Patientnära analyser Dokumenttyp: Metodbeskrivning Dokumentnamn: HbA1c, DCA Vantage Sida 1 av 3 MEDICINSK BAKGRUND I de röda blodkropparna finns hemoglobinet HbA1 med flera varianter, fr.a. HbA1c. Denna är glykerad genom kovalent bindning med glukosmolekyler. Omfattningen av denna glykosyle-ring är proportionell mot den genomsnittliga koncentrationen glukos i blodet upp till åtta veckor före provtagningen. HbA1c används vid metabol kontroll av diabetes. Det finns en stark korrelation mellan HbA1C -nivå och utveckling av diabetiska sen komplikationer. God kontroll motsvaras av HbA1c < 52 mmol/mol (genomsnittlig P-glukos < 8 mmol/L) Litteraturreferenser nr 1 och 2. INSTRUMENT OCH MÄTPRINCIP Leverantör Siemens DCA Vantage Analyzer Instrumentet består av en filterfotometer med en referens och en provkanal. Ljuset alstras av en halogenlampa och fortsätter via en bländare och ett linssystem vars uppgift är att skapa ett parallellt ljusknippe, vidare genom ett filter, 531 nm. Detektorn består av två fotodioder som tar upp ljuset från referenskanalen, genom luft, och provkanalen, genom provet. Kassetten sitter i ett kassett fack med en analystemperatur av 38,9°C. HbA1C från provet binds till antikroppar på latexpartiklarna så att agglutination förhindras. I brist på HbA1C binds agglutination till antikropparna istället. Fotometern mäter ljusspridningen vid 531 nm. Vid en liten mängd HbA1C uppträder agglutination och resultatet blir stor ljusspridning (hög absorbans). Med stigande mängd HbA1C minskar agglutinationen och därmed ljusspridningen (lägre absorbans). Andelen HbA1C anges som mmol/mol av den totala mängden hemoglobin. PROVTAGNING OCH PROVHANTERING Venblod i rör med tillsats av EDTA, alternativt kapillärblod (mikrotainer med EDTA tillsats). Hållbart 7 dagar i kyl. Upprättat av Britt-Marie Huuva Gustafsson Ella Björnström Granskad av Godkänt av Giltigt fr o m Dok nr-vers Patientnära analyser Dokumenttyp: Metodbeskrivning Dokumentnamn: HbA1c, DCA Vantage Sida 2 av 3 REAGENS Reagensen finns i förfyllda kyvetter och varje kassett består av fyra delar: 1. Buffertlösning 600 µL 1,25M litiumtiocyanat (LISCN) 200 mM Glycin NaOH, pH 9,0 2. Oxidant 10 µL, torkad 15 mg/mL kaliumferrycyanid 21 % icke-reaktiva ingredienser 6% bovint serumalbumin (BSA) 3. Antikroppslatex 10 µL, torkad HbA1c-specifika antikroppar från mus, absorberade på latexpartiklar. 0,75 % BSA 0,25 % gelatinhydrolysate NaOH, pH 9,3 16 % icke-reaktiva ingredienser 4. Agglutinator 10 µL, torkad 0,005 % poly-polymer kovalentbundna till HbA1c-hapten 20 mM natriumcitratbuffert, pH 4,0 0,1 % BSA 1% icke-reaktiva ingredienser KALIBRERING Dra ett kalibreringskort genom streckkodsläsaren, så avläses kortet och systemet kalibreras automatiskt. INTERN KONTROLL HbA1c-kontrollkit, normal och abnormal. För utförligare information, se handhavandebeskrivning. EXTERN KONTROLL Equalis HbA1c. Se Equalis HbA1c. UTFÖRANDE AV ANALYS Se handhavandebeskrivning. MÄTOMRÅDE 4 - 130 mmol/mol Upprättat av Britt-Marie Huuva Gustafsson Ella Björnström Granskad av Godkänt av Giltigt fr o m Dok nr-vers Patientnära analyser Dokumenttyp: Metodbeskrivning Dokumentnamn: HbA1c, DCA Vantage Sida 3 av 3 REFERENSINTERVALL <50 år: 27 – 42 mmol/mol ≥50 år: 31 – 46 mmol/mol SVARSRAPPORTERING Analyssvaren anges med heltal. Låga svar anges < 4 mmol/mol Höga svar anges >130 mmol/mol INTERFERENS OCH FELKÄLLOR Bilirubin >340 µmol/L Triglycerider >15,0 mmol/L LITTERATURREFERENSER 1. Peter Nilsson-Ehle (red). Klinisk kemi i praktisk medicin. 8:e upplagan. Studentlitteratur. 2003:326-7. 2. Svensk förening för diabetologi: Riktlinjer för behandling av diabetes mellitus 2005. Diabetolognytt 2005-01. www.diabetolognytt.se 3. DCA Vantage Analyzer Användarhandbok. Upprättat av Britt-Marie Huuva Gustafsson Ella Björnström Granskad av Godkänt av Giltigt fr o m Dok nr-vers