Polyclonal Rabbit
Anti-Human Tau
Kod nr. A 0024
Utgåva 02.05.03
Avsedd användning
För diagnostisk användning in vitro.
Polyclonal Rabbit Anti-Human Tau är avsedd för användning inom immunocytokemi. Antikroppen passar också
utmärkt för gelimmunoprecipiteringstekniker.
Inom immunocytokemi färgar antikroppen tau protein oberoende av fosforyleringstillstånd (3). Tau protein finns
i neuronernas axoner i centrala och perifera nervsystemen samt i filamentavlagringar i hjärnvävnad vid flera
tauopatier, t.ex. i neurofibrilla härvor vid Alzheimers sjukdom. Differentiell identifiering underlättas av resultaten
från en antikroppspanel. Tolkning måste göras av kvalificerad specialist inom ramen för patientens anamnes
och andra diagnostiska tester.
Introduktion
Tau protein är ett mikrotubulus (MT)-associerat protein som finns i hjärnan och andra neuronvävnader (1, 2).
Det uttrycks till övervägande del i axoner både i centrala och perifera nervsystemen, men är knappt detekterbar
i astrocyter och oligodendrocyter i centrala nervsystemet. I den vuxna hjärnan genererar alternativ splitsning
av 3 exoner 6 tau isoformer från 352 till 441 aminosyror i längd, dock uttrycks endast den kortaste tau
isoformen i fosterhjärna. Intracellulär ackumulering av abnormala taufilament är karaktäristiskt i en heterogen
grupp av sjukdomar kända som neurodegenerativa tauopatier; inklusive Alzheimers sjukdom (2).Bindning av
tau till MT beror på graden av fosforylering och hyperfosforylering av tau kan leda till frigörelse av tau från MT
och härigenom ökar poolen obunden tau som då kan samlas till olösliga filamentinklusioner. Den exakta
mekanismen för hur tau samlas till filament och orsakar neurodegeneration i människohjärnan har ännu inte
klargjorts.
Ingående reagenser
Renad immunoglobulinfraktion av kanin antiserum levererad i flytande form. I 0,1 mol/L NaCl, 15 mmol/L NaN 3.
Proteinkoncentration: Se etikett på flaskan.
Immunogen
Rekombinant humant tauprotein uttryckt i E-koli, motsvarande C-terminaldelen (aminosyror 243-441)
innehållande de fyra upprepade sekvenserna involverade i mikrotubulusbindning.
Specificitet
I Western blotting av lysat av Sf9 celler transfekterade med cDNA av human tau färgar antikroppen tau
oberoende av fosforylering (3).
I indirekt ELISA reagerar antikroppen med tau.
Som demonstrerats genom immunocytokemi korsreagerar antikroppen med tau-ekvivalent protein hos mus och
råtta.
Anvisningar
och försiktighetsåtgärder
1. För professionella användare.
2. Denna produkt innehåller natriumazid (NaN3), en kemikalie som i ren form är synnerligen toxisk. I
produktkoncentrationer kan natriumazid, trots att det inte klassificeras som farligt, reagera med bly- och
kopparrör och bilda högexplosiva metallazider. Skölj med stora mängder vatten när det kastas bort så att inte
metallazider ackumuleras i avloppet.
3. Som med alla produkter som kommer från biologiska källor måste korrekta procedurer användas vid
hanteringen.
4. Produkten kan användas med olika tekniker och i kombination med olika typer och material, därför bör varje
enskilt laboratorium utvärdera det testsystem som används.
Förvaring
Förvaras vid 2-8 C. Använd inte efter det utgångsdatum som är angivet på flaskan. Om reagenserna förvaras i
annorlunda miljö än de specificerade, måste förhållandena verifieras av användaren. Det finns inga tydliga
tecken som indikerar instabilitet hos denna produkt. Därför bör positiva och negativa kontroller köras samtidigt
med patientprover. Kontakta vår tekniska support om oväntad färgning observeras som inte kan förklaras med
variationer i laboratorieprocedurerna och det misstänks vara något fel med antikropparna.
Provpreparation
Paraffinpreparat: Antikroppen kan användas för färgning av paraffininbäddade vävnadspreparat fixerade i
formalin. Värmeinducerad epitopretrieval eller förbehandling av vävnader med proteinas K krävs ej.
Vävnadspreparaten får inte torka ut under den immunocytokemiska färgningsproceduren.
Frysta preparat och cellpreparationer: Antikroppen kan användas för färgning av metanolfixerade
cellpreparationer (3).
Färgningsprocedur
(105560-004)
Spädning: Polyclonal Rabbit Anti-Human Tau, kod nr. A 0024 kan användas inom ett spädningsintervall på
1:100-1:200 vid användning på formalinfixerade paraffinbäddade preparat av human hjärna med Alzheimers
sjukdom och med 30 minuters inkubation i rumstemperatur med den primära antikroppen De optimala
förhållandena kan variera beroende på preparat och prepareringsmetod och bör bestämmas av varje enskilt
laboratorium. Den rekommenderade negativa kontrollen är Dako Rabbit Immunoglobulin Fraction (Solid-Phase
Absorbed), kod nr. X 0936, spädd till samma proteinkoncentration som den primära antikroppen. Såvida inte
A 0024/SE/KLI/02.05.03 s. 1/2
Dako Denmark A/S · Produktionsvej 42 · DK-2600 Glostrup · Denmark · Tel. +45 44 85 95 00 · Fax +45 44 85 95 95 · CVR No. 33 21 13 17
stabiliteten hos det faktiska testsystemet har fastställts rekommenderas att produkten späds omedelbart före
användning eller med Dako Antibody Diluent, kod nr. S 0809.
Visualisering: DAKO LSAB™+/HRP kit, kod nr. K 0679 och DAKO EnVision™+/HRP kit, kod nr. K 4008 och K
4010, rekommenderas. För frysta preparat och cellberedningar är Dako APAAP kit, kod nr. K 0670 ett bra
alternativ om endogen peroxidasfärgning är ett bekymmer. Följ proceduren som medföljer det visualiserings-kit
som valts.
Resultatkarakteristika
Abnormala vävnader: I hjärnvävnader från patienter med Alzheimers sjukdom färgar antikroppen
neurofibrillhärvor. Antikroppen färgar tau oberoende av fosforyleringstillstånd (3).
Referenser
1. Butner KA, Kirschner MW. Tau protein binds to microtubules through a flexible array of distributed weak
sites. J Cell Biol 1991;115:717-30.
2. Trojanowski JQ, Lee VM-Y. The role of tau in Alzheimer's disease. Med Clin N Am 2002;86:615-27.
3. Biernat J, Wu Y-Z, Timm T, Zheng-Fischhöfer Q, Mandelkow E, Meijer L, et al. Protein kinase MARK/PAR1 is required for neurite outgrowth and establishment of neuronal polarity. Mol Biol Cell 2002;13:4013-28.
Förklaring av symboler
(105560-004)
Katalognummer
Temperaturbegränsning
In vitro diagnostisk medicinsk
apparat
Batchkod
Läs instruktionerna för
användning
Använd före
Tillverkare
A 0024/SE/KLI/02.05.03 s. 2/2
Dako Denmark A/S · Produktionsvej 42 · DK-2600 Glostrup · Denmark · Tel. +45 44 85 95 00 · Fax +45 44 85 95 95 · CVR No. 33 21 13 17
