Monoclonal Mouse
Anti-Human CD1a
Clone 010
Kod M3571
Avsedd användning
För in vitro-diagnostik.
Monoklonalt Anti-CD1a, klon 010 (Anti-CD1a, klon 010) från mus är avsett för laboratorieanvändning för att med ljusmikroskopi kvalitativt
identifiera CD1a-positiva celler i normala och neoplastiska vävnader med användning av immunhistokemiska (IHC) testmetoder. Positiva
resultat är till hjälp vid klassificeringen av tymom och maligniteter av T-cellprekursorer samt diagnos av Langerhans cellhistiocytos.1
Differentiell identifiering underlättas av resultaten från en panel av antikroppar. Tolkningen måste göras av en kvalificerad specialist under
beaktande av patientens kliniska tillstånd och andra diagnostiska tester.
Sammanfattning och förklaring
CD1a, en medlem av familjen CD1-antigen, är ett icke polymorft, MHC klass I-relaterat cellyteglykoprotein, som uttrycks i samband med
Beta-2-mikroglobulin. 1,2
Se Dakos Allmänna instruktioner för immunhistokemisk färgning eller detektionssystemets instruktioner om IHC-procedurer för:
(1) Procedurprincip, (2) Material som behövs men inte medföljer, (3) Förvaring, (4) Provberedning, (5) Färgningsprocedur,
(6) Kvalitetskontroll, (7) Felsökning, (8) Tolkning av färgningen, (9) Allmänna begränsningar.
Medföljande reagens
Anti-CD1a, klon 010, levereras i 1,0 ml storlek, som en vävnadskultur supernatant (innehållande fetalt bovint serum) dialyserat mot 0,05
mol/L Tris-HCl, pH 7,2, och 0,015 mol/L natriumazid.
Klon: 0101
Isotyp: IgG1, kappa
Mus-IgG, koncentration mg/l: Se etikett på flaskan.
M3571 kan användas vid en spädning på 1:50 vid utförande av IHC med LSAB2 detektionssystem, flytande DAB. Detta är endast riktlinjer.
Optimala antikroppskoncentrationer kan variera beroende på preparat och beredningsmetod och bör bestämmas av varje enskilt
laboratorium.
Immunogen
Humana tymusceller
Specificitet
Monoklonalt anti-humant CD1a, klon 010 (anti-CD1a, klon 010) klassificerades som CD1a vid Fourth International Workshop and
Conference on Human Leucocyte Differentiation Antigens (den fjärde internationella workshopen och konferensen om humana
leukocytdifferentieringsantigener).2 Klon 010 har påvisats immunprecipitera märkt CD1a från tymuscellysat och från Langerhans cellberikat
epidermalt cellysat.2 I den senare, precipiterar antikroppen starkt den ursprungliga CD1a-molekylen (molekylvikt 49 kD) och Beta-2mikroglobulin (molekylvikt 12 kD), men inte den trypsin-klyvna CD1a-molekylen (molekylvikt 27 kD).2 I immunhistokemi har antikroppen
påvisats reagera med CD1a cellyteglykoprotein, som uttrycks på kortikala tymocyter, Langerhans-celler, och interdigiterande dendritiska
(retikulum) celler i frusna och formalinfixerade, paraffininbäddade (FFPE) vävnader.1,2
Material som behövs, men inte ingår
Se Dakos Allmänna instruktioner för immunhistokemisk färgning och/eller detektionssystemets instruktioner. Föreslaget spädningsmedel för
IHC-procedurer:
Antibody Diluent (kod S0809)
Följande negativa kontroll rekommenderas för IHC-procedurer:
Mouse IgG1 (kod X0931)
Försiktighetsåtgärder
1. För yrkesmässigt bruk.
2. Denna produkt innehåller natriumazid (NaN3), en kemikalie som är mycket giftig i ren form. I produktkoncentrationer kan NaN3, trots att
det inte klassificeras som farligt, reagera med bly- och kopparrör och bilda högexplosiva metallazider. Skölj med stora mängder vatten
vid kassering så att inte metallazider ansamlas i avloppet.3
3. I likhet med alla produkter av biologiskt ursprung krävs en korrekt hantering.
4. Använd lämplig skyddsutrustning för att undvika kontakt med ögon och hud.
5. Oanvänd lösning måste kasseras enligt lokala och nationella föreskrifter.
Förvaring
Förvaras vid 2–8 °C. Får ej användas efter det utgå ngsdatum som anges på flaskan. Användaren måste validera alla förvaringsförhållanden
som avviker från de som specificerats. Det finns inga tydliga tecken som indikerar instabilitet hos denna produkt. Därför bör positiva och
negativa kontroller analyseras samtidigt med patientproverna. Kontakta Dako teknisk service om du observerar oväntad färgning som inte
kan förklaras med variationer i laboratorieprocedurerna och om du misstänker att det finns något problem med antikroppen.
(112108-003)
303743SE_002 s. 1/3
Provpreparation
Paraffinsnitt
Anti-CD1a, klon 010, kan användas på formalinfixerade, paraffininbäddade vävnadssnitt. De avparaffinerade vävnadssnitten måste
värmebehandlas före IHC-färgningsproceduren. Målåtervinning innefattar nedsänkning av vävnadssnitt i en förvärmd buffertlösning och
bibehållande av värmen, antingen i ett vattenbad (95–99 °C), en ångapparat (95–99 °C) eller en autokla v (121 °C). För bättre vidhäftning av
vävnadssnitten till objektglasen rekommenderas användning av Silanized Slides (kod S3003). Target Retrieval Solution(kod S1700) eller 10x
Concentrate (kod S1699) rekommenderas med användning av ett 20-minuters värmeprotokoll.
Kryostatsnitt och cellutstryk
Anti-CD1a, klon 010, kan användas för märkning av acetonfixerade kryostatsnitt eller fixerade cellutstryk.Mål- eller antigenåtervinning krävs
ej.
Färgningsprocedur
Följ proceduren för det valda detektionssystemet.
Tolkning av färgningen
Det cellulära färgningsmönstret för CD1 är cytoplasmiskt och/eller membranöst.1, 2, 4
Produktspecifika begränsningar
Användning av DAB som kromogen med LSAB2, HRP (flytande DAB) system för optimal färgningsprestanda på paraffininbäddade
vävnader, rekommenderas starkt.
Prestandaegenskaper
Normal vävnad
Anti-CD1a, klon 010 har visat sig vara immunreaktivt med Langerhans celler och variabelt immunoreaktivt med interdigitala dendritiska celler
när den testades på FFPE-tonsill, och med Langerhans celler när den testades på paraffininbäddad hud.1 All färgning i tonsillernas
germinalcenter ska ignoreras. Spridd immunoreaktivitet har observerats i interdigitala dendritiska celler och medullära tymocyter i tymisk
medulla.1, 2 Det bör noteras att färgning av glatta muskelceller kan observeras.
Vävnadstyp
(antal testade)
Binjure (3)
Benmärg (3)
Bröst (3)
Cerebellum (3)
Cerebrum (3)
Cervix (3)
Tjocktarm (3)
Esofagus (3)
Hjärta (3)
Njure (3)
Lever (3)
Lunga (3)
Mesotelceller (3)
Nerv, perifer (3)
Äggstock (3)
Positiva vävnadselement
0/3
0/3
1/3
0/3
0/3
1/3
0/3
3/3
0/3
0/3
0/3
2/3
0/3
0/3
1/3
Vävnadstyp
(antal testade)
Bukspottkörtel (3)
Bisköldkörtel (3)
Hypofys (3)
Prostata (3)
Spottkörtel (3)
Skelettmuskel (3)
Hud (3)
Tunntarm (3)
Mjälte (3)
Mage (3)
Testikel (3)
Tymus (3)
Sköldkörtel (3)
Tonsill (3)
Livmoder (3)
Positiva
vävnadselement
2/3
0/3
0/3
0/3
0/3
0/3
3/3
0/3
0/3
0/3
0/3
2/3
0/3
3/3
0/3
Onormala vävnader
Anti-CD1a, klon 010 har uppvisat följande resultat på onormala paraffininbäddade vävnader.1, 4, 5
Tabell 1: Sammanfattning av onormal vävnadsreaktivitet
Vävnadstyp
Ben: Langerhans cellhistiocytos
Lunga: Langerhans cellhistiocytos
Hud: Langerhans cellhistiocytos
Lymfkörtel: Langerhans cellhistiocytos
Kranialben: Langerhans cellhistiocytos
Hypotalamus: Langerhans cellhistiocytos
Langerhans cellhistiocytos: Eosinofiliskt
granulom
Langerhans cellhistiocytos: Pulmonellt
Langerhans cellhistiocytos: Hand-SchullerChristian
T-ALL/LBL
Nevusa
Melanoma
Neurofibroma
Rosai-Dorfman adenopatia
Juvenilt xantogranuloma
Lymkörtel: Parakortikal hyperplasi
Lymfkörtel: Dermatopatisk lymfadenopati
(112108-003)
Positiv och negativ färgning av vävnadselement
17/17 positiva, Langerhans cellhistiocytosceller med en kärna
2/2 positiva, Langerhans cellhistiocytosceller med en kärna
13/14 positiva, Langerhans cellhistiocytosceller med en kärna
1/1 positiva, Langerhans cellhistiocytosceller med en kärna
4/4 positiva, Langerhans cellhistiocytosceller
7/7 positiva, Langerhans cellhistiocytosceller
4/4 positiva, Langerhans cellhistiocytosceller
4/4 positiva, Langerhans cellhistiocytosceller
1/1 positiva, Langerhans cellhistiocytosceller
4/8 positiva, neoplastiska celler
3/3 negativa
2/2 negativa
2/2 negativa
2/2 negativa
3/3 negativa, neoplastiska celler
3/4 variabelt positiva, normala interdigiterande dendritiska celler
7/7 positiva, normala, stora dendritiska celler och dolda celler,
variabelt positiva, normala interdigiterande dendritiska celler
303743SE_002 s. 2/3
Hud: Lymfoid hyperplasi
2/2 positiva, normala Langerhans-celler och dermala dendritiska celler,
variabelt positiva, normala interdigiterande, dendritiska celler
Hud: Xantom
1/1 positiva, normala Langerhans-celler
Kutant lymfom: Fungoid mykos
2/2 positiva, normala Langerhans-celler, stora dentritiska celler,
och dermala dendritiska celler
Kutant lymfom: Låggradig B-cell
1/1 positiva, normala Langerhans-celler
Kutant lymfom: T-immunoblastisk
1/1 positiva, normala Langerhans-celler, stora dentritiska celler,
och dermala dendritiska celler
Kutant lymfom: Anaplastisk (Kil+) stor cell 1/1 positiva, normala Langerhans-celler
Perifert T-cellymfom
5/5 negativa
Tymus: Hodgkins sjukdom
2/2 positiva, normala kortikala tymocyter och stora dendritiska celler,
variabelt positiva, normala interdigiterande, dendritiska celler
Tymus: Tymom av kortikal typ
2/2 positiva, neoplastiska, kortikala tymocyter
Maxillärt Burkitts lymfom
1/1 positiva, normala Langerhans-celler
a
Alla hudprover innehöll normala intraepidermala Langerhans-celler, som färgats positivt med anti-CD1a, klon 010.4
Referenser
1. Krenács L, Tiszalvicz L, Krenács T, Boumsell, L. Immunohistochemical detection of CD1a antigen in formalin-fixed and paraffinembedded tissue sections with monoclonal antibody 010. J Pathol 1993; 171:99
2. Boumsell L. Cluster Report: CD1 in Leucocyte Typing IV. Eds. W Knapp, B Dörken, WR Gilks, EP Rieber, RE Schmidt, H Stein, and
AEG Dr. von dem Borne. Oxford: Oxford UP, 1989: 251
3. Department of Health, Education and Welfare, National Institute for Occupational Safety and Health, Rockville, MD. “Procedures for the
decontamination of plumbing systems containing copper and/or lead azides.” DHHS (NIOSH) Publ. No. 78-127, Current 13. August 16,
1976
4. Emile JF, Wechsler J, Brousse N, Boulland ML, Cologon R, Fraitag S, Voisin MC, Gaulard P, Boumsell L, Zafrani ES. Langerhans’ cell
histiocytosis: Definitive diagnosis with the use of monoclonal antibody O10 on routinely paraffin-embedded samples. Amer J Surg
Pathol 1995; 19(6):636
5. Mazal PR, Hainfellner JA, Preiser J, Czech T, Simonitsch I, Radaszkiewicz T, Budka H. Langerhans cell histiocytosis of the
hypothalamus: Diagnostic value of immunohistochemistry. Clin Neuropath 1996; 15(2):87
Edition 01/15
(112108-003)
303743SE_002 s. 3/3
