\
\
\
Bilaga l - Mall/Rubri ker för den populärvetenskapliga sammanfattningen
Titel
Studier av könsdeterminering och reproduktion hos fisk, samt störningar av dessa.
Sökord (Key Words, max 5)
Zebrafisk, Könskromosomer, Inflammation, sex differentiering, Fortplantning
Syftet med försöket (enligt artikel 5 Direktiv 201 0/63/EU)
Grundvetenskaplig forskning
Beskriv försökets mål (de vetenskapliga frågorna, eller de vetenskapliga, kliniska behoven som ska mötas)
Målet är att öka förståelsen för hur testiklar och ovarier bildas och hur deras funktion bibehålls och hur detta kan
störas av förändringar i miljön
Vilka potentiella nyttor förväntas komma ur försöket (vilka vetenskapliga framsteg kommer att nås, hur kan människor
eller djur dra nytta av försöket)?
Vi har visat att inflammation aktiverar signaler som leder till ovarieutveckling och hämmar testikelutveckling.
Detta genom en universel mekanism. Det öppnar upp for ökad förståelse för hur fortplanting kan störas.
Vilka arter ska användas, och hur många djur?
Zebrafisk, 200 djur
Vilka är de förväntade negativa effekterna på djuren och vilken är den förväntade svårhetsgraden?
Eftersom inflammation och stress kan påverka utfallet får djuren inte vara stressade. Det som kan hända är att de
byter kön. Svårighetsgraden är medel.
JR-aspekter
1. Ersätta (Replace)
Beskriv varför djur måste användas och varför djurfria alternativ inte kan användas.
Utvecklingsbiologiska förändringar kan i dagsläget inte studeras utan heldjur.
2. Begränsa (Reduce)
Förklara hur man har försäkrat sig om att använda så få djur som möjligt.
Vi använder in vitro, cellodling och primärkulturer, studier för att studera de övergripande mekanismerna och
testar sedan utfallet på heldjur. Detta minskar drastikst antalet djur som används
3. Förfina (Refine)
Förklara valet av art och varför den valda djurmodellen är den mest förfinade. Beskriv de insatser som gjorts för att minimera
välfärdskostnaderna för djuren.
Zebrafisk är ett modellsystem för utvecklingsbiologi och transgenteknik vilket är ett krav för att kutma studera en
så komplicerad process som uteckling av kön. Eftersom stress kan påverka utfallet måste djuren vara i god
kondition och inte utsatta för någon form av stress. Vi använder ex vivo studier, där ovarier och testiklar opererats
ut, för att göra flera studier. Detta minskar antalet heldjur som behövs.
Följande s ka fy llas i av nämnden
Försöket ska utvärderas i efterhand
n Ja
Eventuella tillägg eller ändringar som nämnden har beslutat
rxJ Nej
Populärvetenskaplig sammanfattning
studierna är inriktade på fysiologiska mekanismer av betydelse för utveckling, reproduktion
och könsdeterminering hos fisk. Vi studerar funktioner kopplade till signalvägar inblandade i
utvecklingen av hannar och honor, med speciellt fokus på utvecklingen av fungerande
testiklar och ovarier. Det är fortfarande okänt hur utvecklingen av testiklar och ovarier styrs
hos vertebrater som saknar könskromosomer, som zebrafisk. Vårt främsta mål är att utreda
detta för att identifiera vilka gener som styr processen. Ett ytterligare mål med studierna är att
utreda om dessa gener endast är inblandandet i utvecklingen av könskölilarna eller om de
krävs för bibehållandet av deras funktioner under hela livscykeln. Resultat från andra
forskargrupper indikerar att vissa sexdetermineringsgener krävs under hela livet för att
behålla ovariers och testiklars funktioner och att stömingar i dessa signaler, leder till att dessa
körtlar slutar att fungera. Det är även tydligt att de gener som vi studerar även har andra
funktioner som ännu inte är utredda.
I våra studier av könsdeterminering och differetiering använder vi zebrafisk som
modellsystem. Zebrafisken har fördelen att de inte har könskromosomer varför det är möjligt
att påverka utvecklingen av testiklar och ovarier genom olika behandlingar. Vi är främst
inriktade på att undersöka hur inununsystemet samverkar med sexdifferentieringssystemet
och hur signalvägar nedströms om NFkB, inklusive prostaglandiner, är inblandade i
processen. Vid behandling med agonister och antagonister till olika signalmolekyler använder
vi låga doser för att undvika toxiska effekter av behandlingen. Vi testar doserna i korta
exponeringar för att avgöra lägsta koncentration som kan användas. Vid studier av utveckling
av testiklar och ovarier använder vi en transgen zebrafisklinje där ovarierna uttrycker GFP
protein och kan identifieras i levande fiskar. Detta gör att vi drastiskt kan minska antalet djur
som används. Utveckling av gonader måste av naturliga skäl utföras i heldjur, men vi
kompletterar dessa studier med cellstudier för att kartlägga signalvägama. Heldjursstudierna
används främst för att avgöra utfallet, dvs. om det blir en testikel eller ovarie i slutändan.
