Medicinsk service
Gäller from
Metodbeskrivning
Godkänd av:
2013-09-17
Revision
04
Sida
1(3)
P-ACTH på Cobas (NPU01785)
Gäller för
SKÅNE
Klinisk kemi
P-ACTH på Cobas (NPU01785)
Bakgrund, indikation och tolkning
Adrenokortikotropt hormon (ACTH) är ett peptidhormon bestående av 39 aminosyror med
molekylmassan 4,5 kDa. Det bildas och upplagras i hypofysens ACTH/MSH-celler som en
prekursor (proopiomelakortin) med en molekylmassa på 31 kDa. Frisättningen av ACTH styrs
av hypotalamiska peptidhormoner fr.a. av cortikotropin releasing factor (CRF) men även av
vasopressin (AVP) och frisättningen influeras därvid av plasma-kortisolkoncentrationen,
stress och dygnsrytm. Den biologiska aktiviteten är knuten till aminosyrorna 1-24. ACTH styr
binjurebarkens syntes och sekretionen av steroider (fr.a. kortisol) och har också en trofisk
effekt på denna. Därutöver utövar ACTH en del extraadrenala effekter som t.ex. stimulering
av lipolys i fettväv, upptag av glukos och aminosyror i skelettmuskulatur samt frisättning av
insulin från pankreas och tillväxthormon från hypofysen. ACTH har en halveringstid i plasma
på 5-10 min. Mätning av ACTH utföres fr.a. i samband med utredning av binjurebarkfunktionen samt vid misstanke på ACTH-producerande tumör [1].
Förhöjd koncentration av ACTH i plasma förekommer vid primär binjurebarksinsufficiens
(Addisons sjukdom), ACTH-producerande hypofysadenom (Morbus Cushing) och vid ektopisk ACTH-produktion vid maligna sjukdomar tex bronkialcancer. Sänkta eller ej mätbara
koncentrationer av ACTH ses vid hypofys-/hypotalamusskador, steroidproducerande binjurebarksadenom eller carcinom samt vid steroidbehandling. Störningar i dygnsrytmen för ACTH
i plasma ses vid Mb Cushing, endogen depression och hjärtinsufficiens [1, 2].
Analysprincip
Enstegs immunometrisk sandwich metod med ElectroChemiLuminiscenceImmunoassay
(ECLI) detektionsteknik baserad på Reuthenium (Ru) derivat.
ACTH i provet (antigen–Ag), mus monoklonala anti-ACTH-antikroppar konjugerade med
biotin (konjugat, Biotin-MAk1) och mus monoklonala anti-ACTH-antikroppar märkta med
Ru (PAk2-Ru) bildar ett sandwich komplex (Biotin-MAk1---Ag---PAk2–Ru ).
Därefter tillsätts paramagnetiska partiklar klädda med Streptavidin.
Sandwich komplexet binder till paramagnetiska partiklar (fast fas) genom Biotin- Streptavidin
interaktion varvid bildas en formation Streptavidin---Biotin-MAk1---Ag---PAk2–Ru.
Antigen- antikroppskomplexet detekteras genom en elektrokemisk reaktion, vilken resulterar i
emission av ljus (elektrokemiluminiscens), vars intensitet mäts. Ljusintensiteten är direkt proportionell mot ACTH-koncentrationen i provet.
Utarbetad av
Dokumentförvaltare
Dokument id
C-4961
Original lagras elektroniskt! Användaren ansvarar för att gällande revision används.
Medicinsk service
Gäller from
Metodbeskrivning
Godkänd av:
2013-09-17
Revision
04
Sida
2(3)
P-ACTH på Cobas (NPU01785)
Gäller för
SKÅNE
Klinisk kemi
ACTH
in the sample (Ag)
Biotinylated
Ruthenylated
monoclonal
monoclonal
antibody against
antibody against
ACTH (MAk1)
ACTH (MAk2)
Referensintervall
1,5 – 14 pmol/L morgonvärde (7.00-10.00) [2].
Metodkarakteristika
Interferenser och felkällor
Hemolys (Hb < 4 g/L, H-index < 400), lipemi (Intralipid < 1500 mg/dL, L-index < 1 500),
bilirubinemi (bilirubin < 428 µmol/L, I-index < 25) eller biotin <246 nmol/L påverkar ej analysen [4]. Prov skall ej tas på patienter som behandlas med höga biotindoser (> 5 mg/dag)
förrän > 8 timmar efter senaste dos [2]. Höga halter(> 1100 pmol/L) av ACTH-fragment
(ACTH 1-17, ACTH 1-24 m. fl.) kan interferera och ge upphov till falskt sänkta mätvärden
för ACTH [2]. Ingen antigenexcess för värden < 200 000 pmol/L och ingen interferens observerades från reumatoida faktorer < 400 IU/mL [2].
Mätområde
Mätområde: 0,22 – 440 pmol/L [2].
Detektionsgräns
Detektionsgräns: 0,22 pmol/L [2].
Utarbetad av
Dokumentförvaltare
Dokument id
C-4961
Original lagras elektroniskt! Användaren ansvarar för att gällande revision används.
Medicinsk service
Gäller from
Metodbeskrivning
Godkänd av:
2013-09-17
Revision
04
Sida
3(3)
P-ACTH på Cobas (NPU01785)
Gäller för
SKÅNE
Klinisk kemi
Mätosäkerhet
Mätosäkerheten baseras på långtidsuppföljning av kontrollresultat under perioden april 2012
till september 2012.
Nivå
pmol/L
10
209
Imprecision
(CV%)
5
4
Spårbarhet
Kalibratorvärdena är spårbara till syntetiskt ACTH 1-39, framställt av Roche [2].
Övrig information
Metoden är ackrediterad.
Referenser
1. Nilsson-Ehle P, red. Laurells Klinisk kemi i praktisk medicin. Lund: Studentlitteratur
2003, 8:e upplagan sid 428-429.
2. Roche produktblad: ACTH Cobas, REF 03255751 190, 2011-04, V6
3. Operator´s Manual: cobas 6000/8000, Roche.
4. Egna studier.
5. Instrumenthandledning cobas 6000/8000, aktuell version.
6. Roche produktblad: ProCell M.
7. Roche produktblad: CleanCell M 2010-08, V6.
8. Roche produktblad: PreClean M 2010-08, V8.
Utarbetad av
Dokumentförvaltare
Dokument id
C-4961
Original lagras elektroniskt! Användaren ansvarar för att gällande revision används.
