Monoclonal Mouse
Anti-Human
Cytokeratin 19
Clone RCK108
Kod M0888
Avsedd användning
Endast för diagnostisk användning in vitro.
Monoclonal Mouse Anti-Human Cytokeratin 19, Clone RCK108, är avsedd för användning i immunhistokemi.
Antikroppen märker epitelceller som uttrycker cytokeratin 19-protein, är ett användbart verktyg för identifiering
av tumörer i epitelceller och kan vara till hjälp vid identifiering av kolangiocellulära carcinom (1). Den kliniska
tolkningen av all färgning eller frånvaro av färgning måste kompletteras med morfologiska studier med
användning av lämpliga kontroller och måste utvärderas av en kvalificerad patolog inom ramen för patientens
kliniska anamnes och andra diagnostiska tester.
Sammanfattning
och förklaring
Cytokeratin 19 (CK 19) tillhör intermediära filament, vilka skapar ett cytoskelett i de flesta celler. I kontrast med
andra intermediära filament utgör cytokeratiner (CKs) en mycket komplex multigenfamilj av polypeptider med
molekylvikt från 40 till 68 kDa. 20 distinkta CK-polypeptider (2, 3) har upptäckts i olika humana epitelceller (4).
De kan delas upp i en sur (typ I) och en neutral-basisk (typ II) underfamilj. CK 19 tillhör den sura typen av
cytokeratiner och är ett cytokeratin med låg molekylvikt (40 kDa) som typiskt uttrycks i enkelt epitel, ytliga,
intermediära och basala celler i övergångsepitel, samt luminala, basala och myoepitelceller i komplext epitel.
CK 19 uttrycks normalt inte i flerskiktat skivepitel men kan finnas i modifierat skivepitel invaderat av lymfocyter,
samt basala celler i icke-keratiniserat flerskiktat skivepitel (2, 4, 5).
Tillhandahållet reagens
Monoklonal musantikropp levereras i flytande form som cellodlingssupernatant dialyserad mot 0,05 mol/L
Tris/HCl, pH 7,2 innehållande 15 mmol/L NaN3.
Klon: RCK108 (1). Isotyp: IgG1, kappa.
Mus-IgG-koncentration: Se etikett på vial.
Immunogen
Cytoskelett-preparat från human cancercellinje T24 (1) i urinblåsa.
Specificitet
I Western blotting av cytoskelett-preparat från T24- och RT4-cellinjer samt human skivcarcinomcellinje HaCaT,
märker antikroppen ett enkelt band av 40 kDa motsvarande CK 19 (1).
I immunhistokemi med olika humana vävnader märker antikroppen endast epitel medan celler som inte
innehåller CK 19, t. ex. hepatocyter, inte märks (1).
Försiktighetsåtgärder
1. För professionella användare.
2. Den här produkten innehåller natriumazid (NaN3), en mycket giftig kemikalie i ren form. Vid
produktkoncentrationer, även om de inte klassificeras som farliga, kan natriumazid reagera med bly- och
kopparrör och bilda högexplosiva metallazider. Vid kassering, spola med stora mängder vatten för att undvika
att metallazid ackumuleras i rören.
3. Korrekt hantering bör iakttas på samma sätt som för alla produkter från biologiska källor.
4. Använd lämplig skyddsutrustning för att undvika kontakt med ögon och hud.
5. Oanvänd lösning måste kasseras i enlighet med lokala och statliga föreskrifter.
Förvaring
Förvara vid 2-8 °C. Använd inte efter utgångsdatumet stämplat på vialen. Om reagenser förvaras under andra
förhållanden än vad som angivits måste användaren kontrollera förhållandena. Det finns inga självklara tecken
som visar instabilitet hos den här produkten. Därför bör positiva och negativa kontroller köras samtidigt med
patientprover. Om oväntad färgning upptäcks som inte kan förklaras av variationer i laboratorieutföranden och
ett problem med antikroppen misstänks, kontakta Dakos tekniska support.
Provförberedning
Paraffinsnitt: Antikroppen kan användas för märkning av paraffininbäddade vävnadssnitt fixerade i formalin.
Förbehandling av vävnader med värmeinducerad epitopåtervinning (HIER) krävs. För värmeinducerad
epitopåtervinning erhålls optimala resultat med Dako Target Retrieval Solution, pH 9,0, Kod S2368 eller Dako
Target Retrieval Solution, Kod S1700. Vävnadssnitten bör inte torka ut under behandling eller under den
följande immunhistokemiska färgningsproceduren.
Frysta snitt och cellpreparat: Antikroppen kan användas för märkning av frysta snitt (6).
Färgningsprocedur
(104672-002)
Spädning: Monoclonal Mouse Anti-Human Cytokeratin 19, Kod M0888, kan användas i spädningsintervallet
1:50-1:100 när den appliceras på formalinfixerade, paraffininbäddade snitt av humant bröstcarcinom med fem
minuters proteolytisk epitopåtervinning med Dako Proteinase K, Kod S3020 och 30 minuters inkubation i
rumstemperatur med primärantikroppen. Optimala förhållande kan variera beroende på prov och
förberedningsmetod och bör bestämmas av varje enskilt laboratorium. Den rekommenderade negativa
kontrollen är Dako Mouse IgG1, Kod X0931, spädd till samma mus-IgG-koncentration som primärantikroppen.
Om inte stabiliteten för den spädda antikroppen och den negativa kontrollen fastställts i den verkliga
färgningsproceduren rekommenderas det att dessa reagenser späds omedelbart före användning eller späds med
Dako Antibody Diluent, Kod S0809. Positiva och negativa kontroller bör köras samtidigt med patientprov.
M0888/SE/KIA/2010.12.20 s. 2/2
Dako Denmark A/S | Produktionsvej 42 | DK-2600 Glostrup | Denmark | Tel. +45 44 85 95 00 | Fax +45 44 85 95 95 | CVR No. 33 21 13 17
Visualisering: Dako LSAB™+/HRP kit, Kod K0679 och Dako EnVision™+ /HRP kits, Kod K4004 och K4006,
rekommenderas för formalinfixerade, paraffininbäddade snitt. Följ proceduren som medföljer valt
visualiseringskit.
Automatisering: Antikroppen passar bra för immunhistokemisk färgning med automatiserade plattformar som
Dako Autostainer.
Prestandaegenskaper
Celler märkta av antikroppen uppvisar ett cytoplasmiskt färgningsmönster.
Normala vävnader: Antikroppen märker basala lager av epidermis (spridd cellfärgning), Merkels celler,
talgkörtlar, externa rotskidor på hårfolliklar, sekretoriska spol- och luminala körtelgångsceller på ekkrina
svettkörtlar, icke-keratiniserat skivepitel i struphuvud, mesotel-, cylinderflimmerepitel- och basalceller i
bronkerna, alveolarceller, kubiska celler och basalceller i öronspottkörteln, duktala, acinära och basala celler i
mindre spottkörtlar, basala celler i matstrupen, sekretoriska och neuroendokrina celler i magsäcken, villus och
kryptaepitel i tunntarmen, epitel i tjocktarmen, duktalt och acinärt epitel i pankreas, epitel i gallgångar, epitel i
gallblåsan, cylinderceller i lobuli och körtelgångar i bröst, cylinder- och reservceller i endocervix, basala celler i
ektocervix, glandulärt endometrieepitel, placental cytotrofoblast, duktalt epitel, basala celler och sädesblåsor i
prostata, testiklar, epitel i Bowmans kapsel, capsule, proximal/distal tubuli och Henles slynga, övergångsepitel i
blåsan och follikelepitel i sköldkörteln (1).
Onormala vävnader: I maligna humana vävnader märkte antikroppen: 4/4 basalcells- och 3/3 väldifferentierat
keratiniserande skivcellscarcinom i epidermis, 1/1 keratoacantom, 1/3 och 1/2 väldifferentierat ickekeratiniserande skivcellscarcinom i läpp respektive tunga, 1/5 moderat och 1/1 dåligt differentierade
skivcellscarcinom i tunga, 1/1 papillom och 3/3 omvända papillom i nasofarynx, 1/3 väl, 3/4 moderat och 1/1
svagt differentierade laryngeala skivcellscarcinom, 7/7 skivcellscarcinom, 4/4 adenocarcinom, 1/1
adenoskivcarcinom och 5/5 småcells lungcarcinom i andningsvägarna, 5/5 pleomorfiska adenom, 3/3
mukoepidermoida carcinom och 1/1 acinärt cellcarcinom i öronspottkörteln, 6/6 skivcellscarcinom i matstrupen,
4/4 adenocarcinom, 2/2 carcinoider och 1/1 lymfnodmetastaser i magsäcken, 1/1 adenocarcinom i tunntarmen,
1/1 carcinoid i blindtarmen, 11/11 adenocarcinom, 2/2 lymfnodmetastaser och 1/1 carcinoid i tjocktarmen, 7/7
adenocarcinom i pankreas, 6/6 kolangiocellulära carcinom, 12/12 duktala carcinom, 4/4 lobulära carcinom, 2/2
lymfnodmetastaser och 4/4 kombinerade duktala/lobulära carcinom i bröstet, 2/2 Pagets sjukdom, 11/11
cystadenocarcinom, 2/2 klarcellscarcinom och 7/7 endometroidcarcinom i äggstock, 1/1 malign Brenner- tumör,
4/4 skivcellscarcinom, 12/12 adenocarcinom, 8/8 adenoskivcells- och 2/2 klarcellscarcinom i livmoderhals,
13/13 endometrioida carcinom och 3/3 adenoskivcellscarcinom i endometrium, 5/5 väl och 1/4 moderat
differentierade skivcellscarcinom i vulva, 8/8 adenocarcinom i prostata, 3/3 maligna teratom, 2/2 koriocarcinom,
6/6 njurcellscarcinom, 9/9 carcinom i urinblåsa, 8/8 carcinom i sköldkörtel, 1/1 kromofobiskt och 1/1 acidofilt
adenom i hypofysen, 4/4 astrocytom, 4/4 meningiom och 5/13 leiomyosarkom (1). I en annan studie märkte
antikroppen 5/8 medullära, 26/28 invasivt duktala, 4/4 invasivt lobulära, 5/5 mucinösa och 2/2 tubulära maligna
bröstlesioner, liksom 12/14 fibroadenom, 5/5 Phyllodes-tumörer, 3/3 tubulära adenom, 1/1 hamartom, 3/4
intraduktala papillom, 8/8 gynekomastier och 5/5 fibrocystiska förändringar i bröstet (7). I frysta snitt märkte
antikroppen 5/5 keratiniserande skivcellscarcinom, 11/11 icke-keratiniserande storcellscarcinom, 5/5
endocervikala adenocarcinom, 4/4 endometrioida carcinom och 3/3 adenoskivcellscarcinom i human
livmoderhals (6).
Referenser
1. Kwaspen FHL, Smedts FMM, Broos A, Bulten H, Debie WMH et al. Reproducible and highly sensitive
detection of the broad spectrum epithelial marker keratin 19 in routine cancer diagnosis. Histopathol
1997;31:503-16.
2. Moll R, Franke WW, Schiller DL, Geiger B, Krepler.R. The catalog of human cytokeratins: patterns of
expression in normal epithelia, tumors and cultured cells. Cell 1982:31:11-24.
3. Moll R, Löwe A, Laufer J, Franke WW. Cytokeratin 20 in human carcinomas. A new histodiagnostic marker
detected by monoclonal antibodies. Am J Pathol 1992:140:427-47.
4. Moll R. Cytokeratins as markers of differentiation in the diagnosis of epithelial tumors. Subcell Biochem
1998; 31: 205-62.
5. Lane EB,,Alexander CM. Use of keratin antibodies in tumor diagnosis. In: Osborn M, ed. Seminars in
Cancer Biology. Antibodies in Diagnosis and Therapy. Philadelphia: Saunders, 1990:165-79.
6. Smedts F, Ramaekers F, Troyanovsky S, Pruszczynski M, Link M, et al. Keratin expression in cervical
cancer. Am J Pathol 1992:141:497-511.
7. Dalal P, Shousha S. keratin 19 in paraffin sections of medullary carcinoma and other benign and malignant
breast lesions. Mod Pathol 1995:8:413-6.
Förklaring av symboler
(104672-002)
Katalognummer
Temperaturbegränsning
In vitro diagnostisk medicinsk
apparat
Batchkod
Läs instruktioner för
användning
Använd före
Tillverkare
M0888/SE/KIA/2010.12.20 s. 2/2
Dako Denmark A/S | Produktionsvej 42 | DK-2600 Glostrup | Denmark | Tel. +45 44 85 95 00 | Fax +45 44 85 95 95 | CVR No. 33 21 13 17
