fP-Glukagon, Malmö

Gäller from
Medicinsk service
Revision
Sida
10
1(3)
2014-10-09
Godkänd av: Charlotte Becker 112292
Metodbeskrivning
fP-Glukagon, Malmö
Gäller för
MA
Klinisk kemi
fP-Glukagon, Malmö
Bakgrund, indikation och tolkning
Glukagon är ett hormon som produceras i bukspottskörtelns -celler. Detta tillsammans med
insulin är de viktigaste hormonerna för glukosregleringen i kroppen. Vid låg blodsockernivå
frisätts glukagon som stimulerar levern till att frigöra glukos genom nedbrytning av glykogen
samt nysyntes av glukos från aminosyror. Förhöjda glukagonnivåer föreligger vid diabetes
mellitus och vid glukagonproducerande tumörer (glukagonom). Denna tumörform, som är
ovanlig ger oftast hudförändringar och ibland nedsatt glukostolerans.
Bestämning av P-Glukagon görs vid misstanke på glukagonom.
Analysprincip
En kompetetiv radioimmunoassay (RIA) där glukagon (antigen-Ag1) i provet tävlar
med 125I-märkt-glukagon (antigen-Ag2) om bindningen till en begränsad mängd av kanin
anti-glukagon-antikroppar konjugerade med albumin (PAb1).
En utfällningsteknik användes (dubbellantikropp-fastfas) där anti-kanin-IgG-antikroppar
kopplade till cellulosapartiklar (Ab2) används för att separera av bundet från fritt
Ag2-antigen.
Radioaktiviteten avläses i utfällningen efter att det fria antigenet (Ag2) och allt annat material
avlägsnas efter centrifugeringen.
Den uppmätta radioaktiviteten är omvänd proportionell mot glukagonkoncentrationen
i provet. Mätprincipen illustreras i fig. 1.
Beskriv i förekommande fall upparbetningssteg samt principer för separation och detektion,
eventuellt med reaktionsformler. Ange hur instrumentet beräknar analysresultatet från primära
mätdata.
Utarbetad av
Gunilla Lindahl
Dokumentförvaltare
Gunilla Lindahl 111557
Dokument id
C-2379
Original lagras elektroniskt! Användaren ansvarar för att gällande revision används.
Gäller from
Medicinsk service
Revision
Sida
10
2(3)
2014-10-09
Godkänd av: Charlotte Becker 112292
Metodbeskrivning
fP-Glukagon, Malmö
Gäller för
MA
Klinisk kemi
Kompetetiv RIA assay
Inkubation 1
Inkuba
Inkubation 1
+
2-8 C
Prov innehållande
tion 1
glukagon
(antigen-Ag1)
Kanin antikroppar mot gris
glukagon konjugerade med
albumin ( PAb1)
Inkubation
18-24 tim
1
Kompetetiv reaktion och utfällning (dubbelantikropp – cellulosapartiklar)
ation 1
1
+
Inkubation 1
+
anti -kanin -IgG-antikroppar
125
I-märkt glukagon,
(antigen-Ag2)
kopplade till cellulosapartiklar (Ab2) Inkubation 18-24 tim
Inkubation 1
Inkubation 2
(
Separation av fritt och bundet Ag2
Centrifugering
2-8C
Inkubation
30-60 min
.
Mätning av radioaktivitet
Avläst radioaktivitet är omvänd proportionell mot glukagonkoncentrationen i provet.
Utarbetad av
GunillaFig.
Lindahl
1 Schema
Dokumentförvaltare
Gunilla
Lindahl 111557
över glukagon
mätprincip
Dokument id
C-2379
Original lagras elektroniskt! Användaren ansvarar för att gällande revision används.
Gäller from
Medicinsk service
Revision
Sida
10
3(3)
2014-10-09
Godkänd av: Charlotte Becker 112292
Metodbeskrivning
fP-Glukagon, Malmö
Gäller för
MA
Klinisk kemi
Referensintervall
<60 pmol/L
Metodkarakteristika
Interferenser och felkällor
Korsreaktivitet:
Glukagon, humant, pankreas 100,0 % Cholecystokinin-39
< 0,02 %
Tarm GLI
< 0,1 % VIP
< 0,02 %
Sekretin
< 0,02 % GIP
< 0,02 %
Höggradig lipemi stör analysen (kan ge falskt höga värden genom att fällningen "släpper").
Prover kan analyseras efter delipidering genom ultracentrifugering.
Måttlig hemolys och bilirubinemi stör inte analysen.
Källa: Produktblad EURIA-GLUCAGON, Euro-Diagnostica AB, 2011 juni 9, E-23-0002-10.
Mätområde
3-150 pmol/L
Detektionsgräns
3 pmol/L.
Mätosäkerhet
CV 15 % vid nivå 30 pmol/L, CV 10 % vid nivå 90 pmol/
Spårbarhet
Uppgift saknas.
Övrig information
Metoden är ej ackrediterad.
Referenser
Produktblad EURIA-GLUCAGON, Euro-Diagnostica AB, 2011 juni 9, E-23-0002-10.
Laurells klinisk kemi i praktisk medicin, 9:e upplagan, Studentlitteratur, 2012.
Utarbetad av
Gunilla Lindahl
Dokumentförvaltare
Gunilla Lindahl 111557
Dokument id
C-2379
Original lagras elektroniskt! Användaren ansvarar för att gällande revision används.