Projektkatalog vt12 Examensarbete BML 1. PAX-8. Ny antikropp med potentiell diagnostisk betydelse. Immunhistokemi. Patologen Halmstad. Handledare Tomas Seidal Rosanna Skoog 3. CISH eller FISH. Jämförelser mellan två metoder för in-stu-hybridisering. Patologen Halmstad. Handledare Tomas Seidal Johan Lundström 5. Mätning av fritt Hemoglobin – Jämförelse mellan två metoder. Studentarbete vid Claratappen, Klinisk kemiska laboratoriet & Blodcentralen CSK Sabina Aryan Bakgrund På Blodcentralen så mäter vi fritt hemoglobin för att på detta sätt beräkna hemolysgraden i utdaterade blodpåsar. Det kan ibland också vara intressant vid vissa transfusions komplikationer att mäta fritt Hemoglobin både i blodpåsen och ”patienten”. I dagsläget så använder vi en spektrofotometrisk metod på vårt kemiska laboratorium, vilken är omständlig och kräver manuellt arbete, vilket är speciellt besvärligt på kvällar & helger. Det på marknaden metoder att utföra denna analys på ett enklare sätt. Projekt Att starta upp och genomföra en jämförelse mellan vår rutinmetod vid Klinisk kemiska laboratoriet och HemoCue ”lågt Hb” för att mäta fritt hemoglogin i både blodpåsar och patient plasma/serum. Betydelse Frågeställningen är av stor praktiskt betydelse både för blodcentralen som lätt kan få ett värde på delen fritt hemoglobin i påse & patient både dag och obekväm arbetstid. Metoden frisätter även resurser på vårat kliniskt kemiska laboratorium, vilket gör att analysen även kan utföras jourtid. Handledare Per-Olof Forsberg, Med ansvarig Transfusionsmedicin Laila Arnqvist, Dirftsledare, Claratappen samt metodansvarig för komponenter. Driftsansvarig Klinisk kemi Mer info kan fås av Per-Olof Forsberg Tfn 070-6556900 E-post: [email protected] 6. Olikheter och skillnader mellan blodkomponenter på grund av framställningssätt – Granskning och bearbetning av data från komponentkontroller. Studentarbete vid Claratappen & Blodcentralen CSK Andreas Karlsson Bakgrund Vi har under många år samlat in data för våra produktkontroller. Efter att vi har samlat in detta så göra vi sammanställningar varje kavartal (det gäller hela laboratorie-medicin Värmland). Vi ser tydliga skillnader mellan olika metoder att framställa erytrocytkomponenter Projekt Sammanställa och se hur variablerna Hb innehåll, Vikt, EVF, mm varierar mellan olika metoder samt att belysa för respektive nackdelar med de olika framställningssätten Betydelse Frågeställningen är av stor praktiskt betydelse då vi i Värmland ökar produktionen av aferes komponenter och vi måste motivera varför? Med ”hårda data” Handledare Per-Olof Forsberg, Med ansvarig Transfusionsmedicin Laila Arnqvist, Dirftsledare, Claratappen samt metodansvarig för komponenter. Mer info kan fås av Per-Olof Forsberg Tfn 070-6556900 E-post: [email protected] 7. Utröna sambandet mellan Hemoglobin (Hb) och Erytrocyter volymfraktion (EVF) – Hur hantera översättningen av dessa värden & föränderlighet. Studentarbete vid Claratappen, Klinisk kemiska laboratoriet & Blodcentralen CSK Salwa Muosa Latif Bakgrund På Claratappen behöver vi för att ställa in viss utrustning kunna översätta Hb till EVF, framförallt på historiska data (dvs tidigare tappningar). I dagsläget så använder vi en ”översättningsfunktion” som är utarbetad på 70-talet och som vi vet inte är exakt. Tyvärr så finns det ingen annan algoritm eller undersökning att följa (det är det bästa vi har) men vi är inte lyckliga över denna situation Projekt Att berabeta data insamlade från givare. Vi kommer att ta dessa prover (eller kanske göra det under arbetets gång). Vi kommer även att samla in mera data på dessa givare, både 1 gång men även konsekutiva data. Det kan tänkas att projektet kan ”svälla” då denna typ av data är sällsynta och vi kommer att ta tillfället i akt att när vi nu måste ta prover på många givare, försöka att få svar på andra frågeställningar. Här kommer Studenten / erna att vara delaktiga. Således kan projektet delas. Planen är att för engångs provet ha c:a 200 givare och för en tidsstudie använda 20 givare (10 män 10 kvinnor) med provtagning 4-5 ggr. Betydelse Frågorna som kommer att ställas är mycket relevanta för hur vi tar hand om våra givare för att de inte skall få problem själva och för att blodkomponenterna håller så bra kvalitet som möjligt. Handledare Per-Olof Forsberg, Med ansvarig Transfusionsmedicin Laila Arnqvist, Dirftsledare, Claratappen samt metodansvarig för komponenter. Driftsansvarig Klinisk kemi Mer info kan fås av Per-Olof Forsberg Tfn 070-6556900 E-post: [email protected] 9. Studier av cyklooxygenas uttryck och prostaglandin frisättning I olika typer av makrofager Naz Huhideen Prostaglandiner spelar en viktig roll i olika inflammatoriska processer men det finns också klara indikationer på att de är involverade i tumörprogression. Prostaglandin frisättning kommer att analyseras i medier från M1 och M2 fenotyper av makrofager med ELISA. Cyklooxygenas 1 och 2 kommer att undersökas med westernblotting Handledare Jonny Wijkander 10. Studier av effekter av kemokinen CXCL9 på proliferationen av olika typer av cancer cell linjer Frida Niklasson Tumörvävnader är mycket ofta infilterade av marofager som påverkar proliferationen, metastaseringen av cancer cellerna samt kärlnybildning i tumören. Vi har resultat som visar på att konditionerade medier från vissa typer av makrofager påverkar proliferatioen av cancer cell linjer. Vad för molekyl/molekyler som påverkar cancer cellerna proliferation har vi ännu inte indetiferat. Cancer cell linjerna HT29 (colon cancer), H69 (lung cancer), BEAS (lung cancer) och A549 (virustransformerad lungepitel) kommer att behandlas med CXCL9 med eller utan konditionerade medier från makrofager och effekter på proliferationen att bestämmas med MTT assay och räkning av celler i Burkerkammare. Handledare Jonny Wijkander 11. Konstruktion av ett immunoenzym för behandling av carcinom. Anas Gabro Den rekombinanata antikroppen scFv TS1-218 binder till carcinom. Den ska fuseras med enzymet glukuronidas (GUS) med bibehållen specificitet och enzymaktivitet. Detta nya protein skulle kunna leverera GUS specifikt till ett carcinom där GUS kan omvandla en relativt ofarlig prodrog till aktiv drog lokalt inne i tumören. Projektet innefattar PCR, restriktionsklyvningar, ligering med T4-ligas samt uttryck av det nya rekombinanta proteiner i E Coli Handledare Patrik Holm 12. Kan inflammatoriska celler som makrofager stimulera de normala epitelcellerna BEAS-2B att producera mRNA som kodar för proteiner involverade i transformation och tumörcellsbildning? Rebecka Reza BEAS-2B cellerna är normala virustransformerade epitelceller som är väldigt användbara då man vill studera tex hur ett ämne påverkar carcinogenes. BEAS-2B kommer att behandlas med konditionerat medium från olika typer av makrofager och vi kommer att screena effekten av denna behandling med arrayen Human Cancer PathwayFinder™ RT² Profiler™ som gör det möjligt att mäta uttrycket av 84 olika mRNA som är inblandade i celltrasformation och tumörbildning. Efter screeningen i arrayen kommer vi att fokusera på några av generna och analysera dessa i mer detalj. Vi kan även komma att använda immunocytokemi och westernblott för att analysera proteinuttrycket. Handledare Ann Erlandsson 13 Kan inflammatoriska celler som makrofager stimulera den småcelliga lungcancer cell linjen NCI-H69 att producera mRNA som kodar för proteiner involverade i metastasering? Frida Granroth Småcellig lung cancer (SCLC) är en aggressiv tumör sjukdom som ofta metastaserar. Cell linjen NCI-H69 är isolerad från en patients lunga, cellerna växer i suspension i flytande aggregat men behåller sin småcelliga carcinom morfologi. NCI-H69 cell linjen kommer att behandlas med konditioneradt medium från olika typer av makrofager och vi kommer att screena effekten av denna behandling med The Human Tumor Metastasis RT² Profiler™ array som gör det möjligt att mäta uttrycket av 84 olika mRNA som är inblandade i celladhesion, modullering av extracellulärt matrix, cellcykel reglering, celltillväxt, apoptos och metastasering. Efter screeningen i arrayen kommer vi att fokusera på några av generna och analysera dessa i mer detalj. Vi kan även komma att använda immunocytokemi och westernblott för att analysera proteinuttrycket. Handledare Ann Erlandsson 14.Påverkas olika typer av makrofager olika av lågdosstrålning (0,5-7,5Gy) och vad blir effekten då man lågdosstrålar olika makrofager odlade i co-kultur med olika typer av tumörceller? Ann-Karin Olsson Strålning kan aktivera makrofager att inducera en kraftig inflammatorisk respons i vävnaden som kan leda till negativa sidoeffekter som exempelvis pneumoni och fibros. Fler studier måste göras för att ta reda på om olika typer av makrofager påverkas olika av strålning. Fler studier måste också göras för att se hur co-kulturer av olika typer av makrofager och tumorceller påverkas av strålning. Effekten av strålningen kommer att studeras genom att beräkna antalet levande och döda celler, genom immunocytokemi, LDH assay och eventuellt kvantifiering av valda mRNA yttryck. Handledare Ann Erlandsson 15. Immuncytokemisk analys av markörer för olika typer av human makrofager. Leif Larsson Projektet omfattar att sätta upp metod för immuncytokemisk analys av CD80 och CD163 som markörer för M1 respektive M2 fenotypen av makrofager. En jämförelse med immuncytokemisk analys i Dakos Autostainer Link 48 instrument kommer att göras. Handledare. Jonny Wijkander (Ann Erlandsson) Projekt Örebro Kim Persson Projekt Falun Marie Nilsson