[SE]
Seraclone®
Anti-C (RH2), -c (RH4), -E (RH3), -e (RH5) ◄
Seraclone® (2)
Anti-C (RH2), -c (RH4), -E (RH3), -e (RH5)
ska proverna förvaras vid 2 till 8 °C.
Blodprover som uppvisar kraftig hemolys eller kontamination ska inte användas. Blod från
blodgivare som lagras i citrat-antikoagulantia får analyseras fram till utgångsdatumet på
blodpåsen.
Testutförande
Test i provplatta eller på objektglas
A. Snabbtest
Undersökningen görs på en ljuslåda vid en yttemperatur på 40 - 50 °C.
1.
Placera en droppe reagens på ett objektglas.
2.
Tillsätt 1 droppe helblod och blanda noggrant.
3.
Rör objektglaset försiktigt fram och tillbaka och kontrollera inom 2 mi-nuter med avseende
på agglutination. Avläsningen skall vara avslutad efter 2 minuter, eftersom uttorkning på
sidorna kan feltolkas som positiv reaktion.
För påvisning av erytrocytantigen C, c, E, e
◄
[REF]
802 280
5 ml
Seraclone® Anti-C (RH2)
[REF]
802 282
10 ml
®
Seraclone Anti-C (RH2)
[REF]
802 330
5 ml
Seraclone® Anti-E (RH3)
[REF]
802 331
10 ml
Seraclone® Anti-E (RH3)
[REF]
802 346
5 ml
®
Seraclone Anti-c (RH4)
[REF]
802 348
10 ml
Seraclone® Anti-c (RH4)
[REF]
802 370
5 ml
Seraclone® Anti-e (RH5)
[REF]
802 372
10 ml
[REF]
802 288
5 ml
Seraclone® (2) Anti-C (RH2)
[REF]
802 336
5 ml
Seraclone® (2) Anti-E (RH3)
[REF]
802 356
5 ml
Seraclone® (2) Anti-c (RH4)
[REF]
802 376
5 ml
®
Seraclone (2) Anti-e (RH5)
[PRES]
Konserveringsmedel: < 0,1 % NaN3
[ACT]
Aktivitet / lägsta titer
B. Inkubationstest
Suspendera de erytrocyter som skall undersökas 5-10-procentigt i isoton koksaltlösning
eller använd helblod.
2.
Blanda 1 droppe reagens och 1 droppe erytrocytsuspension eller en liten droppe
helblod på ett objektglas eller i en provplatta.
3.
Inkubera 30 minuter vid 37 °C (täck över på lämpligt sätt för att skydda mot uttorkning).
4.
Rotera försiktigt och kontrollera med avseende på agglutination.
Seraclone® Anti-e (RH5)
[IVD] Diagnostisk antistof kun for in vitro brug
Testen får endast utföras av utbildad laboratoriepersonal. [ACT] framgår av flaskans etikett.
De symboler som används överensstämmer med standarden EN 980. Symboler som inte
ingår i EN 980 förklaras i texten.
Avsedd användning
För bestämning av rhesus-undergrupperna C, c, E och e med de monoklonala reagenserna
Seraclone® Anti-C (RH2), Seraclone® Anti-c (RH4), Seraclone® Anti-E (RH3), Seraclone®
Anti-e (RH5) och Seraclone® (2) Anti-C (RH2), Seraclone® (2) Anti-c (RH4), Seraclone® (2)
Anti-E (RH3) samt Seraclone® (2) Anti-e (RH5) på objektglas, provplatta eller i provrör.
Översikt över RH-systemet
Rhesus-systemet för blodgrupper omfattar mer än 50 antigener. Antigenerna C, c, E och e
samt D är de huvudsakliga antigenerna i Rh-systemet. Även om man också har identifierat
många andra antigener är det de antikroppar som associeras med dessa fem antigener
som orsakar huvuddelen av de hemolytiska transfusionsreaktioner och fall av hemolytiska
sjukdomar hos foster och nyfödda som associeras med Rh-systemet. För bestämning av
Rh-fenotyper testas C-, c-, E- och e-antigenerna hos erytrocyterna med Anti-C (RH2), Antic (RH4), Anti-E (RH3) och Anti-e (RH5). Om erytrocyterna endast bär på stora C eller lilla c
(alternativt E eller e) behandlas individen som homozygot för just denna antigen (allel).
Genom att bestämma fenotypen kan man förutsäga den mest sannolika genotypen.
Genotypen påverkas av etniskt ursprung, vilket synliggörs i tabellen.
Prevalens för de huvudsakliga Rh-haplotyperna1
Fisher-RaceModificeret Wienerhaplotype
haplotype
Vita
Rh-positiva
DCe
R1
42
DcE
R2
14
Dce
R0
4
DCE
Rz
<0,01
Rh-negativa
ce
r
37
Ce
r’
2
cE
r’’
1
CE
ry
<0,01
Prevalens (%)
Färgade
Asiater
17
11
44
<0,01
70
21
3
1
26
2
<0,01
<0,01
3
2
<0,01
<0,01
Metodbeskrivning
Testprincipen utgörs av ett hemagglutinationstest som bestämmer de olika antigenerna hos
erytrocyterna. De olika rhesus-undergrupperna definieras av sin närvaro eller frånvaro hos
erytrocyterna. Antigenerna C, c, E och e reagerar med motsvarande antikropp i Seraclone®
Anti-C (RH2), Seraclone® Anti-c (RH4), Seraclone® Anti-E (RH3), Seraclone® Anti-e (RH5)
och Seraclone® (2) Anti-C (RH2), Seraclone® (2) Anti-c (RH4), Seraclone® (2) Anti-E (RH3)
samt Seraclone® (2) Anti-e (RH5). En positiv reaktion visar sig genom omedelbar
agglutination.
Reagenserna kan användas tillsammans med objektglas, provplatta eller provrör.
Provrör rekommenderas om man vill kunna upptäcka svaga antigener.
Reagens
Seraclone® Anti-C (RH2), Seraclone® Anti-c (RH4), Seraclone® Anti-E (RH3), Seraclone®
Anti-e (RH5)) och Seraclone® (2) Anti-C (RH2), Seraclone® (2) Anti -c (RH4), Seraclone® (2)
Anti -E (RH3) samt Seraclone® (2) Anti-e (RH5) innehåller antikroppar från
immunglobulinklass
IgM
som
reaktiva
beståndsdelar.
Dessa
utvinns
ur
cellodlingssupernatant och uppvisar den konstanta specificitet och reproducerbarhet som är
utmärkande för monoklonala antikroppar.
Det bovina albumin som används vid framställning av reagenserna stammar från BSE-fria
boskapsbestånd.
Seraclone® Anti-C (RH2)
Seraclone® Anti-c (RH4)
Seraclone® Anti-E (RH3)
Seraclone® Anti-e (RH5)
Seraclone® (2) Anti-C (RH2)
®
Seraclone (2) Anti-c (RH4)
Seraclone® (2) Anti-E (RH3)
Seraclone® (2) Anti-e (RH5)
klon MS24
klon MS33
klonerna MS258/906
klonerna MS16/MS21/MS63
klonerna MS273/P3x25513G8
klon MS35
klonerna MS260/MS12
klon MS62/MS69/BS260
Reagenser och material som erfordras men inte medföljer
•
Objektglas, provplatta, Bioplate
•
Pipetter (droppvolym 40-50 μl)
•
Isoton koksaltlösning
•
Glasrör
•
Laboratoriecentrifug
•
Seraclone Control AB0+Rh ([REF] 805171)
•
Control Set QC ([REF] 816034)
Provtagning och förvaring
Färska prover av koagulerat helblod eller helblod med tillsats av EDTA- eller citratantikoagulantia, som tagits enligt generella riktlinjer för blodprovstagning, får användas.
Proverna bör analyseras så snart som möjligt efter provtagning. Om analysen blir uppskjuten
MBio-Rad Medical Diagnostics GmbH
Industriestr. 1, D-63303 Dreieich, Germany
Tel.: +49-6103-3130-0, Fax: +49-6103-3130-724
www.bio-rad.com, [email protected]
Rörtest
1.
Suspendera de erytrocyter som skall undersökas 3-5-procentigt i isoton koksaltlösning.
2.
Blanda 1 droppe reagens och 1 droppe erytrocytsuspension i ett märkt rör.
3.
Inkubera 5 minuter vid rumstemperatur eller 15 minuter vid 37 °C.
4.
Centrifugera 2 minuter vid 150 - 200 x g eller 20 sekunder vid 800 - 1000 x g.
5.
Skaka försiktigt upp innehållet och kontrollera med avseende på agglutination.
◄
Resultatens tolkning
Utvärdering av reaktionens styrka sker i enlighet med rekommendationerna i Technical
Manual1:
Reaktionens styrka
Agglutination
4+
Ett stort agglutinat
3+
Flera stora agglutinat
2+
Mellanstora agglutinat, klar bakgrund
1+
Små agglutinat, oklar bakgrund
+/Knappt synlig agglutination, oklar bakgrund
Ingen agglutination
Reaktionens stabilitet
Efter centrifugering ska samtliga provrörstester avläsas omedelbart och resultaten ska tolkas
utan fördröjning. En eventuell försening kan orsaka dissociation av antigenantikroppskomplexen, vilket i sin tur kan leda till falskt negativa eller svagt positiva reaktioner
(det senare är vanligare).
Kvalitetskontroll
Reaktiviteten för varje reagens för blodgruppsbestämning ska bekräftas varje dag den
används.
Reaktivitet och specificitet för Bio-Rad monoklonala Rh-blodgruppsbestämmande reagenser
(Anti-C, Anti-E, Anti-c och Anti-e) bekräftas genom att varje reagens testas med
antigenpositiva (helst från heterozygota individer) respektive antigennegativa erytrocyter.
Varje reagens är lämplig att använda om den reagerar enbart med antigenpositiva
erytrocyter.
Seraclone Control AB0+Rh kan användas som negativ kontroll parallellt med varje test.
Metodens prestandaegenskaper och begränsningar
• Provrör rekommenderas för att upptäcka svaga antigener.
• Anti-C-klonen MS24 ger bara en svag positiv reaktion om C och E (Rz) sitter på en
kromosom. Den reagerar starkt positivt på egenskaperna Cw och Cx.
• Seraclone® Anti-E (RH3) reagerar inte med antigenen Ew.
• Rh32-positiva erytrocyter (C)D(e) och Cx-erytrocyter (C)CxD(e) uppvisar ett svagt C- och
e-antigenuttryck och reagerar svagt positivt eller negativt med reagenserna anti-C och anti-e.
• Ytterligare e-varianter kan försvagas av eller reagera negativt på monoklonala anti-e
(MS16/MS21/MS63) och (MS62/MS69/BS260).
• Vid tvetydiga resultat rekommenderas att erytrocyterna tvättas minst två gånger.
• Erytrocyter som har lagrats kan uppvisa svagare reaktioner.
• Exempel på omständigheter som kan orsaka felaktiga resultat:
- Kontamination av prov eller reagens
- Felaktig förvaring eller beredning av erytrocyter
- Autoantikroppar
- Antikroppar mot antibiotika
- Kalla antikroppar
- Positivt direkt anti-globulintest
- Starkt lipemiska eller ikteriska prov
Vid tvivelaktiga resultat utan känd orsak kan du kontakta Bio-Rads kundservice
(telefonnummer: +49-6103-3130-611) för att få hjälp.
Förvaring och hållbarhet
Lämplig förvaringstemperatur för Seraclone Rh-serum är 2...8 °C. Efter att reagensen har
öppnats
kan
produkten
förvaras
fram
till
utgångsdatum
under
lämpliga
förvaringsförhållanden. Utgångsdatum anges på etiketten. Skadade flaskor ska inte
användas.
Varningar och försiktighetsåtgärder
• Skadade flaskor ska inte användas
• Grumlighet eller synliga förändringar kan tyda på bakteriell kontaminering. Använd inte
produkten om vätskan är grumlig.
• Manuella procedurer ska utföras enligt tillverkarens anvisningar.
• Om reagensen ska användas i automatiska system kan den behöva spädas. Eventuella
avvikelser från dessa anvisningar sker helt på användarens ansvar. Användaren ansvarar
även för eventuella förändringar av reagensen, till exempel frysning på mikrotiterplattor.
• Använda tester måste kasseras som riskavfall. Anvisningar för kassering finns i
säkerhetsdatabladet.
• Eftersom de monoklonala antikropparna framställs biotekniskt kan risken för
kontaminering med infektiösa agens betraktas som obetydlig. Trots detta ska alla
testreagenser behandlas som potentiellt infektiösa. Lämpliga säkerhetsåtgärder är att
rekommendera.
• Produktens förpackning innehåller naturligt gummilatex som kan orsaka allergiska
reaktioner.
• Produkten innehåller natriumazid (NaN3), som kan reagera med bly- eller kopparledningar
och orsaka explosiva azider. Om produkten kasseras i avloppet måste man spola med
stora mängder vatten för att förhindra att explosiva metallazider bildas.
Litteratur: ◄
(1) Technical Manual, 17th edition, Sect. 1, American Association of Blood Banks
Nyckel: Stryk under = Ytterligare eller signifikant förändring ◄= Borttagande av text
| 0197
186729/31 – 08/2016
