti-Xa-aktivitet, mätning av de läkemedel som påskyndar antitrombins hämning av faktor Xa. Faktor Xa-hämmande NOAK läkemedel. Trombin-hämmande NOAK läkemedel. Dokument id C-2523 Original lagras elektroniskt! Användaren ansvarar för att gällande revision används. Gäller from Medicinsk service Revision Sida 15 2(3) 2017‐06‐16 Godkänd av: Karin Strandberg 118107 Metodbeskrivning P-Lupus Antikoagulans, Malmö Gäller för MA Klinisk kemi Analysprincip Lupusantikoagulans är antikroppar som förlänger vissa fosfolipid-beroende koagulationstester in vitro. I screeningtestet LA-1 används ett reagens innehållande Russell viper venom (ormgift från Russells orm), begränsad mängd fosfolipid och kalcium som initierar plasmakoagulationen genom att aktivera såväl faktor X som faktor V. Lupusantikoagulans i provet förlänger koagulationstiden genom att blockera de fosfolipider som behövs för koagulationsprocessen. För prover med långa LA1-tider konfirmeras koagulationstidsförlängningen med analysen LA2 (ormgiftreagens med överskott av fosfolipider) och i en del fall och med "mixning" med normalplasma (1 del prov + 1 del normalplasma). En kvot mellan LA1 och LA2 >1,5 klassas som lupus positiva. Se gällande schema för utredning av lupus antikoagulans under "Analysgång" (5). Om patienten står på antikoagulerande behandling är det möjligt att istället späda provet i normalmix-plasma och analysera LA1mix, LA2 mix och mixkvot (LA1mix/LA2mix). Referensintervall P-dRVVT sållning (LA1) < 42 sek P-dRVVTmix1:1 (LA1) < 42 sek P-dRVVTverif (LA2) < 42 sek P-dRVVTkvot (LA1/LA2) < 1,5 P-dRVVTmixkvot (LA1mix/LA2mix) < 1,5 Källa: Referensvärdena för vuxna uppmätta vid sektionen för koagulationsanalyser, Klinisk kemi, Universitetssjukhuset MAS under tiden 2000-11-02 – 2000-11-08 (n=70). Metodkarakteristika Interferenser och felkällor Prov med hemolys > 0,5 g/L analyseras inte. Trombinhämmare (Hirudin) och kumarinderivat i provet ger falskt för långa koagulationstider, liksom NOAK-läkemedel, både trombin- och faktor Xa-hämmare. Reagenset innehåller en heparinneutralisator vilket gör att heparin < 0,8 IE/mL inte interfererar i analysen. Mätområde 20-150 sekunder Mätosäkerhet LA1 = CV är 3,8 % vid nivå 39 sekunder LA1 = CV är 6,5 % vid nivå 75 sekunder LA2 = CV är 1,7 % vid nivå 33 sekunder Utarbetad av Dokumentförvaltare Beata Felisiak Dokument id C-2523 Original lagras elektroniskt! Användaren ansvarar för att gällande revision används. Gäller from Medicinsk service Revision Sida 15 3(3) 2017‐06‐16 Godkänd av: Karin Strandberg 118107 Metodbeskrivning P-Lupus Antikoagulans, Malmö Gäller för MA Klinisk kemi Spårbarhet Spårbarhet saknas Övrig information Metoden är inte ackrediterad. Referenser 1. 2. 3. 4. 5. Brandt, J. T., Triplett, D.A., Alving, B. and Scharrer, I. Criteria för the diagnosis of lupus anticoagulants: An update. 1995, Thromb. Haemost. 74, 1185-1190. Thiagarajan, P., Pengo, V. and Shapiro, S. S. The use of the dilute Russel viper venom time för the diagnosis of lupus anticoagulants. 1986, Blood. 68, 869-874. Miyakis S, Lockshin MD, Atsumi T, Bransch DW, Brey RL, Cervera R, Derksen RHWM, De Groot PG, Koike T, Meroni PL, Reber G, Shoenfeld Y, Tincani A, Vlachoyiannopoulos PG and Krilis SA. International consensus statement on an update of the classification criteria for definite antiphospholipid syndrome (APS). J Thromb Haemost 2006; 4: 295-306. Bertolaccini ML et al. 14th International Congress on Antiphospholipid Antibodies Task Force. Report on antiphospholipid syndrome laboratory diagnostics and trends 2014; 13: 917-30. Bipacksedel till LA1 och LA2 (Siemens Healthcare AB). Utarbetad av Dokumentförvaltare Beata Felisiak Dokument id C-2523 Original lagras elektroniskt! Användaren ansvarar för att gällande revision används.