Immunologisk metodik Immunologisk metodik

Immunologisk metodik
Utfällningsreaktioner
Immunoassays
Western blotting, dotblot
Flödescytometri
Immunhistokemi, immuncytokemi
Immunologisk metodik
Utfällningsreaktioner
diffusioner
* radial immunodiffusion
* dubbel immundiffusion
elforeser
* counter current elfores
* raketer
* korsad immunoelfores
1
Immunologisk metodik
Immunodiffusion
radiell immunodiffusion dubbel immunodiff
immunfixering
Immunologisk metodik
Immunoelektrofores
counter current
korsad immunelfores
raketer
2
Immunologisk metodik
Immunoassay
begränsat antal antikroppsmolekyler
märkt antigen och omärkt antigen
tävlar om bindningsställen
antikroppsöverskott
ingen tävlan om bindningsställen
Immunologisk metodik
Immunoassay
heterogen
kompetitiv
homogen
icke kompetitiv
one-site
two-site
3
Immunologisk metodik
Immunoassay
direkt
markör på specifik antikropp
indirekt
markör på sekundär antikropp
Immunologisk metodik
Kompetitiv immunoassay
antikropp i botten
antigen i botten
4
Immunologisk metodik
Icke kompetitiv immunoassay
one-site t.ex serologi
Immunologisk metodik
Icke kompetitiv immunoassay
two-site
t.ex hormonanalyser
5
Immunologisk metodik
Immunoassay
markörer
radioaktivitet
enzymer
fluorescens
chemiluminiscens
partiklar
ferritin
biotin - avidin
125-I vanligast, T½ ca 60 dagar
HRP, ALP mfl
olika fluorokromer, ex FITC
ex. akridinium estrar
guld
biotin alt avidin kopplad till enzym
Immunologisk metodik
Immunoassay
olika support - några vanliga
sephadex
polystyren, latex
nitrocellulosa
PVDF - polyvinyliden difluorid
6
Immunologisk metodik
Western blotting
Immunologisk metodik
Flödescytometri
7