Livsmedelsmikrobiologi- innehåll Mikrobiell förskämning av livsmedel • fysikaliska & kemiska faktorer • de kemiska reaktionerna • olika livsmedel Patogener • infektioner • intoxikationer Kontroll av mikrobiell aktivitet • värmesterilisering • kemisk konservering • fermentering av livsmedel Lagstiftning och livsmedelskontroll S.-O. Enfors, KTH Livsmedelsmikrobiologi2004 Naturen är programmerad att recirkulera biologiskt bundet kol och kväve till atmosfären, genom mikrobiell aktivitet CO2 + N2 Organisk materia Djur Archae Bakterier Svamp Alger Protozoer Detta utnyttjas vid vattenrening, men det skapar problem i livsmedelshanteringen. Döda organismer S.-O. Enfors, KTH Livsmedelsmikrobiologi2004 Biologisk energi utvinns genom oxidation av reducerade substanser Etanol NAD + Pyruvat NADH Fermentation S 2N2 H2O O2 NO 3SO42- Cred NH3 S 2- Fe 2+ H2 ATP NAD + NADH ADP Respiration 2- SO4 Fe 3+ H2O Oxidation av reducerad energikälla CO2 NO3 Oxiderat co-enzym (t.ex) NAD + är primärt oxidationsmedel men måste re-oxideras genom respiration (areob/anaerob) eller fermentation S.-O. Enfors, KTH Livsmedelsmikrobiologi2004 1 Summary of microbial fermentation reactions Lactic acid fermentation Ethanol fermentation Glucose Acetaldehyde Pyruvate Lactate Oxaloacetate AcetylCoA Acetate Succinate Acetoin H2 +H2 AcetylCoA + CO2 Formate Ethanol Ethanol AcetacetylCoA CO2 Mixed acid fermentation Butyrate Acetate Acetone Butandiol Propionate Butandiol fermentation Propionic acid S.-O. Enfors, KTH fermentation Butanol 2-propanol Butyric acid/ Aceton-butanol fermentation Livsmedelsmikrobiologi2004 Faktorer som begränsar livsmedels hållbarhet 1. Fysikaliska Uttorkning 2. Kemiska Endogen metabolism Oxidation Hydrolys 3. Mikrobiella Förskämning S.-O. Enfors, KTH Livsmedelsmikrobiologi2004 Bakteriemängder på/i livsmedel (typvärden) Kött f. slakt Kött efter slakt Fiskskinn Äggskal Växtytor Mjölk i juver Mjölk e. mjölkning Förskämningsflora S.-O. Enfors, KTH 0 10 3 10 3-4 10 3 10 3 0 10 3-4 cm -2 cm -2 cm -2 cm -2 mL -1 (primärflora) (kontaminationsflora) (primärflora) (kontminationsflora) (primärflora) (primärflora) (kontaminationsflora) 10 7-8 cm -2 ( mL -1 ) Livsmedelsmikrobiologi2004 2 Mikroflorans utveckling på kyllagrat kött (griskotlettrad) log celler/cm2 10°C 20°C Lukt !! 108 107 8°C 4°C 0°C 103 S.-O. Enfors, KTH Livsmedelsmikrobiologi2004 Hållbarheten av ett livsmedel bestäms av • Temperaturen • Vattenaktiviteten • pH • Syrehalt och syretillförsel • Tillgängliga kol/energi-källor • Strukturen • Kemiska inhibitorer S.-O. Enfors, KTH Livsmedelsmikrobiologi2004 Vattenaktiviteten selekterar fram mikrofloran Pseudomonas E. coli Clostridium Bacillus Lactobacillus Streptococcus Lactococcus Micrococcus Staphylococcus Jäst Mögelsvampar Halofila bakterier Xerofila mögel Osmofil jäst S.-O. Enfors, KTH 0.97 0.96 0.95 0.93 0.93 0.93 0.93 0.93 0.86 0.85 0.80 0.75 0.65 0.6 Mjölk.kött,fisk: aw>0.99 Korv,7%salt Skinka, 12% salt Sylt, 50% socker Sill, 20% salt Marmelad Säd, 10% vatten Torkad frukt Livsmedelsmikrobiologi2004 3 Rel. reaction rate Influence of water activity on relative reaction rates in food Lipid oxidation Lipase protease Molds Yeast 0 0.2 0.4 0.6 Bacteria 0.8 1 Water activity S.-O. Enfors, KTH Livsmedelsmikrobiologi2004 Water vapor sorption isotherms 40 Fruit Water % 30 Starch 20 Meat Cellulose 10 0 0 0.3 0.6 0.9 Water activity S.-O. Enfors, KTH Livsmedelsmikrobiologi2004 Jäst Mögel 9.5 7 7-6 7-6 6.5 6.5 6.2 5.1-6.4 6-5 5.9 5.5 5.3 4.5 4.2 3.9 3 2 Bakterier Livsmedels pH och mikrobiell tillväxt Ägg Räkor Fisk Majs Mjölk Melon Smör Kött Ostron Ost Kål Potatis Filmjölk Tomater Yoghurt Äpple S.-O. Enfors, KTH Citron Livsmedelsmikrobiologi2004 4 Antimikrobiella substanser i livsmedel Lingon: bensoesyra Vitlök/lök allicin (diallylthiosulfinsyra) Oregano m.fl eteriska oljor Mikrobiellt producerade ( antibiotika och bacteriociner ) Lactococcus lactis nisin Lactobacillus acidophilus acidocin B Lactobacillus reuterii reuterin S.-O. Enfors, KTH Livsmedelsmikrobiologi2004 Lactoperoxidassystemet inaktiverar transportproteiner i cellmembranet genom oxidation av SH-grupper O2 oxidas katalas thiocyanat SCN- H2O2 HO-S-protein LP H2O Mjölksyrabakterier: OSCNhypothiocyanat HS-protein Katalas-negativa NADH-OSCN- oxidoreduktas-positiva S.-O. Enfors, KTH Livsmedelsmikrobiologi2004 Corum sensing som strategi för patogenes pectinas AHL Växtcellen bildar antimikrobiella substanser då den skadas av pektinaset. Erwinia carotovora utsöndrar AHL (N-acyl-homoserine lactone)som vid hög koncentration (≈ cellmängd) inducerar pektinaset. Anfallet börjar alltså först när många anfallare bildats. S.-O. Enfors, KTH Livsmedelsmikrobiologi2004 5 Mikrobiella reaktioner i livsmedel Nedbrytning av N-föreningar - Oxidativ deaminering - Förruttnelse Nedbrytning av fett - Hydrolytisk härskning - Oxidativ härskning ”Härskning” Nedbrytning av kolhydrater - Organiska syror ”Surning” - Polysackarider Slembildning Toxinbildning ”Matförgiftning” S.-O. Enfors, KTH Livsmedelsmikrobiologi2004 Nedbrytning av N-föreningar 1. Oxidativ deaminering aa + O2 2. Proteolys protein deaminas proteas NH 3 + organisk syra peptider aminosyror aminer org. syror S-föreningar indol 3. Förruttnelse aa peptidas anaerob metabolism 4. Reduktion av trimetylaminoxid (TMAO) TMAO S.-O. Enfors, KTH TMAOreduktas TMA Livsmedelsmikrobiologi2004 Dekarboxylering av aminosyror Lys Orn His H2N - CH - COOH (CH2)4 NH2 CO 2 H2N - CH - COOH (CH3)3 NH2 CO 2 H2N - CH - COOH CH2 HN S.-O. Enfors, KTH cadaverin putrecin histamin CO 2 N Livsmedelsmikrobiologi2004 6 Härskning Autohydrolys Hydrolytisk Lipolys enzymatisk mikrobiell Autooxidation Oxidativ Lipoxydaskatalys ß-oxidation S.-O. Enfors, KTH FFA + glycerol aldehyder + (metyl) ketoner Livsmedelsmikrobiologi2004 Autooxidativ härskning Aldehyder + ketoner ROOH R* Ljus / Fe2+ ROO* S.-O. Enfors, KTH O2 R-H Livsmedelsmikrobiologi2004 De viktigaste jäsningstyperna EtOH + CO2 AlkoholMjölksyra- homofermentativ: heterofermentativ HLac HLac + Hac + EtOH + CO2 Propionsyra- HProp + Hac + CO2 Blandad-syra- HLac + Hac + EtOH + CO2 H2 + HForm 2,3-butandiol- CO2 + EtOH + butandiol + HForm + H 2 SmörsyraS.-O. Enfors, KTH HBut + HAc + CO2 + H 2 Livsmedelsmikrobiologi2004 7