Block 1. CELLENS BYGGSTENAR OCH BIOKEMINS VERKTYG Lärandemål för block 1 Efter avslutad kurs ska studenten kunna: - beskriva hur biologiska makromolekyler (proteiner, kolhydrater, lipider, nukleinsyror) är uppbyggda, och förklara sambanden mellan deras struktur och funktion. Moment Nyckelord Mål Studenten ska kunna Cellbiologi och modern medicin Introduktion till modern cellbiologi Lipider: Struktur, syntes och funktion Stryer kap 12 sid 326-334, kap 26, sid 743-744 Energi-lager: Fria fettsyror och triacylglycerol Redogöra översiktligt för det cellbiologiska perspektivet på dagens medicin Beskriva lipiders struktur och biologiska funktioner Membranlipider: Amfipatibegreppet Kolesterol (struktur ska kunnas) Fosfolipider (principiell struktur ska kunnas) Glykolipider (principiellstruktur ska kunnas) Bildning av miceller och membraner Transportformer: Översiktligt om lipoproteiners struktur och funktion Aminosyror. Struktur, syntes och funktion Stryer kap 2, kap 24 Stryer sid 295-296, 700-701, 779, 930, 1009-1010. Primära aminosyror: uppbyggnad, isomerer och joniseringstillstånd. De 20 aminosyrornas struktur och kemiska egenskaper. Redogöra för proteiners struktur, och proteinstrukturens beroende av aminosyrornas egenskaper Syntes av aminosyror (översiktligt) Aminosyror som precursorer för biomolekyler Kolhydrater. Struktur, syntes och funktion Stryer kap 11 sid 303-317, 320-323 + sid 451-452 Kolhydraters struktur: stereokemi, isomeri, ringbildning, glykosidisk bindning Monosackarider: glukos (struktur ska kunnas), galaktos, N- Beskriva kolhydraters struktur och biologiska roller (Kolhydratmetabolism dvs nedbrytning av kolhydrater för utvinnande av energi ingår inte) acetylglukosamin, Nacetylgalatosamin, fucos, sialinsyra Disackarider: laktos Galaktosemi Laktosintolerans Glykokonjugat: glykoproteiner (N-linked + O-linked) /glykolipider /proteoglykaner (principiell struktur ska kunnas) Diversitet - AB0systemet Från aminosyror till 3D struktur Stryer kap 2, förutom detaljer kring konstruktion av Ramachandran-diagram. Peptiders kemiska uppbyggnad, peptidbindningens egenskaper, speciella egenskaper hos prolin och cystein. Redogöra för proteiners struktur, och proteinstrukturens beroende av aminosyrornas egenskaper Innebörden av uppdelningen primär-, sekundär, tertiär- och kvartärstruktur. De viktigaste sekundärstrukturernas uppbyggnad: alfa-helix, betaflak och 'reverse turn'. (Detaljerna kring konstruktion av Ramachandran-diagram ingår inte.) Principer för stabilisering av proteiners tre-dimensionella struktur samt innebörden av begreppen 'veckning', 'kooperativitet', 'denaturering', 'sekundärstruktur-propensitet' och 'strukturprediktion'. Olika typer av visualisering av proteinstrukturer. Enzymer Stryer Kap 8. Fokus på förståelse, ej matematiska härledningar. Innebörden av begreppet 'post-translationell modifiering' och de exempel som nämns i Stryer. Innebörd av och samband mellan termodynamiska grundbegrepp: entalpi, entropi, fri energi. Enzymklasser och cofaktorer Aktiveringsenergi, övergångstillstånd, katalys. Stryer, Kap 9 Redogöra för enzymkinetik och reglering av enzymkatalyserade reaktioner Beskriva enzymers och coenzymers struktur och funktion Enzymer: definition, samband mellan struktur och katalytisk funktion. "Active sites" och deras egenskaper. Kemisk reaktionskinetik: hastighetskonstanter och deras samband med jämviktskonstanten. (Avsnittet Enzymklasser och co-faktorer syftar till att ge en orienterande kunskap om de enzymer och begrepp som beskrivs, men avsnittet omfattar inte alla detaljer i t ex olika enzymatiska mekanismer.) Enzymkinetik: bildningen av enzym-substratkomplex som intermediär. "Steady-state". Antaganden som ligger till grund för Michaelis-Mentens ekvationer. Michaelis-Mentens parametrar KM och Vmax, och deras innebörd (ej härledning). Innebörden av kcat. Kompetitiva och nonkompetitiva inhibitorer och deras inverkan på de kinetiska parametrarna. Transition-state analoger som inhibitorer. Kofaktorer och deras roll i enzymkatalys. Vitaminer. Kopplade enzymatiska reaktioner som en metod att generera energirika produkter Exempel på enzymkatalyserade reaktioner: • Proteaser. Chymotrypsin. Den katalytiska triaden. • Nukleaser. RNAs, restriktionsenzymer. • Kinaser och fosfataser. • Syntaser • Oxidoreduktaser Att utforska proteiner Stryer kap 3. Ej detaljer i avsnitten 3.2, 3.4 och 3.6. Innebörden av begreppet 'proteom' . Skillnader i proteiners kemiska och fysikaliska egenskaper samt hur dessa ligger till grund för olika principer för renframställning av proteiner. Gelfiltrering, Beskriva metoder för undersökning av proteiners struktur och funktion jonbyteskromatografi, affinitetskromatografi, dialys. Principer och tillämpning av elektrofores (SDS-PAGE), isoelektrisk fokusering, 2Delektrofores, analytisk ultracentrifugering och massspektrometri. Översiktlig beskrivning av peptid-analys med hjälp av Edman-degradering och andra metoder baserade på proteolys. (Diagonal elektrofores ingår inte). Översiktlig beskrivning av protein-analys med immunologiska tekniker och 'blottning'. Antikropp och antigen. Skillnaden mellan monoklonals och polyklonala antikroppar m a p igenkänning av antigen. Principen för detektion av antikroppar m h a ELISAmetoden. Olika användningar av syntetiskt tillverkade peptider. (Detaljer kring peptidsyntes ingår inte). Förutsättningarna för proteinstrukturbestämning med röntgen-kristallografi och NMR såsom de beskrivs i Stryer. Fördelar och nackdelar med dessa två metoder. Hemoglobin Stryer kap 7 Myoglobins och hemoglobins struktur inklusive porfyrinring och Fe Ko-operativitet - jämförelse av syrebindningsförmågan hos myoglobin och hemoglobin Alloster reglering - effekter + av CO2, H och BPG – molekylär bakgrund till dessa effekter Myoglobins och hemoglobins mättnadskurvor - dvs syretransport till vävnader Jämförelse av HbF (fetalt hemoglobin) och HbA (adult hemoglobin) – konsekvens Den molekylära bakgrunden till sickle-cell anemi Beskriva hur proteiners funktion är beroende av proteinstrukturen och enskilda aminosyrors egenskaper Nukleotider: Struktur, syntes och funktion Stryer sid 107-117, kap 25 Principiell struktur för nukleotider och nukleosider, det strukturella underlaget för komplementär basparning, fysikaliska principer för dubbelsträngade DNA/RNA molekylers stabilitet (vätebindningar, stacking interaktioner och elektrostatisk repulsion). Beskriva byggstenarna för DNA och RNA Proteinreglering: posttranslationella modifieringar och reglerad turnover Stryer sid 651-655, Cooper sid 340-348 Fosforylering; Ser/Thekinaser och Tyr-kinaser Fosfataser Reglerad nedbrytning av proteiner (ubiquitinylering och proteasomen). Beskriva mekanismer för reglering av proteiners aktivitet samt mekanismer för omsättning av proteiner BLOCK 2. GRUNDLÄGGANDE CELL- OCH MOLEKYLÄRBIOLOGI Lärandemål för block 2 Efter avslutad kurs ska studenten kunna: - beskriva hur nukleinsyrebaserade makromolekyler (DNA och de olika formerna av RNA) är uppbyggda, och förklara sambanden mellan deras struktur och funktion. - beskriva överföringen av genetisk information från DNA till protein. - beskriva hur mikrobers genom är uppbyggd, och förklara hur uttrycket av gener regleras - sammanfatta och jämföra information från vetenskaplig litteratur inom ämnesområdet Moment Nyckelord DNA/RNA struktur och funktion Stryer kap 4, kap 28 sid 783803, kap 29 sid 821-839 DNA molekylens topologiska egenskaper: superhelicitet och topoisomeraser Kromosom, gen, virus, bakteriofag, plasmider, transposoner. Mål Studenten ska kunna Beskriva - Primärstruktur och sekundärstruktur för DNA och RNA - Den biologiska funktionen för DNA rRNA, tRNA, mRNA. snRNA Molekylärbiologiska begrepp: replikation, transkription, translation, den genetiska koden, läsram. - Funktioner hos RNA Enzymatiska aktiviteter inom molekylärbiologin: DNA polymeras, RNA polymeras, reverse transcriptase, ribosomen, endonukleas, exonukleas, restriktionsendonukleaser, DNA ligas. Den prokaryota cellen, plasmider och bakteriofager Kompendium, Stryer sid 153, Kromosom Plasmider Överföring av genetiskt material hos bakterier (transformation, konjugation, Beskriva det bakteriella genomets organisation transduktion, transposition). Prokaryota genom och dess replikation Stryer kap 4 sid 115-123, kap 28 sid 783-801, Cooper kap 6 sid 201-214 Molekylärbiologiska metoder Cooper sid 118-135 Stryer kap 5 Prokaryot transkription och genreglering Stryer kap 29 sid 821-831, kap 31 sid 892-901, Cooper kap 7 sid 251-265 och 288-290 Replikonbegreppet Struktur och funktion hos DNA polymeras I och III Processivitet och proofreading Replikationsgaffeln och den prokaryota replisomen Reglering av den den prokaryota cellcykeln. Klyvning, ligering och förmering av DNA Hybridiserings- och sekveneringstekniker för identifiering av DNA eller RNA Mainpulering av genuttryck RNAi-mekanismen Beskriva hur bakteriella genom replikeras Struktur och funktion hos RNA polymeras Operonbegreppet Promotor Operator Initiering och terminering av transkription. Beskriva Beskriva basala metoder för att karaktärisera och manipulera RNA och DNA - Överföring av genetisk information från DNA till mRNA - Reglering av uttrycket av bakteriella genom Positiv och negativ reglering Repressorer och aktivatorer, inducers och co-repressorer Koppling av transkription och translation. Proteinsyntes Stryer kap 30, Cooper kap 8 sid 310-332 tRNA stuktur Aminoacylering av tRNA Ribosomens struktur och funktion Mekanismen för proteinsyntes Regleringsmekanismer för proteinsyntesen. Beskriva överföringen av genetisk information från mRNA till protein BLOCK 3. DEN EUKARYOTA CELLENS MOLEKYLÄRA BIOLOGI Lärandemål för block 3 Efter avslutad kurs ska studenten kunna: - beskriva överföringen av genetisk information från DNA till protein. - beskriva hur det humana genomet är uppbyggdt och förklara hur uttrycket av gener regleras. beskriva mekanismer för uppkomst av DNAskador och mutationer, samt mekanismer för reparation av DNAskador. självständigt läsa och förstå vetenskaplig litteratur inom ämnesområdet. Moment Nyckelord Eukaryot DNA replikation Stryer kap 28, kap 25 sid 709-710 + 718-723 Cooper kap 6, kap 3 sid 9699, sid 373-374, sid 174-176, sid 214-216 Syntes av dNTPs Replikatorsekvenser (ARS,ori) initieringsproteiner (ORC,CDC6, MCM) Reglering med fosforylering och proteolys Den eukaryota replikationsgaffeln (DNA polymeras alfa/delta/epsilon, PCNA, RFC, RPA, DNA ligas) Nybildning av kromatin på replikerat DNA (epigenetisk nedärvning) Telomerer, telomeras och cellåldrande. Basal och aktiverad transkription RNA polymeras I, II och III Generella (basala) transkriptionsfaktorer och promotoraktivering Sekvensspecifika transkriptionsfaktorer (aktivatorer) och binding till regulatoriska regioner Eukaryota repressorer och coaktivatorer Interaktion mellan transkriptionsaktivatorer och mediatorn hos RNA polymeras II Reglering av genexpression Stryer kap 31, Cooper sid 166-176, sid 278287, sid 369-374 Stryer kap 28, Cooper kap 7 Fosforylering av CTD Posttranskriptionella modifieringar av primärtranskriptatet (capping, polyadenylering, splicing) Posttranskriptionell modifiering av pre-mRNA: 7metylguanosin(m7G) capping (sk 5´capping), poly-A svans, splicing och mekansismen bakom denna. Mål Studenten ska kunna Beskriva hur humana cellers DNA replikeras Beskriva - Den eukaryota kromosomens uppbyggnad - Överföringen av genetisk information från DNA till mRNA hos eukaryoter - Regleringen av transkriptionen hos eukaryoter - Modifieringar av eukaryot mRNA Spliceosomladdningen snRNP Alternativ splicing och dess innebörd för proteinuttrycket RNA editing Rekombination och transposition Stryer kap 28, sid 935-937, 956-961 Cooper sid 227-246, sid 115117, sid 738-739, sid 37 Det humana genomet Stryer kap 5 sid 149-152, (sid 164-181) Cooper sid 118-124, sid 240245 Cellkärnans arkitektur Cooper kap 9+ sid 672-681 Homolog rekombination Site-specifik rekombination och dess betydelse för diversifieringens av immunglobulingener och Tcellreceptorgener under immunsystemets utveckling Somatisk hypermutation Class switch rekombination Transposoner och retrovirus Gener och pseudogener Sekvensinnehåll (unika och repeterade sekvenser, LINES, SINES, satelliter, mikrosatelliter) Funktionella element av betydelse för kromosomal stabilitet (ARS, centromer, telomer) Genorganisation (enhancer, promotor, exon, intron, genfamiljer, pseudogener) Mekanismer för genomevolution (retrotransposition, rekombination, genduplikation, exonshuffling, replikationsfel) Kärnmembran, nukleär lamina, kärnporer, nukleol Sjukdomar vid defekter i nukleär lamina Transport över kärnmembranet (NLS, importin/exportin, Ran, energiberoende, koncentationsgradienter, reglerad transport, substratspecificitet) Cellcykelberoende förändringar i kärnans struktur Kromsomlokalisation Nukleära kompartments, nukeolen och bildning av ribosomer. Beskriva mekanismer för rearrangemang av DNA och dessas betydelse för kontroll av genuttryck i specifika celltyper (immunsystemets diversitet), replikation av retrovirus samt evolutionära betydelse Beskriva det humana genomets uppbyggnad Beskriva cellkärnans uppbyggnad och mekanismer för transport över kärnmembranet Genomisk stabilitet hos eukaryoter Cooper kap 6 Mekanismer för uppkomst av DNA skador och mutationer hos prokaryoter och eukaryoter. Molekylära mekanismer för reparation av DNA skador: Base-excision repair Nucleotide-excision repair Mismatch repair Reparation av dubbelsträngsbrott: (homolog rekombination) Koppling mellan transkription och reparation. Beskriva mekanismer för uppkomst av DNA skador och reparationsmekanismer hos eukaryoter, kopplingen mellan genetisk instabilitet och sjukdom (cancer, åldrande, strålbehandling och cytostatika, ärftliga sjukdomar), insikter i modern cancerteori sambandet DNAreparation och cancer). Likheter och skillnader mellan prokaryota och eukaryota cellers reparationsmekanismer. Intro till virologin + Viral genetik Cooper sid 37-39, Stryer sid 118 Virus allmänna egenskaper (genom, kapsid, hölje) Klassificering och virusfamiljer Beskriva virusspecifika genetiska mekanismer Virusgenetik: Mutation och rekombination Selektionstryck Fylogeni Fenotypisk blandning Virus-cell interaktioner Cooper sid 37-39, 735-739, 768, kompendium Virala attachment proteins VAPs Receptorförhållanden, coreceptorer Penetrationsförhållanden Lytiska virusinfektioner inkl. patogenes på cellulär nivå Onkolatenta virusinfektioner, latens på cellulär nivå, virusorsakad cellulär transformation Redogöra för mekanismer för virus påverkan på eukaryota celler (viral patogenes) Vetenskaplig litteratur/frågestund Introdultion till biomedicinsk vetenskaplig litteratur med utgångspunkt från aktuella artiklar Självständigt läsa och förstå vetenskaplig litteratur inom ämnesområdet. BLOCK 4. EUKARYOT CELLBIOLOGI: CELLENS UPPBYGGNAD OCH TILLVÄXTREGLERING Lärandemål för block 4 Efter avslutad kurs ska studenten kunna: - beskriva cellcykeln och dess reglering, samt hur humana cellers DNA replikeras. - beskriva cellbiologiska skeenden (interaktion med omgivningen, transport, intracellulär signalering, cellens rörlighet, programmerad celldöd och mikrob-cell interaktion). Moment Nyckelord Den eukaryota cellcykeln Cooper kap 16 Cellcykelns indelning (G0, G1, S, G2, mitos) Kromatinförändringar under cellcykeln Mitosens faser och dess reglering Skillnader mitos/meios Cellcykelns reglering (cykliner och cyklinberoende kinaser, proteolytisk degradation) Checkpoints (onkgener och tumörsuppressor gener) Cellcykelreglering och cancer Cellmembranets arkitektur och egenskaper Stryer sid 333-348 Principiell uppbyggnad av biologiska membran: membranlipider och membranproteiners struktur och placering i membranet. Barriärfunktionen Membrandomäner Glykokalyx struktur Glykokalyx roll för igenkänning - cell-cell + cellmikrob Cell-cell-interaktioner Celladhesionsmolekyler Beskriva hur den eukaryota cellmembranet är uppbyggt Transport över biologiska membran Stryer kap 13, kompendium Passiv transport: - diffusion, - faciliterad transport Transportproteiner: permeaaser (uniport), jonkanaler Drivkrafter: - koncentrationsgradient - elektrokemisk gradient Beskriva mekanismer för transport över cellmembranet Aktiv transport: Mål Studenten ska kunna Beskriva den eukaryota cellcykeln och dess reglering - ATP-driven - co-transport Transportproteiner: pumpar, co-transportörer (anti- resp symport) Drivkrafter/Energikällor: ATP-hydrolys, koncentrationsgradient Osmos/osmotiskt tryck Na+ kanalen Na+/K+ pumpen Laktospermeas Bakteriorhodopsin Sekretoriska passagen Cooper kap 10 + sid 557-566 Morfologi och funktion hos organeller och transportformer i de sekretoriska och endocytiska vägarna Postranslationell modifiering av proteiner (glykosylering, myristoylering mm) Proteinsortering (till ER, mitokondrier, kärna, lysosom, membran) Bildande av transportvesiklar vid receptorberoende transport Bildande av transportvesiklar vid receptor-oberoende transport Fusion av transportvesikel med targetorganell Endocytos Temadag: Evolution och /eller intelligent design Signaltransduktion Stryer kap 14, kompendium Mekanism för G-proteinmedierad signalering Fosfoinositid-kaskaden Kalcium som intracellulär messenger Aktivering av receptorer genom bildning av dimerer Mitokondriens funktioner Cooper sid sid 434-450 Mitokondriens uppbyggnad Endosymbiosteorin Det mitokondriella genomet: struktur och funktion Transport över mitokondriens membran Mitokondriens innermembrans betydelse Beskriva mekanismer för intracellulär transport och endocytos Diskutera den naturvetenskapliga grunden för medicinsk kunskap Beskriva principer för cellkommunikation via signaltransduktionskaskader Beskriva mitokondriens uppbyggnad och funktioner Cellskelettet/Cellens rörelseförmåga Cooper kap 12 Programmerad celldöd (apoptos) Cooper sid 693-705 för den oxidativa fosforyleringen Cellskelettets struktur: aktin, intermediära filament, mikrotubuli – uppbyggnad och fuktion Cell junctions Cellskelettets betydelse för cellrörlighet organelltransport, celldelning mm Morfologiska och molekylära kännetecken på apoptos Initiering av apoptos: Kaspaser och och mitokondriens roll vid reglering Beskriva cellskelettets uppbyggnad och funktioner Redogöra för mekanismer för programmerad celldöd och dess reglering, samt apoptosens roll i fysiologiska och patologiska sammanhang Trofiska faktorer och cell överlevnad Skillnader mellan apoptos och nekros. Bakterie-cell interaktioner Kompendium Temadag cancer Cooper sid 725-735 Bakterieadhesion och invasion i eukaryota celler Mekanismer för bakteriepåverkan på eukaryota signalsystem Redogöra för mekanismer för bakteriers påverkan på eukaryota celler (bakteriell patogenes) Förstå och redogöra för de genetiska principerna för tumöruppkomst