Sida 1 av 2
CD11b PE
Katalognummer: 9012-0118-120 (120 tester)
Fluorescensprofiler av normala perifera och ofärgade
blodmonocyter (blått histogram) eller färgade med
CD11b PE (lila histogram).
Produktinformation
Innehåll: CD11b PE
Förvaringsförhållanden: Förvaras i 2-8 °C.
Katalognummer: 9012-0118-120 (120 tester)
Får ej frysas.
Klon: ICRF44
Ljuskänsligt material.
Koncentration: 5 uL (0,5 mikrogram)
Försiktigt! Innehåller azid.
per prov (ett prov definieras som den mängd
Tillverkare: eBioscience, Inc., 10255 Science
som färgar 1 x 10e6-celler i 100 uL)
Center Drive, San Diego, CA 92121, USA
Värd/isotyp: Mus IgG1, kappa
Auktoriserad representant: Bender MedSystems
HLDA Workshop: IV
GmbH, ett eBioscience-företag, Campus Vienna
Sammansättning: Vattenbuffert, 0,09 %
Biocenter 2 A-1030, Wien, Österrike
natriumazid, kan innehålla
bärarprotein/stabilisator.
Avsedd användning
Den fluorokromkonjugerade monoklonala antikroppen
ICRF44 reagerar med mänsklig CD11-antigen. CD11 kan
detekteras i mänskliga biologiska prover med hjälp av
immunologiska tekniker.
Testprinciper
Flödescytometri är ett användbart verktyg för samtidig
mätning av flera fysiska egenskaper hos individuella
partiklar (till exempel celler). Cellerna passerar på ett led
genom en laserstråle. Då varje cell passerar genom
laserstrålen registrerar cytometern hur cellen eller
partikeln sprider infallande laserljus och avger fluorescens.
Med hjälp av det här flödescytometriska analysprotokollet
är det möjligt att utföra samtidig analys av ytmolekyler på
individuell cellnivå.
Beskrivning
Den monoklonala antikroppen ICRF44 reagerar med
mänskligt CD11b, en vidhäftningsmolekyl på 165 kDa .
CD11b associerad med beta2-integrin (CD18) uttrycks
på ytan av monocyter, granulocyter, aktiverade
lymfocyter och en undergrupp av NK-celler. CD11b är
en receptor för intercellulär vidhäftning för
molekylfamiljerna CD54, CD102 och CD50 samt iC3b.
Dessa vidhäftningsmolekyler är mycket viktiga i
mediering av interaktioner mellan celler och andra
celler samt celler och matriser.
Dokument # 30883_02_sv • Gäller från: 2011-03-15
Får ej distribueras vidare utan skriftlig tillåtelse. Copyright © 2000-2010 eBioscience, Inc.
www.eBioscience.com FRÅGOR OM BESTÄLLNINGAR • +43 1 796 40 40-120 TECH • +43 1 796 40 40-0
[email protected]
Sida 2 av 2
Provtagning och förvaringsanvisningar
Ta venösa blodprover genom venpunktion i ett sterilt
blodprovtagningsrör med hjälp av en lämplig
antikoagulant (EDTA rekommenderas). Förvara prover
i rumstemperatur (18-25 °C). Blanda proverna genom
att skaka försiktigt före användning.
Nödvändiga hjälpmedel som inte medföljer
• 12 x 75 mm provrör
• Buffertar (eBioscience Flow Cytometry Staining
Buffer, katalognummer 00-4222 rekommenderas)
• Lyseringsbuffert (eBioscience 1X RBC Lysis Buffer,
katalognummer 00-4333 eller eBioscience 1-step
Fix/Lyse Solution (10X), katalognummer 00-5333
rekommenderas)
• För intracellulär färgning, använd IC Fixation
Buffer and Permeabilization Buffer,
katalognummer 88-8823 (intracellulär cytokineller cytoplasmatisk proteinfärgning) eller Foxp3
Buffer Set, katalognummer 00-5523 (för färgning
av cellkärneproteiner). Se avsnittet ”Best
Protocols” (Bästa protokoll) på eBiosciences
webbplats för protokollen ”Staining Intracellular
Antigens for Flow Cytometry” (Färgning av
intracellulära antigener för flödescytometri).
• Viabilitetsfärgning (7-AAD Viability Staining
Solution, katalognummer 00-6993 eller Propidium
Iodide Staining Solution, katalognummer 00-6990
rekommenderas)
• Automatiserade pipetter
• Centrifug
• Vortexblandare
• Ishink eller kyl
• Flödescytometer
Testprotokoll
OBSERVERA: Vid intracellulär färgning, se
avsnittet ”Best Protocols” (Bästa protokoll) på
eBiosciences webbplats för protokollen ”Staining
Intracellular Antigens for Flow Cytometry” (Färgning
av intracellulära antigener för flödescytometri).
1. Alikvot 100 µL av provet i rör.
2. Lägg till 5 µL av lämplig antikropp i varje rör.
3. Inkubera 30-60 minuter i 2-8 °C. Proven kan även
inkuberas i 15-30 minuter i rumstemperatur och
mörker.
4. Tillsätt 2 mL av 1X RBC Lysis Buffer
(i rumstemperatur) per rör. Blanda försiktigt.
(Proven kan även inkuberas med 2 mL 1-step
Fix/Lyse Solution.)
5.
6.
7.
8.
Inkubera proverna i mörker och i rumstemperatur
i 10 minuter. Inkubera inte längre än 15 minuter
med RBC Lysis Buffer.
Centrifugera proverna vid 300-400 x g i 5 minuter
och rumstemperatur, dekantera/aspirera
supernatanten och tvätta en gång med 2 ml Flow
Cytometry Staining Buffer.
Centrifugera proverna vid 300-400 x g i 5 minuter
och rumstemperatur, dekantera/aspirera
supernatanten.
Resuspendera färgad cellpellet i 1 mL Flow
Cytometry Staining Buffer och analysera proven
med en flödescytometer.
Begränsningar
1. Fluorokromkonjugerade antikroppar i ampuller
bör förvaras i 2-8 °C i mörker för att fungera
optimalt. Får ej frysas.
2. Centrifugera antikroppsflaskan före öppning så
att största möjliga volym kan tas ut.
3. All färgning ska utföras på is eller i 2-8 °C, om
inget annat anges i protokollet, med minimal
exponering för ljus.
Prestandaegenskaper
Alla batcher med monoklonala antikroppar
kontrolleras så att de överensstämmer med
egenskaperna för en standardreagens och får därmed
en konsekvent hög kvalitet. Representativa
flödescytometriska data inkluderas när så är lämpligt.
Tecken på nedbrytning
Kontakta eBiosciences tekniska support om du har
frågor eller funderingar rörande egenskaperna eller
kvaliteten för de levererade produkterna (se nedan).
Referenser
Procedures for the Collection of Diagnostic Blood
Specimens by Venipuncture (H3-A6), 3:e upplagan
publicerad av National Committee for Clinical
Laboratory Standards.
Knapp W, Dorken B, et al, (Red.). Leucocyte Typing IV:
White Cell Differentiation Antigens. Oxford University
Press. New York. 1989.
Dokument # 30883_02_sv • Gäller från: 2011-03-15
Får ej distribueras vidare utan skriftlig tillåtelse. Copyright © 2000-2010 eBioscience, Inc.
www.eBioscience.com FRÅGOR OM BESTÄLLNINGAR • +43 1 796 40 40-120 TECH • +43 1 796 40 40-0
[email protected]
