Karakterisering av ett protein hos Trypanosoma cruzi som kan vara inblandat i reglering av genuttryck Anna-Maja Nyström I Sydamerika lider ca 18 miljoner av Chagas sjukdom som orsakas av parasiten Trypanosoma cruzi och kan leda till döden i 10-30% av fallen. I dag finns inga vacciner eller säkra läkemedel mot sjukdomen. Döden tros orsakas av att parasiten slår ut nervsystemet i vissa delar av kroppen, framför allt i hjärtat och magtarmkanalen. Parasiten är inte bara medicinskt intressant utan utgör även en modell där många unika biologiska processer kan studeras. Världshälsoorganisationen (WHO) har startat ett projekt som syftar till att sekvensera trypanosomens hela genom, för att om möjligt hitta gener som är livsviktiga för parasiten men som skiljer sig mycket från människans gener. Dessa gener och deras produkter skulle då kunna användas som nya måltavlor för tillverkning av vaccin och läkemedel. DNA kan sägas vara en kedja uppbyggd av fyra byggstenar, eller baser, som kallas A, T, G och C. Gener utgör bitar av den här kedjan med specifika kombinationer av baserna. Gener kan översättas till proteiner som är de molekyler som utför olika funktioner i cellen. Denna översättning görs via en kopia av genen som kallas mRNA. Om man identifierar alla gener som uttrycks som mRNA i en organism får man snabbt reda på vilka bitar av DNAt som översätts till protein, eftersom en stor del av arvsmassan inte används. I en studie vid Institutionen för Genetik & Patologi vid Uppsala Universitet hittade man en del av ett mRNA som man antog bildar ett protein som binder till RNA-sekvenser rika på pyrimidin (byggstenarna C och T). I andra organismer har liknande protein, kallade PTB, visat sig delta i regleringen av översättningsprocessen genom att binda till pyrimidinrika sekvenser i mRNA. Trypanosomproteinet skulle kunna vara en måltavla för läkemedel eftersom parasitens översättningsmekanism skiljer sig från människans och en sådan process är livsnödvändig för parasiten. För att kunna undersöka detta måste man först karakterisera hela genen och läsa av DNA-sekvensen som hör till det här proteinet. I detta projekt har jagsekvensbestämt Cellkärna 70% av hela genen och hittat tre speciellt viktiga områden DNA: som har betydelse för det färdiga proteinets funktion. gen Genen kommer sedan att sättas in i en bakterie som kan producera större mängderav detta protein. mRNA protein Examensarbete i biologi, 20 p, VT 2000 Institutionen för Genetik & Patologi, Uppsala Universitet Handledare: Lena Åslund PTB