Immunologisk metodik Utfällningsreaktioner Immunoassays Western blotting, dotblot Flödescytometri Immunhistokemi, immuncytokemi Immunologisk metodik Utfällningsreaktioner diffusioner * radial immunodiffusion * dubbel immundiffusion elforeser * counter current elfores * raketer * korsad immunoelfores 1 Immunologisk metodik Immunodiffusion radiell immunodiffusion dubbel immunodiff immunfixering Immunologisk metodik Immunoelektrofores counter current korsad immunelfores raketer 2 Immunologisk metodik Immunoassay begränsat antal antikroppsmolekyler märkt antigen och omärkt antigen tävlar om bindningsställen antikroppsöverskott ingen tävlan om bindningsställen Immunologisk metodik Immunoassay heterogen kompetitiv homogen icke kompetitiv one-site two-site 3 Immunologisk metodik Immunoassay direkt markör på specifik antikropp indirekt markör på sekundär antikropp Immunologisk metodik Kompetitiv immunoassay antikropp i botten antigen i botten 4 Immunologisk metodik Icke kompetitiv immunoassay one-site t.ex serologi Immunologisk metodik Icke kompetitiv immunoassay two-site t.ex hormonanalyser 5 Immunologisk metodik Immunoassay markörer radioaktivitet enzymer fluorescens chemiluminiscens partiklar ferritin biotin - avidin 125-I vanligast, T½ ca 60 dagar HRP, ALP mfl olika fluorokromer, ex FITC ex. akridinium estrar guld biotin alt avidin kopplad till enzym Immunologisk metodik Immunoassay olika support - några vanliga sephadex polystyren, latex nitrocellulosa PVDF - polyvinyliden difluorid 6 Immunologisk metodik Western blotting Immunologisk metodik Flödescytometri 7