DNA-jakten Hur många sorters sill och strömming finns det i världen? “one of the most abundant fish species on earth” Wikipedia Det finns otroligt många sillar i världen! Sillen har en central roll i Atlantens ekosystem - Storkonsument av plankton - Viktiga föda för rovfiskar, fåglar, marina däggdjur Sillfisket är idag ett av världens fem största fisken Olaus Magnus Historia om de nordiska folken, 1555 Sverige skulle inte vara det land det är idag om vi inte hade haft tillgång till sill och strömming En effektiv förvaltningen av sillen och strömmingen kräver kunskap om artens populationsbiologi! Sillens taxonomi 1. Sill – Clupea harengus harengus Västerhavet, södra Östersjön Linnaeus, C. (1758). Systema Naturae per regna tria naturae, secundum classes, ordines, genera, species, cum characteribus, differentiis, synonymis, locis. Editio decima, reformata. Laurentius Salvius: Holmiae. ii, 824 pp 2. Strömming – Clupea harengus membras centrala Östersjön, Bottenhavet Linnaeus, C. (1761). Fauna Suecica sistens Animalia Sueciae Regni: Mammalia, Aves, Amphibia, Pisces, Insecta, Vermes. Distributa per Classes, Ordines, Genera, Species, cum Differentiis Specierum, Synonymis Auctorum, Nominibus Incolarum, Locis Natalium, Descriptionibus insectorum. Editio altera, auctior. Stockholmiae: L. Salvii, 48 + 578 pp. Studentprojekt genomfört 1979-1980 vid Stockholms universitet under handledning av Dr Nils Ryman Andersson et al. 1981 -1415 fiskar från 17 lokaler - Data från 13 gener påvisade med stärkelse gel elektrofores - Målsättning var att kartlägga populationsstrukturen Lite grundläggande populationsgenetik Lokus är en specifik plats på en kromosom Genetiska varianter i ett lokus kallas alleler Låt oss anta ett lokus X, med allelerna C och T Det innebär att det finns tre genotyper i detta lokus: CC (homozygot) TT (homozygot) CT (heterozygot) Vi beräknar allelefrekvensen på följande sätt: 25 CC, 50 CT, 25 TT PC=(2 X antalet CC + 1 X antalet CT heterozygoter) / (2 X total antalet individer) =0,50 PT=(2 X antalet TT + 1 X antalet CT heterozygoter) / (2 X total antalet individer) =0,50 Allelfrekvensen i en population beror på följande faktorer: - Genetisk drift - Selektion - Migration - Mutation Resultat från vår första sill studie Glucose Phosphate Isomerase (GPI) 100 90 Common Allele Frequency % 80 70 60 50 40 30 20 10 0 Atlantic Ocean North Sea Hamburgsund Sill Traslovslage Fehmarn Gamleby Vaxholm Kalix Strömming - Inga signifikanta mellan lokaler!! - Vi kan intestatistiskt utesluta att alla proverskillnader kommer från samma genetiska population Genetikens guldålder! Vi har nu kartlagt hela sillens arvsmassa, cirka 800 miljoner baspar Vi har sekvenserat hela arvsmassan från 20 olika stickprov - 50 - 100 fiskar i varje stickprov - 8 stickprov insamlade 1979-1980! - 12 stickprov insamlade 2011-2013 - Prover från Östersjön, Kattegatt, Skagerack, Nordsjön, Atlanten och Stilla Havet Vi har bestämt allelfrekvensen för mer än 6 miljoner DNA varianter i arvsmassan! Vi ser att bara ett par procent av de genetiska varianterna visar skillnad i allelfrekvens mellan populationer Fylogenetisk analys Atlantic / Baltic herring Pacific herring Fylogenetisk analys Starka bevis för genetisk anpassning till Östersjöns bräckta vatten SNP44402 P=9,4e-38 100 Allele Frequency % 90 80 70 60 50 40 30 20 10 0 Sill Strömming Beror sillens lekbeteende på fenotypisk plasticitet eller är den genetiskt bestämd?? Vår-, Sommar- and Höstlekande strömming från Gävle-bukten Höstlekande sill från södra Östersjön och Nordsjön Genom-baserad associationstest Kromosom 1: Nukleotid position 1,234 Vårlek Höstlek A 41 30 G 39 30 Summa 80 60 Genom-baserad associationstest Kromosom 23: Nukleotid position 23,100,231 Vårlek Höstlek A 78 30 C 2 30 Summa 80 60 Genom-vid associationstest Finns det genetisk skillnader mellan vårlekande och höstlekande fisk? Konklusiva bevis för att vår- och höst-lekande sill/strömming är genetiskt olika! Viktiga implikationer för den framtida förvaltningen av sill och strömming Exempel på skillnader i allelfrekvens i en genregion mellan fisk som leker på våren, sommaren eller hösten Atlantic Gävle_spring Hudiksvall_Spring Gävle_summer North_sea Fehmarn Gävle_autumn SYNE2B SYNE2B Cirka 50 olika sekvenspolymorfier HERPUD2 FOXN2 GTF2A TSHR NRXN3B ene 52 kb downst ream from t his signal. ESR2 gene 52 kb downst ream from t his signal. HERPUD2 Vad vill vi uppnå inom DNA-jakten • En bättre inventering av bestånd av sill och strömming, varje klass samlar in 50 fiskar från en fångstplats • Helst lekande fisk, gärna höst-lekande • Fisk utanför leken också av intresse, blandars sig olika bestånd utanför leken och var finns de olika bestånden?? • Bättre underlag för den framtida förvaltningen av en av Sveriges viktigaste naturresurser Pedagogiskt syfte: - DNA, grundläggande genetik och biologi - Svensk historia och sillens betydelse för vår livsmedelsförsörjning - Uthålligt nyttjande av naturresurser TACK! Alvaro Martinez-Barrio Ulla Gustafson Jessica Pettersson Sangeet Lamichhaney Nima Rafati Mats Pettersson Carl-Johan Rubin Nils Ryman, Stockholms Universitet Linda Laikre, Stockholms Universitet Arild Volkvord, Bergen University SciLifeLab, Uppsala Havsfiskelaboratoriet i Lysekil Kustfiskelaboratoriet I Öregrund