[SE]
Biotestcell-P1, -P2
Steg 3: Indirekt antiglobulintest
a) Tvätta erytrocyterna 3 ggr med isoton koksaltlösning. Dekantera därefter
den kompletta supernatanten.
b) Tillsätt 2 droppar anti-humant-globulin till sedimentet och blanda.
c) Centrifugera 2 minuter vid 150-200 x g eller 20 sekunder vid
800-1000 x g.
d) Skaka försiktigt upp innehållet och kontrollera med avseende på
agglutination.
Testerytrocyter för påvisning av erytrocytära antikroppar
[REF]
816012
[VOL]
2 x 10 ml
[PRES] Konserveringsmedel: 0,01 % Neomycinsulfat, 0,033 % Kloramfenikol, 5 ppm Amphotericin B
[IVD] Reagens för in vitro-diagnostik
Testen får endast utföras av utbildad laboratoriepersonal. De symboler som
används överensstämmer med standarden EN 980. Symboler som inte ingår
i EN 980 förklaras i texten.
Avsedd användning
Påvisning av antikroppar mot erytrocytantigener (antikroppstest) ingår i
blodgruppsbestämning och förenlighetsprov. Biotestcell-P1, -P2 används för
påvisning av irreguljära antikroppar i rörtest eller i fastfas-testen Solidscreen
II och lämpar sig för alla rutinundersökningar. Användning av dessa Reagent
Red Blood Cells med Solidscreen II på TANGO optimo och TANGO infinity är
inte godkänd av Health Canada (den kanadensiska hälsovårdsmyndigheten).
Metodbeskrivning
Metoden utgörs av en hemagglutinationstest, alternativt fastfas-test. De
antigener som befinner sig på testerytrocyterna reagerar antingen direkt eller
efter tillsättning av anti-humant-globulin med de korresponderande
antikropparna i det serum eller den plasma som skall undersökas. Om testen
utförs enligt rörmetoden sker en agglutinationsreaktion. I fastfas-testet
Solidscreen II bildas en cellmatta i brunnarna på mikrotestplattan.
Reagens
Biotestcell-P1, -P2 är testerytrocyter med polyvalenta antigener från två olika
blodgivare i separata rör för påvisning av erytrocytära antikroppar.
Testcellerna har följande egenskaper: D, C, Cw, E, c, e, K, k, Kpb, Fya, Fyb,
Lub, Jka, Jkb, Jsb, M, N, S, s, Lea, Leb, P1, Xga, Coa. Det exakta
antigenmönstret för varje lot framgår av bifogad tabell. Biotestcell-P1, -P2
lämpar sig även för användning tillsammans med enzymer (papain, ficin,
bromelin, trypsin osv) eller med supplement (albumin, LISS). Livslängden för
enzymbehandlade testerytrocyter framgår av bruksanvisningen för respektive
enzym som har använts. Biotestcell-P1, -P2 är suspenderade ca 3 %-igt i
modifierad alsevers-lösning och kan omedelbart användas efter försiktig
resuspendering.
Reagenser och material som erfordras men inte medföljer
3-stegs rörtest
•
Pipetter (droppvolym 40-50 μl)
•
Isoton koksaltlösning
•
Anti-humant globulin (t ex Anti-Human-Globulin Color [REF] 804 120,
804 115 / 804 130 eller Anti-Human-Globulin Solidscreen II [REF] 806
515)
•
IgG-sensibiliserade erytrocyter (t ex Coombscell-E [REF] 816 030)
•
Glasrör
•
Laboratoriecentrifug
Solidscreen II
För ytterligare information se även användarinformation för Solidscreen II
Strip [REF] 806 521.
Provmaterial
Använd färskt serum eller plasma. För påvisning av komplementberoende
antikroppar får inte plasma användas, eftersom antikoagulantia inhiberar
komplement. Endast serum eller EDTA-plasma är lämpligt för testning med
TANGO optimo och TANGO infinity.
Testutförande
Resuspendera testerytrocyterna före användning och se till att de har
rumstemperatur.
3-stegs rörtest
När enzym eller supplement (albumin eller LISS)
instruktionerna i motsvarande bruksanvisning följas.
används
skall
Steg 1: Omedelbar centrifugeringstest
a) Placera 2 droppar av ovan beskrivet provmaterial i vart och ett av de
märkta rören. En autokontroll skall inkluderas. Erytrocyterna för
autokontrollen skall tvättas två gånger med isoton koksaltlösning (NaCl).
b) Tillsätt 1 droppe av testerytrocyterna till vart och ett av de
korresponderande rören och blanda.
c) Centrifugera 2 minuter vid 150-200 x g eller 20 sekunder vid
800-1000 x g.
d) Kontrollera med avseende på hemolys och skaka upp försiktigt för att
avläsa agglutinationens reaktionsstyrka.
Steg 2: Centrifugeringstest efter värmeinkubation
a) Inkubera 30-60 minuter vid 37 °C.
b) Centrifugera 2 minuter vid 150-200 x g eller 20 sekunder vid
800-1000 x g
c) Kontrollera med avseende på hemolys och skaka upp försiktigt för att
avläsa agglutinationens reaktionsstyrka.
MBio-Rad Medical Diagnostics GmbH
Industriestr. 1, D-63303 Dreieich, Germany
Tel.: +49-6103-3130-0, Fax: +49-6103-3130-724
www.bio-rad.com, [email protected]
Solidscreen II
Se den utförliga bruksanvisningen till Solidscreen II Strip ([REF] 806 521)
angående exakt testutförande och information om hur resultatet skall tolkas.
Resultatens tolkning
En positiv reaktion med Biotestcell-P1 och/eller Biotestcell-P2 indikerar att
serumet/plasman troligen innehåller antikroppar mot ett av de listade
antigenerna. En identifiering kan göras med Biotestcell-I 8/Biotestcell-I 11.
Negativa resultat i antiglobulintesten skall kontrolleras med IgGsensibiliserade celler i en rörtest. Tillsätt 1 droppe IgG-klädda erytrocyter,
blanda och centrifugera 2 minuter vid 150-200 x g eller 20 sekunder vid 8001000 x g. Reaktion positiv: Den negativa reaktionen i den indirekta
antiglobulintesten gäller, reaktivt anti-humant-globulin förekommer. Reaktion
negativ: Ett tekniskt fel har gjorts och testen måste upprepas. Negativa
reaktioner i 3-stegs-testen liksom efterföljande positiv reaktion med IgGsensibiliserade celler betyder att serumet inte innehåller några påvisbara
antikroppar mot en av de listade antigenerna (bifogat antigenmönster).
Utvärdering av reaktionens styrka sker i enlighet med rekommendationerna i
Technical Manual (1):
Reaktionens styrka Agglutinationsbild
4+
Ett stort agglutina
3+
Flera stora agglutinat
2+
Mellanstora agglutinat, klar bakgrund
1+
Små agglutinat, oklar bakgrund
+/Knappt synlig agglutination, oklar bakgrund
Ingen agglutination
Hållbarhet och förvaring
Efter det att flaskan öppnats är produkten hållbar fram till angivet bäst-föredatum, förutsatt att den förvaras vid 2...8 °C. Eftersom cellernas antigenitet
kan avta, bör cellerna inte användas efter bäst-före-datum. Information om
användning av reagenser på TANGO optimo eller TANGO infinity finns i
respektive användarhandbok. Använd inte produkten om flaskorna är
skadade.
Funktionsegenskaper och begränsningar av metoden
Eftersom en del antikroppar uppvisar en doseffekt, skall hänsyn tas till
antigentätheten på testcellerna (arvsanlag av homozygot eller heterozygot typ
för allelen) när resultatet utvärderas. Ett heterozygot uttryck av antigenet kan
beroende på testmetoden leda till att svaga antikroppar inte registreras. I
ytterst sällsynta fall kan HLA-antigener i produkten leda till falskt positiva
reaktioner.
Reaktiviteten kan avta under hållbarhetstiden. Avtagandet av reaktiviteten är
delvis beroende på individuella givar egenskaper som ej kan kontrolleras eller
förutses av producenten.
Kontakta Bio-Rad-Service (tel +49 6103–3130-611) om orsakerna till
tvivelaktiga testresultat inte kan klarläggas.
Varningar och försiktighetsåtgärder
•
En grumling, hemolys eller andra synliga förändringar av produkten kan
vara ett tecken på bakteriell förorening. Grumlig lösning får ej
användas. ◄.
•
Manuella arbetstekniker skall tillämpas i enlighet med de anvisningar
som ges av tillverkaren. Användaren ansvarar för alla avvikelser från
tillverkarens anvisningar.
•
Biotestcell-P1, -P2 lämpar sig för användning i Solidscreen II-testen och
därmed
även
för
användning
i
det
helautomatiska
blodgrupperingssystemet TANGO optimo och TANGO infinity.
Användning i andra automatiska system skall valideras av användaren
själv och under eget ansvar.
•
Använt testmaterial skall betraktas som farligt avfall. Information om
hantering av använda reagens framgår av säkerhetsdatabladet.
•
Allt material av humant ursprung som använts i denna produkt har
testats ej reaktivt för HbsAg, anti-HCV och anti-HIV-1/-2. Alla produkter
av humant ursprung skall ändå betraktas som potentiella överförare av
hepatit, HIV och andra infektiösa sjukdomar. Det rekommenderas att
vidta lämpliga säkerhetsåtgärder.
•
Produkten innehåller naturligt gummilatex som kan orsaka allergiska
reaktioner.
•
Interna kvalitetskontroller skall utföras regelbundet enligt nationella
riktlinjer.
Biotestcell-P1, -P2 tillverkas var 4:e vecka.
References
(1) Technical Manual, 17th edition, Sect. 1, American Association of Blood
Banks
Nyckel: Stryk under = Ytterligare eller signifikant förändring ◄= Borttagande av text
| 0197
186178/29 – 07/2016
