Temadag muskelsjukdomar
Falkenberg 11 november 2013
Muskelpatologi
Anders Oldfors
Avd för patologi
Sahlgrenska Sjukhuset
Göteborg
[email protected]
Muskelbit monterad före frysning
Ytterligare en bit fixeras för elektronmikroskopi
Frysning i flytande kväve; -1950 C
Insidan av kryostat som används för snittning
Hematoxylin-Eosin
Gomori trichrome
Myosin ATPase
Färgningar
NADH-TR
PAS
Succinate
dehydrogenase
Hematoxylin-eosin
Gomori trichrome
ATPase pH 10,4 4,6 4,3
NADH-TR
SDH
COX
COX/SDH
Sudan black
PAS
MHC-I
Sudan black
Acid phosphatase
Myophosphorylase
Myoadenylatdeaminase
Congo
Cytochrome-c oxidase
MHC class I
Inflammatoriska cellinfiltrat vid myosit
Invasion av inflammatoriska celler i en muskelfiber vid myosit
Gomori trichrome färgning som visar nemalin myopati
Nemaline myopati
Ljus mikroskopi
Elektron mikroskopi
NADH-TR färgning som visar myfibrillär myopati
Periodic acid and Schiff reagent (PAS) färgning
vid glycogen-upplagrings myopati
Sudan black färgning vid fett-upplagrings myopati
Muskeldystrofi
4 år
14 år
Muskelfiber regeneration
Muscle fiber
Satellite cell
Macrophage
Immunfärgningar
Dystrophin (Dys 1, 2 and 3)
Alpha-, beta-, gamma-, delta- sarkoglycan
Emerin
Laminin alpha2
Utrophin
Caveolin3
NOS1
Alpha-dystroglycan
Inflammatoriska celler olika typer:
(CD3 CD4 CD8 CD20 CD39 CD68 C5b9)
Myosin isoforms
N-CAM
SMI-31
Ubiquitin
Alfa-B Crystallin
Desmin
CollagenVI
Snittning av muskelbit för preparation av proteinextrakt
Western blot
Dystrofin, Calpain3, Dysferlin, Lamin A/C
Calpain3, Dysferlin
MyHC
Normalt dysferlin
Calpain 3 brist
Gener som har identifierats vid olika muskelsjukdomar
Antal
gener
220
Neuromuskulära sjukdomar: genlokalisation
200
180
SMA!
160
140
120
100
80
60
40
20
År
1975
1985
1995
Duchenne/Becker muskeldystrofi
Kearns-Sayre syndrome
Dystrofia myotonica
Facio-scapulo-humeral muskeldystrofi
Spinal muskelatrofi
2005
2015
Snittning av muskelvävnad för preparation av DNA
Gen analyser
Mitokondriella sjukdomar
mtDNA
LX-PCR för detektion av mtDNA
deletions
22 tRNA genes
13 protein coding genes:
ND1-6, COX1-3, Cytb, ATPase
Quantification of mutant mtDNA
Nukleärt DNA
POLG1
POLG2
ANT1
C10orf2
TK2
TP
SCO2
NDUFV1
NDUFS1
NDUFS3
NDUFS7
NDUFS8
COX10
COX15
DGUOK
SURF1
Övriga myopatier
CAV3
DMD
CAPN3
FKRP
POMGnT1
LARGE
POMT1
POMT2
COL6A1 A2 A3
ACTA1
SEPN1
PABP2
ZASP
DES
TNNT1
TNNT3
TNNI2
TNNC1
TPM2
TPM3
MYH1
MYH2
MYH3
MYH7
MYH8
GYS1
GYG
GYG2
GBE1
PRKAG2
LMNA
DMPK
SMN1
• 25-årig man
• Långsamt progredierande muskelsvaghet
• Gång problem från 8 års ålder
• Svaghet mest i benen
H&E
NADH-TR
Diagnos: Centronuclär myopati
Homozygot mutation in BIN1
c.451G>A Asp151Asn
Slut
