Identifiering av bassekvensen hos DNA i en hormongen hos två könsbytande fiskar Erik Torneheim Ett fåtal ryggradsdjur har förmågan att en gång i sitt liv byta kön. Två sådana ryggradsdjur är fiskarna berggylta och anemonfisk. Den första av dessa fiskarter lever i harem med en hanne och flera honor. Om hannen försvinner så kan den hona som har högst social status byta kön till hane. Berggyltan återfinns utefter den svenska västkusten. Anemonfisken kan på motsvarande sätt byta kön från hane till hona. Denna fiskart finns i havet runt Indonesien. Dessa båda fiskarter, liksom även människan, producerar i hjärnan ett hormon benämnt gonadotropinfrisläppande hormon (GnRH, eng. gonadotropin releasing hormone) som har en hormonkontrollerande funktion. De ovan nämnda fiskarna har tre gener som bestämmer utseendet hos tre olika former av detta hormon, medan människan har två gener som bestämmer utseendet på två hormonformer. Av dessa proteiner så vet man att ett kontrollerar produktionen av gonadotropin, som är ett hormon som styr de inre könsorganens utveckling (könskörtlarna). Funktionen hos de andra proteinformerna är okänd. I tidigare undersökningar har man visat att GnRH-hormonet, som styr frisläppandet av gonadotropin, produceras av dubbelt så många celler i hjärnan hos bergyltans och anemonfiskens hanar jämfört med hos honorna. Detta faktum kan tyda på att GnRH är inblandat i könsbytesprocessen, då man också vet att det enda sättet som ett beteende (i detta fall social interaktion) kan påverka könskörtlarna på är via hjärnan, där just GnRH tillverkas. Det första målet med detta projekt var att ta reda på bassekvenserna i DNA hos de tre generna som kodar för de tre proteinerna som kallas GnRH hos båda fiskarterna ovan, samt hos en tredje icke könsbytande art (skärsnultra). Det andra målet var att visa var i hjärnan hos dessa fiskarter dessa gener översätts till proteiner. Bassekvensundersökningarna gav till en början resultat men i ett av undersökningsstegen så misslyckades laborationen och därpå följande steg gav alltså ej resultat. Detta ledde till att DNA-sekvenserna ej kunde fastställas för GnRH –genformerna. Med hjälp av s.k. in situ hybridisering kunde jag visa att form 3 -GnRHprotein tillverkades i storhjärnan (telencephalon) hos anemonfisken, medan GnRH form 2 itoillverkades i opiskt tectum (i mellanhjärnan). Form 1 kunde ej undersökas p.g.a. att gensekvensen ej var bestämd. Berggylta (Labrus berggylta) Anemonfisk (Amphiprion melanopus) Examensarbete i biologi,20p,HT-1999 Institutionen för Zoologisk utvecklingsbiologi, Uppsala Universitet Handledare: Svante Winberg och Ulf Elofsson