AMH
och Inhibin B
Equalis användarmöte i Endokrinologi 13-14 september 2010
Charlotte Becker
Labmedicin Skåne
Klinisk kemi
Anti-Mülleriskt Hormon (AMH)
eller Müllerian Inhibiting Substance (MIS)
och Inhibin B
• Tillhör Transforming growthfactor -ß
(TGF-ß) familjen
• Testiklarnas Sertoliceller
• Ovariernas Granulosaceller
Inhibiner
• Inhibin A och B i ovariernas granulosaceller
• Inhibin B i testiklarnas sertoliceller
• Activin stimulerar FSH utsöndringen - inhibinerna
förhindrar denna stimulering
Reglering hos män
•
LH stimulerar leydigcellerna till
produktion av testosteron.
•
FSH stimulerar sertolicellerna
–
–
–
•
produktion av Inhibin
konversion av testosteron till E2
spermiogenes!
Inhibin B utövar negativ
feedback på FSH produktionen
Seminars in reproductive medicine , volume 22, number 3; 177-185. 2004
Reglering hos kvinnor
• Cykelvariation
• Inhibin B syntetiseras av små tillväxande folliklar - (follikulär
fasen) - peak vid ovulation - negativ feedback på FSH
• Inhibin A syntetiseras av den dominanta follikeln samt corpus
luteum- (luteala fasen)
• Övrig varation
• Graviditet - Inhibin A - peak v 8-10, minst v 20, därefter stigning
igen
•
Menopaus- Minskad mängd tillväxande folliklar – minskad
Inhibin B syntes –stigande FSH.
Pierik et al, JCEM 83:3110-3114, 1998
Indikationer för Inhibin B
• Män: Markör för spermatogenesen (antal och
funktion av sertoliceller)
• Kvinnor: Antal kvarvarande oocyter i ovariet
• PCOS
• Tumörmarkör- Granulosacellstumörer
• (Inhibin A - 2:a trimesterscreening)
Nivåer av Inhibin B
• Män 50 - 330 ng/L
• Lite lägre prepubertalt
• Lite högre 1-2 års ålder
• Kvinnor 20 - 290 ng/L follikulär fas
• Lite lägre lutealt och prepubertalt
• Omätbart postmenopausalt
ELISA metoder för Inhibin B
• Oxford Brooks Innovation (OBI)
• DSL
• Inhibin B Gen II från Beckman Coulter
Metodjämförelser Inhibin B
DSL vs. OBI
(Toni Ertls all results )
1200
y = 0,7323x - 10,869
2
R = 0,9614
1000
800
DSL
600
400
200
0
0
200
400
600
-200
OBI
800
1000
1200
Development of a second generation
Inhibin B ELISA
Kaira B, Kumar A et al
J Immunological Methods 2010
Ahead of publishing
Inhibin B Gen II , Beckman Coulter
• Ingen förbehandling
• Korrelationer utmärkta (r=99-97)
• God överenstämmelse med OBI
• Ca 50% högre nivåer än DSL
• Funktionell känslighet 4,8 ng/L
AMH (anti-mülleriskt hormon)
• MIH / MIS (mülleriskt inhiberande
hormon/substans)
• Jost beskrev 1947, Behringer isolerade 1994
•
•
•
•
Kromosom 19
Glykoprotein
Cirkulerar som dimer
AMH-receptor
R. Rey et al. /Molecular and Cellular Endocrinology 211 (2003) 21–31
AMH -Pojkar
• Bildas i testiklarnas sertolicellerna från och med
gestationsvecka 8 hos pojkfoster - mycket höga
nivåer
• Fortsatt högt första året –sjunker successivt till
puberteten
• Sällsynt: defekt AMH eller receptormutation- XY
med persisterande inre kvinnliga genitalia
AMH - Flickor
• Bildas i ovariernas granulosaceller fr v 36
• Omätbart lågt första månaden
• Stiger successivt till puberteten
• Sjunker därefter successivt
• Omätbart efter menopaus
AMH:
Inhiberar rekrytering av primordialfolliklar
Inhiberar FSH beroende tillväxt och selektion av tidiga folliklar
Follikeltillväxt
Human Reproduction Update Vol 12, 685-718, 2006, Broekmans et al
Ovariell reserv
Behov av icke invasiv bedömning av den ovariella reserven
AMH varierar endast lite med menstruationscykeln
Korrelation till ålder
Korrelation till antalet antralfolliklar
Prediktion av dåligt svar på ovariell stimulering vid IVF
Möjliga indikationer
• Könsbestämning i neonatalperioden
• Kryptorchidism vs anorchidism
•
•
•
•
Mått på kvinnans ovariella ålder
Prognostiskt inför IVF
Bedömning av risk för överstimulering
Bedömning av PCOS- högre nivåer pga många små
antralfolliklar
• Bedömning av ovarierna före/efter cytostatikabeh.
• Vid ovarialcancer - Uppföljningsmarkör vid
granulosacellstumörer
2010:Två ELISA metoder blir en
• DSL (England)
+
• Immunotech (Frankrike)
=
• Beckman Coulter (USA)
DSL vs Immunotech
y = 0,7612x + 0,1451
R2 = 0,9801
Mätningar hos frisk labpersonal
Premenopausala
Postmenopausala
4/30 < 2 pmol/L
30/30 < 2 pmol/L
Immunotech vs AMH Gen II från Beckman Coulter
AMH
Gen II vs Immunotech
samples from regular run
60
y = 1,0143x - 3,2494
50
AMH GenII
R2 = 0,9656
40
30
20
10
0
0
10
20
30
Immunotech
40
50
60
Analytisk prestanda
Mätområde: 0 - 160 pmol/L
Analytisk känslighet: 0,6 pmol/L
1 ng/mL = 7,14 pmol/L
Förväntade värden
ålder (Medel)
Median (pmol/L)
2,5 - 97.5 percentil (pmol/L)
Män
38
40 10 - 150
Kvinnor
30
17 0 - 90
Kvinnor
71
0 0-0
Pojkar
5
Flickor
5
400 30 - 1100
10 0 - 60
Development of a second generation antiMüllerian hormone ELISA
Kumar A, Kaira B et al
J Immunological Methods 2010
Ahead of publishing
Inhibin B i Malmö
2000
1800
1600
1400
1200
1000
Serie1
800
600
400
200
0
År 2001
År 2002
År 2003
År 2004
År 2005
År 2006
År 2007
År 2008
år 2009
AMH i Malmö maj 2009-2010
500
450
400
350
300
250
Serie1
200
150
100
50
0
maj
juni
juli
augusti
september
oktober
november december
januari
februari
mars
april
maj
