Medicinsk service
Gäller from
Metodbeskrivning
Godkänd av:
2012-09-05
Revision
06
Sida
1(2)
B-Helblodsaggregation, Malmö
Gäller för
MA
Klinisk kemi
B-Helblodsaggregation, B-HBAGGR (MAS
02477)
Införd i rutinen 2005
Bakgrund, indikation och tolkning
För att den primära hemostasen skall fortlöpa normalt fordras någorlunda god tillgång på
trombocyter i blodet och att trombocyterna reagerar normalt på en kärldefekt med adhesion,
frisättningsreaktion och aggregation. För att adhesionsprocessen skall fungera fordras närvaro
av von Willebrand faktorn. Vid adhesionsprocessen frisätter trombocyterna bl. a. adenosindifosfat (ADP) som resulterar i att trombocyterna aggregerar. De substanser som vanligen används för att utlösa aggregation ex vivo är Trap-6, ADP, adrenalin, arakidonsyra och kollagen. Hos normalt fungerande trombocyter startar reaktionen någon sekund efter tillsats av
stimuli och förstärks efter 1-2 min beroende på att trombocyterna frisätter eget ADP som ytterligare förlänger och förstärker aggregationstillståndet. Vid optisk analys av aggregationen i
trombocytrik plasma ses ofta en "andra aggregationsvåg" när ADP frisätts men denna är inte
lika uttalad vid analys i helblod. Av kliniskt intresse är att bestämma dels hur mycket trombocyterna aggregerar vid tillsats av olika aktiverade substanser och dels om frisättningsreaktionen (granula sekretion) inträffar. Trombocyternas aggregationsförmåga är sänkt eller avsaknad
vid olika former av trombasteni. Defekt frisättningsförmåga hos trombocyter ses vid trombopatier. Båda tillstånden leder ofta till förlängd blödningstid och ökad blödningsbenägenhet.
Vissa läkemedel har direkt hämmande effekt på trombocyterna. Vanliga sådana läkemedel är
acetylsalicylsyra som medför blockerad aggregation med arakidonsyra och klopidogrel (ADPreceptor hämmare) som blockerar aggregationen med ADP.
Analysprincip
Olika aktiverande substanser (t.ex Trap-6. ADP, adrenalin, arakidonsyra och kollagen) blandas med helblod som spätts med isoton koksalt under omrörning i en mätkyvett varefter trombocyternas förmåga att aggregera registreras. I denna metod används en lumi-aggregometer
där förändringar i impedans över två elektroder registreras. När elektroderna kommer i kontakt med blodet så täcks dessa omedelbart av ett monolager trombocyter. När en trombocytaktiverande substans sätts till blodet aggregerar trombocyterna, både i kyvetten och på elektroderna, varvid impedansen ökar. Aggregationen uttrycks i enheten ohm. Instrumentet kan samtidigt registrera frisättningen av ATP från trombocyterna med s.k. luminiscens teknik. Till
blodet sätts ett reagens (luciferin-luciferas från eldfluga) som luminiscerar i närvaro av ATP.
Ljuset från reagenset fångas upp av en fotomultiplikator och registreras.
Utarbetad av
Dokumentförvaltare
Dokument id
C-2454
Original lagras elektroniskt! Användaren ansvarar för att gällande revision används.
Medicinsk service
Gäller from
Metodbeskrivning
Godkänd av:
2012-09-05
Revision
06
Sida
2(2)
B-Helblodsaggregation, Malmö
Gäller för
MA
Klinisk kemi
Referensintervall
Resultatet bedöms av läkare
Metodkarakteristika
Interferenser och felkällor
Olika läkemedel, bla acetylsalicylsyra (ASA) och klopidogrel hämmar trombocyternas förmåga att aggregera och frisätta ATP. Speciellt kan ASA-effekten ses genom att agonisten
arakidonsyra inte fungerar. Vissa av reagenserna är relativt känsliga och har en begränsad
hållbarhet. Vid avsaknad av aggregation utan synbar anledning kan det därför vara nödvändigt att bereda nya preparationer av agonister.
Övrig information
Metoden är ej ackrediterad.
Referenser
Born GVR. Quantitative investigations into the aggregation of blood platelets. J Physiol Lond
1962; 162: 67.
Cardinal DC and Flower RJ. The electronic aggregometer: A novel device for assessing platelet behaviour in blood. J Pharmacol Meth 1980; 3: 158.
Ingerman-Wojenski CM and Silver MJ. A quick method for screening platelet dysfunctions
using the whole blood lumi-aggregometer. Thromb Haemost 1984; 51: 154-156.
Dyszkiewicz-Korpanty AM, Frenkel EP and Sarode R. Approach to the assessment of platelet
function: Comparison between optical-based platelet-rich plasma and impedance-based whole
blood platelet aggregation methods. Clin Appl Thrombosis/Hemostasis 2005; 11: 25-35.
Bipacksedel till Chrono-Par and Chrono-lume Reagents, Chrono-Log Corporation.
Utarbetad av
Dokumentförvaltare
Dokument id
C-2454
Original lagras elektroniskt! Användaren ansvarar för att gällande revision används.
